[发明专利]一种维生素D3样正调控蛋白及编码它的多核苷酸序列

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明公开了分离的维生素D3样正调控蛋白(以下简称为VDUPLP)的多核苷酸序列及其编码的多肽，以及制备这种多肽的方法。本发明也公开了将这种多肽用于相关疾病如恶性肿瘤、血液病、HIV感染和免疫性疾病和各类炎症等的诊断、预防和/或治疗的方法。本发明还公开了利用本发明多肽筛选其拮抗剂、激动剂、抑制物和制备针对本发明多肽的抗体的方法，也公开了利用本发明基因的多核苷酸序列和多肽及其拮抗剂、激动剂、抑制物和抗体的用途。

维生素D是生物体钙代谢、磷代谢所必须物质。它经过光照及一系列反应在体内转变为活性结构1,25-二羟维生素D-3(1,25-(OH)₂D3)来发挥其功能。实验发现1,25-(OH)₂D3在HL-60细胞分化时负调控c-myc而抑止生长，正调控维生素D3正调控蛋白1(VDUP1)，以及诱导c-fms沿单细胞/巨噬细胞途径分化。(Kai-shun Chen等人，1994，生物化学与生物物理学通报(Biochimica biophysica Acta),1219 26-32)

VDUP1从HL-60 cDNA文库通过差相杂交筛选1,25-(OH)₂D3诱导克隆而获得。序列分析显示与一种脑内表达的功能不明的人类基因(Genbank保藏号M78879)同源。氚-(1,25-(OH)₂D3)放射自显影显示脑内有维生素D受体，(Stumpf,W.E.等人，1982，科学，215,1403-1405)，推想可能VDUP1来源于和M78879相同的基因以及在脑内表达。

在HL-60细胞中，VDUP1转录显著被1,25-(OH)₂D3激活，但不被另一个单细胞分化诱导子PMA所作用。VDUP1对1,25-(OH)₂D3是首级应答，蛋白合成抑制剂环己酰亚胺不妨碍1,25-(OH)₂D3对VDUP1的诱导，反而能提高VDUP1的mRNA水平，推测VDUP1 mRNA的降解是依赖翻译的降解，或者是被一种不稳定蛋白调控的降解，或者二者兼而有之。(Kai-shun Chen等人，1994，生物化学与生物物理学通报，121926-32)。

由于如上所述VDUP1蛋白在调节细胞生长、分化等机体重要功能中起重要作用，为了进一步了解上述细胞生长发育的生理过程，需要了解和鉴定参与这些过程的VDUP1蛋白，特别是首先鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新VDUPLP蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白质在细胞生长发育过程中的作用提供了基础。这种蛋白质可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础。

本发明的目的就是提供一种新的维生素D3样正调控蛋白及编码它的多核苷酸。本发明的多肽具有维生素D3样正调控蛋白基因的特征结构域，因而推断本发明的维生素D3样正调控蛋白是一种新的这类蛋白质。

本发明涉及一种分离的多肽，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少80％相同性的多核苷酸。

特别地，所述多核苷酸序列选自：(a)具有SEQ ID NO:1中90-992位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-3639位的序列

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制该蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。

本发明还涉及一种体外检测与该维生素D3样正调控蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本发明多肽的量或生物活性。

本发明也涉及一种药物组合物，它含有本发明多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。