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[发明专利]一种敲除AAV受体的方法、敲除了AAV受体的HEK293细胞株及其应用-CN201710553164.0有效
发明人：李华鹏 -专利权人：广州派真生物技术有限公司
申请日： 2017-07-07 - 公布日： 2019-07-16 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程和细胞学领域，具体涉及一种AAV受体敲除方法、敲除AAV受体的HEK293细胞株及其应用；所述被敲除的AAV受体为KIAA0319L；所述敲除方法包括：构建靶向AAVR基因组序列的sgRNA载体；转染293T细胞，培养得到各克隆细胞；Surveyor基因突变分析试验；选出AAVR突变的单克隆；再选择出高产AAV的AAVR突变细胞株；鉴定其它潜在突变位点的突变情况；把无其它突变位点的细胞株再扩大本发明的被敲除的AAV受体的HEK293细胞株生产AAV的最终产量比常规HEK293产量高出约50％。
一种 aav 受体方法除了 hek293 细胞株及其应用

[发明专利]一种FGFR1高表达的重组HEK293细胞及其应用-CN200910246588.8无效
发明人：贺浪冲;周亚丽;张彦民;罗文娟;李淼;孙萌 -专利权人：西安交通大学
申请日： 2009-11-27 - 公布日： 2010-11-03 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种FGFR1高表达的重组HEK293细胞及其应用，该重组细胞是以HEK293细胞为宿主细胞，转染宿主细胞的外源性表达载体的是包含FGFR1全长基因的表达载体。与现有只含FGFR1胞外区或部分基因序列构建的重组细胞相比，本发明构建的包含FGFR1基因全长的重组HEK293-FGFR1细胞株表面能够稳定的表达FGFR1分子，而且具有完整的分子活性。细胞膜色谱法检测HEK293-FGFR1细胞对吉非替尼有一定的保留，可以应用以FGFR为靶点的药物筛选。
一种 fgfr1 表达重组 hek293 细胞及其应用

[发明专利]一种对HEK293细胞进行悬浮培养的方法及其培养基-CN202211478622.6有效
发明人：陈文庆;徐舸辰;赵洪磊;王杰勇;类成霞 -专利权人：天信和（苏州）生物科技有限公司
申请日： 2022-11-24 - 公布日： 2023-05-19 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提出了对HEK293细胞进行悬浮培养的方法及其培养基，所述培养基包括DMEM/F12培养基和添加剂。利用本发明的方法可以高效地培养HEK293细胞，细胞活率高，同时能够在多项指标上获得比血清培养更优异的表现，尤其可以适用于转染、蛋白表达等领域。
一种 hek293 细胞进行悬浮培养方法及其培养基

[发明专利]一种腺病毒滴度的检测方法-CN201410261693.X在审
发明人：戴东升;王星星;杨仁佳;焦进安;陈婧;周鹏;王斐 -专利权人：亚宝药业太原制药有限公司
申请日： 2014-06-13 - 公布日： 2015-12-23 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：该方法包括如下步骤：将对数生长其的HEK293细胞以2×10⁴个/0.1mL/孔的细胞密度铺到细胞培养板中，置培养箱中培养使HEK293细胞贴于孔底；将被检的腺病毒梯度稀释后接种到HEK293细胞中孵育60min后，换成维持液，将培养板置于培养箱中培养，10天后记录细胞病变孔数，根据公式计算腺病毒的TCID₅₀。
一种病毒检测方法

[发明专利]一种稳定表达猪源cGAS受体基因的NF‑κB双荧光素酶报告细胞及其构建方法-CN201711089723.3在审
发明人：朱建中;周荣云;李双洁;何姗;朱美芹 -专利权人：扬州大学
申请日： 2017-11-08 - 公布日： 2018-01-19 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：该细胞系是指转入了猪源cGAS受体基因的HEK293‑NF‑κB细胞，所述HEK293‑NF‑κB细胞是引入了NF‑κB虫荧光素酶和内参海肾荧光素酶的HEK293细胞。
一种稳定表达 cgas 受体基因 nf 荧光报告细胞及其构建方法

