[发明专利]一种新的多肽——SNARE相关的高尔基GS27蛋白20.68和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——SNARE相关的高尔基GS27蛋白20.68，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

内质网(ER)中接收新合成的蛋白，进行一定的加工改造后，又将这些蛋白输送到细胞中特定的目标位点或分泌到细胞外。这些蛋白从高尔基体的顺面(cis-Golgi)转移到高尔基体的反面(trans-Golgi)，通过一组堆积着的内质网小泡，向其反面的管网结构(trans-Golgi network，TGN)靠近。目前为止对于蛋白在高尔基复合体中是如何运动的还知之不多，蛋白通过小泡或者膜上的小管两种方式进行输送(Klausner，R.D.，Donaldson，J.G.Et al.，1992；Mellman，I.，Simon，K.，1992)，对于小泡输送机制研究得较为透彻，这种蛋白输送是通过位于小泡上的SNARE向位于质膜上的靶位点停靠实现的(Palade，G.E.，1975；Rothman，J.E.and Wieland，F.T.，1996；Hong，W.，1996)。

GS27蛋白是一条27Kd的蛋白，在细胞中与高尔基体相连接，其胞质区域或与之相对应的抗体能够抑制细胞内从内质网到高尔基体反面的管网结构的蛋白运输，它的作用阶段通常发生在蛋白从顺面/中间膜囊向反面运送的时候。GS27蛋白的这种作用方式很象高尔基体的SNARE，并且与一种作用于早期内质网-高尔基体运输阶段的membrin类似(Hay，J.C.，Chao，D.S.et al.，1997)。因此，蛋白从中间膜囊向反面管网结构的运送依赖于SNARE介导的小泡运输。GS27蛋白的N末端已附加表位的形式与高尔基体以及其外周的小泡结构相连接，另外的部分暴露于细胞质中。在基因组中，GS27蛋白的编码基因定位于染色体17q21上。

在蛋白从内质网向高尔基体顺面输送过程中，GS27蛋白并不能产生作用，其抑制作用只特异性发生在蛋白从顺面/中间膜囊向反面输送的过程中，并且受到顺面输送的蛋白量的控制，当顺面的蛋白量增加时，其抑制作用也随之增强。另外有一种SNARE相关的蛋白——GS28，它即能够抑制蛋白从内质网向高尔基体顺面的输送，也能够抑制蛋白从顺面/中间膜囊向反面的输送，但同样也受到蛋白量的控制。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与SNARE相关的高尔基GS27蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为SNARE相关的高尔基GS27蛋白20.68。

由于如上所述SNARE相关的高尔基GS27蛋白20.68蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的SNARE相关的高尔基GS27蛋白20.68蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新SNARE相关的高尔基GS27蛋白20.68蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——SNARE相关的高尔基GS27蛋白20.68以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码SNARE相关的高尔基GS27蛋白20.68的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码SNARE相关的高尔基GS27蛋白20.68的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产SNARE相关的高尔基GS27蛋白2O.68的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——SNARE相关的高尔基GS27蛋白20.68的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——SNARE相关的高尔基GS27蛋白20.68的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与SNARE相关的高尔基GS27蛋白20.68异常相关的疾病的方法。