[发明专利]一种新的多肽——人逆转录酶13和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人逆转录酶13，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

逆转录病毒是一组遗传材料由单链RNA构成的病毒。在吸附并有逆转录病毒RNA进入宿主细胞后，病毒RNA就作为模板以合成互补DNA链。然后通过具有DNA多聚酶活性的一种酶作用，从而构成双链；这条双链DNA整合进入宿主基因组。由RNA引导的对自病毒RNA模板进行互补DNA合成具有DNA多聚酶活性的酶通常被称为逆转录酶。

哺乳类逆转录病毒的逆转录酶一般为单亚基结构，这些病毒可以分为B,C,D三种类型。逆转录酶是一类非常复杂的酶，在其简单的一条肽链上具有多种酶活性，主要的酶活性有：RNA引导的DNA多聚酶活性，DNA引导的DNA多聚酶活性，RNA酶H活性，DNA内切酶活性，DNA旋转酶活性，螺旋酶活性以及tRNA结合活性等(Verma,The Reverse Transriptase,Biochim.Biophys.Acta473:1-38(1997))。第三种活性特异性降解RNA:DNA双螺旋中的RNA。由RNA酶H降解RNA:DNA中间体的RNA链是一些以转录为基础的扩增体系的一个重要成分，并可与因干扰扩增的污染性核酸酶引起的不需要的降解区分开来。

现已发现有多种癌症与其他疾病是由一系列逆转录病毒引起的。有一种逆转录病毒，人免疫缺损病毒，是获得性免疫缺陷综合症(AIDS)即艾滋病的病原体。此外，逆转录酶因其本身具有几乎可自任何RNA模板生成互补DNA的能力，从而在分子生物学中成为重要的试剂，因而逆转录酶被广泛应用于杂交探针以生成核酸以及为随后的克隆与表达把单链RNA转化为双链DNA。近来，逆转录酶还被用作转录基础上扩增体系中的一种组分。这些体系扩增RNA及DNA靶序列至一万亿倍(Burg et al.,PTC Patent Application WO 89/01050(1988))。

本发明的逆转录酶与在人体内发现的逆转录酶在蛋白水平上有92％的同一性和96％的相似性，亦含有人逆转录酶家族其他成员所共有的各种特征性序列片段，且具有相似的生物学功能，故被认为是一种新的人逆转录酶，命名为人逆转录酶13。该蛋白在生物体内与引发多种癌症及其它疾病有关，该多肽及其抑制及激动剂拮抗剂可用与诊断及防治一系列由逆转录病毒引起的癌症例如艾滋病及其它疾病，在分子生物学研究中可被应用于杂交探针以生成核酸以及为随后的克隆与表达把单链RNA转化为双链DNA，还可被用作转录基础上扩增体系中的一种组分。

由于如上所述人逆转录酶13蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人逆转录酶13蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人逆转录酶13蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人逆转录酶13以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人逆转录酶13的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人逆转录酶13的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人逆转录酶13的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人逆转录酶13的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人逆转录酶13的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人逆转录酶13异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少93％相同性的多核苷酸。