[发明专利]一种新的多肽——F－盒结构蛋白52和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--F-盒结构蛋白52，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

细胞增殖是细胞通过细胞周期，完成细胞分裂而使细胞数量不断增加的生命现象。细胞周期是细胞由一次分裂的中期到下一次分裂的中期的经历，分为G₁,S,G₂和M期。细胞周期井然有序的进行，是靠cdc基因增殖相关基因有序的表达，以及检验点的严格监视和调控来保证的。现已确定，由p34^cdc2(或p33^cdk2)以及多种细胞周期蛋白的表达结合分离磷酸化与去磷酸化成为驱动细胞周期运转的引擎，最终导致细胞分裂。

细胞周期蛋白根据其序列的相似及生理功能而分为几类，脊椎动物中有细胞周期蛋白C D E F等多种。酵母及人类中同源的SKP1基因被认为是cdc4突变体及细胞周期蛋白F-结合蛋白的抑制因子。Skp1p通过Skp2p直接与细胞周期蛋白A/Cdk2结合，并通过一个被称为F-盒的结构模板与Skp2p，周期蛋白F，以及Cdc4p直接结合。泛素介导的Cin2p,Clb5p及Cdk抑制因子Sic1p的蛋白酶解需要SKP1,SKP1还把这些分子与蛋白酶解机制联系起来。许多蛋白中含有F-盒模板，从而参与泛素途径。不同的skp1突变体在G1或G2期滞留细胞，表明在循环的不同阶段中，蛋白酶解调节之间相互关联。

细胞周期蛋白F,Cdc4p以及Skp2p蛋白中都具有F-盒模板结构，该模板是一段保守的结构序列，是结合Skp1p的区域，它把Skp1p与许多蛋白结合起来。F-盒蛋白是对SCF泛素-连接酶复合物补充磷酸化底物的受体，它直接与泛素化底物接触，不同的F-盒蛋白能够选择性识别各种泛素化目标。F-盒蛋白介导分解的所有目标都是细胞的主要事件中关键的调控因子，这些主要事件包括DNA复制，细胞周期进程以及营养辨别。有些病毒蛋白中也含有F-盒结构模板，这些病毒通过超量产生F-盒抑制类似周期蛋白等的蛋白特异性亚基的降解，从而加强其复制能力或启动特异性抑制蛋白的降解。

本发明的多肽中含有F-盒结构模板，该多肽及其抑制剂拮抗剂激动剂可用于诊断及防治与细胞调控因子紊乱相关的疾病，以及防治含有F-盒结构模板的病毒感染。

由于如上所述F-盒结构蛋白52蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的F-盒结构蛋白52蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新F-盒结构蛋白52蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--F-盒结构蛋白52以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码F-盒结构蛋白52的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码F-盒结构蛋白52的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产F-盒结构蛋白52的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--F-盒结构蛋白52的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--F-盒结构蛋白52的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与F-盒结构蛋白52异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中31-1446位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2393位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。