[发明专利]一种可检测NF‑κB活化的双荧光素酶报告细胞及其构建方法-CN201711089938.5在审
发明人：朱建中;李双洁;何姗;周荣云;朱美芹;夏芃芃;敖大 -专利权人：扬州大学
申请日： 2017-11-08 - 公布日： 2018-03-27 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：所述报告细胞，是引入了NF‑κB虫荧光素酶(Fluc)和内参海肾荧光素酶(RLuc)的HEK293细胞。本发明运用高度灵敏的NF‑κB虫荧光素酶和内参海肾荧光素酶，依次引入HEK293细胞，通过独特的稳定细胞筛选技术，构建和发明NF‑κB双荧光素酶HEK293稳定报告细胞，从而提高和替代现有的NF‑κB报告细胞系
一种检测 nf 活化荧光报告细胞及其构建方法

[发明专利]降低可复制性腺病毒产生的细胞株及构建方法和应用-CN201710778032.8有效
发明人：朱涛;崔海燕;陈伟伟;段磊;李军强;马金;莘春林;邵忠琦;宇学峰;毛慧华 -专利权人：康希诺生物股份公司
申请日： 2017-09-01 - 公布日： 2021-01-15 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明提供了降低可复制性腺病毒产生的细胞株及构建方法和应用，所述降低可复制性腺病毒产生的细胞株HEK293.CS是通过敲除HEK293中与Ad5腺病毒E1基因同源的基因片段,同时提供模板质粒将其替换为能稳定E1基因表达的非同源序列，构建的一种安全腺病毒生产细胞系，与未经改造的HEK293细胞株相比，HEK293.CS的生长能力和产病毒能力没有下降，但不产生可检测的RCA；所述细胞株可用于重组人5型腺病毒进行规模化培养
降低复制性腺病毒产生细胞株构建方法应用

[发明专利]提高膜片钳试验时hERG-HEK293细胞稳定性的培养方法-CN202010689177.2在审
发明人：卜迁;岑小波;魏倩;宋文博;李耀 -专利权人：成都华西海圻医药科技有限公司;四川大学
申请日： 2020-07-16 - 公布日： 2020-10-30 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高膜片钳试验时hERG‑HEK293细胞稳定性的培养方法，属于细胞培养领域。本发明的方法，通过提高培养基中FBS的含量至20％v/v及优化传代消化的操作步骤，能提高hERG‑HEK293细胞在膜片钳试验时的稳定性，进而提高膜片钳试验的成功率。
提高膜片试验 herg hek293 细胞稳定性培养方法

[发明专利]一种稳定表达猪源TLR7受体基因的NF‑κB双荧光素酶报告细胞及构建方法-CN201711089721.4在审
发明人：朱建中;周荣云;李双洁;何姗;朱美芹 -专利权人：扬州大学
申请日： 2017-11-08 - 公布日： 2018-01-19 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：该细胞系是指转入了猪源TLR7受体基因的HEK293‑NF‑κB细胞，所述HEK293‑NF‑κB细胞是引入了NF‑κB虫荧光素酶和内参海肾荧光素酶的HEK293细胞。
一种稳定表达 tlr7 受体基因 nf 荧光报告细胞构建方法

[发明专利]一种RNA甲基化酶TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系及其构建方法-CN201810043530.2在审
发明人：崔恒宓;徐慧;孙振;薛松磊 -专利权人：扬州大学
申请日： 2018-01-17 - 公布日： 2018-06-12 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供一个应用于一种RNA甲基化酶TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系及其构建方法，该方法是通过两个分别包含抗生素筛选基因的同源重组载体、gRNA载体TRDMT1‑gRNA，以及表达Cas9的载体混合转染HEK293细胞，将两个抗生素筛选基因和转录终止信号片段整合到TRDMT1基因的第一外显子前，以终止其转录，通过抗性筛选，获得RNA甲基化酶TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系。
基因敲除甲基化酶抗生素筛选基因构建同源重组载体转录终止信号第一外显子转录功能研究基因功能抗性筛选片段整合细胞模型性状稳定甲基化转染基因应用研究

