[发明专利]一种新的多肽——人甲状腺球蛋白12和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人甲状腺球蛋白12，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

甲状腺球蛋白(TG)是一种由甲状腺产生的糖蛋白，作为一种活性激素左旋甲状腺素以及三碘甲腺原氨酸的来源起作用，它支持甲状腺激素的合成与贮存。上述激素形成自甲状腺球蛋白的碘化酪氨酸部分，并通过甲状腺球蛋白的蛋白酶解释放到血液中。甲状腺球蛋白(TG)含有内源三碘甲腺原氨酸(T.3.亚基)以及四碘甲腺原氨酸(T.4.亚基)残基，还有与位于甲状腺球蛋白多肽链上特定位置相连的内部肽。TG由甲状腺产生，然后运到囊状腔，在那里从碘化几个酪氨酸残基开始成熟，并伴随一些碘代酪氨酸残基。之后，通过胞吞进程，分子被吸入甲状腺，并在其中的溶酶体中进行选择性分裂，然后释放甲状腺激素并完成余下的分子降解(Y.Malthiery et al.,Eur.J.Biochem.165,491(1987))。

人甲状腺球蛋白的结构对碘，功能性甲状腺激素的产物的特异固定有关。在其氨基端侧，70％的序列中有三种类型的重复单元，这三种类型的重复区域具同源性，其中共有18个重复序列，有四个酪氨酸残基是形成甲状腺素与三碘甲腺原氨酸的受体位点。余下30％的蛋白缺乏重复单元，但与加利福尼亚电鳐的乙酰胆碱酯酶有高度同源性。甲状腺激素的合成位点聚集在蛋白的两端，相对的，糖基化位点则散布于多肽链上(M.Henry et al.,Eur.J.Immunol.1992.22:315)。

甲状腺球蛋白可用于治疗与甲状腺功能减退有关的疾病，例如呆小病，粘液性水肿以及寻常，原发性，继发性和第三期甲状腺功能减退(S.Lissitzky,Pharmacol.Ther.B2,219(1976))。此外，人甲状腺素蛋白的免疫显性区域位于分子的中心部分，其单克隆抗体的抗原决定部位对于诊断自身免疫性甲状腺疾病是一种有效的探针。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人甲状腺球蛋白9的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人甲状腺球蛋白12。

由于如上所述人甲状腺球蛋白12蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人甲状腺球蛋白12蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人甲状腺球蛋白12蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人甲状腺球蛋白12以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人甲状腺球蛋白12的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人甲状腺球蛋白12的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人甲状腺球蛋白12的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人甲状腺球蛋白12的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人甲状腺球蛋白12的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人甲状腺球蛋白12异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中84-401位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2566位的序列。