[发明专利]一种新的多肽——人泛素类似蛋白14和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人泛素类似蛋白14，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

哺乳动物细胞有两个蛋白分解途径，其中之一是依赖于泛素的，也是真核细胞及一些细菌中主要的途径。

泛素结合系统(ubiquitin conjugation system,UCS)是真核细胞和一些细菌主要的蛋白分解途径，UCS可以分解非正常蛋白，调节很多重要的调节蛋白的半衰期，从而调节如基因转录和细胞周期等过程。UCS对一些蛋白的水解有重要作用，例如，突变蛋白、p53、细胞表面受体、转录调节因子等等。

与泛素结合的蛋白的分解有四个步骤。(Jentsch,S.(1992)Annu.Rev.Genet.26:179-207)第一，泛素(一个小的热稳定蛋白，76个氨基酸)被泛素活化酶(E1)活化。第二，已被活化的泛素进一步与很多不同的泛素结合酶(E2)作用。第三，E2通过其C末端的氨基乙酸将泛素连接到靶蛋白的受体赖氨酸。第四，蛋白酶识别并水解上述的结合分子，泛素重新释放出来。

根据Northern杂交的结果，泛素被发现与肿瘤细胞和平滑肌细胞组织内表达，并且与病毒性疾病的治疗有关。

泛素被证明可以抑制血小板和有氧代谢产物的细胞毒性。

泛素被证明在Alzheimer’s disease患者体内的表达量升高。(Taddei,N.,etal.,Neurosci.Lett.,151:158-61(1993))

一些细胞表面受体，包括淋巴细胞自引导受体、生长激素受体、生长因子受体等都被证明受泛素调节。

通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本发明的多肽的表达谱与人泛素类似蛋白8的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人泛素类似蛋白14。

由于如上所述人泛素类似蛋白14蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人泛素类似蛋白14蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人泛素类似蛋白14蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人泛素类似蛋白14以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人泛素类似蛋白14的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人泛素类似蛋白14的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人泛素类似蛋白14的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人泛素类似蛋白14的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人泛素类似蛋白14的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人泛素类似蛋白14异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中171-557位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-673位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。