[发明专利]细胞培养用补料液及提高重组HEK293细胞蛋白表达量的方法-CN202010634109.6在审
发明人：陈宜顶;孟祥春;张林 -专利权人：北京百普赛斯生物科技股份有限公司
申请日： 2020-07-02 - 公布日： 2020-10-23 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明提供一种细胞培养用补料液及提高重组HEK293细胞蛋白表达量的方法。所述补料液包括氨基酸、无机盐、维生素、微量元素、碳水化合物和有机分子。该补料液无论用于瞬时转染的重组HEK293细胞还是稳定转染的重组HEK293细胞，都能够有效提高重组蛋白的表达量。本发明为哺乳动物细胞培养技术提供有力工具。
细胞培养用补料液提高重组 hek293 细胞蛋白表达方法

[发明专利]P糖蛋白抑制剂-CN201310060453.9有效
发明人：赵瑞芝;冯丽敏;王银洁;陈振兴;余靖宏;史长灿;肖志偲 -专利权人：广东省中医院
申请日： 2013-02-26 - 公布日： 2014-08-27 - 主分类号： A61K31/7048 文献下载
摘要：本发明公开了一种P糖蛋白抑制剂，体外试验发现，柴胡皂苷C具有显著的抑制P糖蛋白活性的作用，可有效提高HEK293细胞对于P糖蛋白底物秋水仙碱的摄取，与经典P糖蛋白抑制剂维拉帕米相比，效果持平；毒性研究显示，柴胡皂苷C的毒性很小，不影响HEK293细胞的增殖；机制研究表明，柴胡皂苷C可显著抑制P糖蛋白的表达，因此，所述柴胡皂苷C可作为P糖蛋白抑制剂。本发明所述的P糖蛋白抑制剂—柴胡皂苷C，虽然抑制效果与经典P糖蛋白抑制剂维拉帕米相比，效果稍低，但其毒性很小，不影响HEK293细胞的增殖，具有潜在的临床应用价值。
糖蛋白抑制剂

[发明专利]一种测定重组人胶质细胞源性神经营养因子活性的细胞学方法-CN201310059658.5有效
发明人：曹杰 -专利权人：潍坊易思特生物科技有限公司
申请日： 2013-02-25 - 公布日： 2013-06-12 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：一种测定重组人胶质细胞源性神经营养因子活性的细胞学方法,包括如下步骤：构建表达质粒pcDNA3.1-hGFRα1，然后制备稳定表达hGFRα1的HEK293细胞；构建表达质粒pcDNA3.1-hRET，再制备能够同时表达hGFRα1和hRET以及荧光素酶报告系统的HEK293细胞；将待测rhGDNF加入到同时表达hGFRα1和hRET以及荧光素酶报告系统的HEK293细胞中，培养后测定荧光强度F1；同时设置没有加入待测
一种测定重组胶质细胞神经营养因子活性细胞学方法

[发明专利]一种诱导成熟细胞去分化的方法-CN201310017486.5有效
发明人：苏冠男;赵燕南;魏建树;陈冰;肖志峰;戴建武 -专利权人：中国科学院遗传与发育生物学研究所
申请日： 2013-01-17 - 公布日： 2013-05-08 - 主分类号： C12N5/0735 文献下载
摘要：本发明的实验证明，本发明将具有分化功能的HEK293细胞通过低贴附表面的培养方法，人胚胎肾上皮细胞系HEK293以三维立体球状生长，实验结果表明三维球状培养的HEK293细胞发生了去分化，获得了胚胎干细胞和肾脏前体细胞的特性
一种诱导成熟细胞分化方法

[发明专利]一种适合HEK293细胞的双顺反子表达载体及其制备方法、表达系统、应用-CN201710240457.3有效
发明人：王天云;林艳;井长勤;李琴;王建华;郭梦龙 -专利权人：新乡医学院
申请日： 2017-04-13 - 公布日： 2019-09-06 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种适合HEK293细胞的双顺反子表达载体及其制备方法、表达系统、应用，属于基因工程技术领域。本发明的适合HEK293细胞的双顺反子表达载体，包含如下元件：第一核基质结合区序列‑启动子‑目的基因‑内部核糖体进入位点序列‑筛选标记基因‑Poly A–第二核基质结合区序列。该载体利用优化的MAR序列可以显著提高HEK293细胞转基因表达，克服转基因沉默，实现转基因在宿主细胞中的高效、长期表达。
一种适合 hek293 细胞顺反子表达载体及其制备方法系统应用