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[发明专利]表达禽传染性支气管炎病毒S蛋白重组新城疫载体疫苗、制备方法及应用-CN202110832593.8有效
发明人：潘兹书;许路来;温国元 -专利权人：武汉大学
申请日： 2021-07-22 - 公布日： 2023-03-24 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，尤其涉及表达禽传染性支气管炎病毒S蛋白重组新城疫载体疫苗、制备方法及应用。本发明采用反向遗传操作技术将编码IBV S蛋白基因以不同形式插入热稳定新城疫疫苗毒株(rTS09‑C)基因组，构建筛选获得表达IBV三种形式S蛋白的重组热稳定新城疫载体疫苗毒株，及表达一种优化形式S蛋白与N蛋白T细胞表位保守肽段的重组新城疫载体疫苗毒株。所构建的四株表达IBV抗原蛋白重组热稳定新城疫载体疫苗毒株均具有耐热、低毒和遗传特性稳定特征；重组新城疫载体疫苗免疫接种能诱导鸡体产生特异性免疫应答和抗NDV和IBV强毒株致死攻毒感染的免疫保护。
表达传染性支气管炎病毒蛋白重组新城载体疫苗制备方法应用

[发明专利]一种不分节段单股负链RNA病毒的重组减毒病毒株的构建方法及应用-CN202310873960.8在审
发明人：王永;葛金英 -专利权人：哈尔滨医科大学;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心）
申请日： 2023-07-17 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用RNA病毒的反向遗传操作技术快速制备减毒活疫苗的方法，通过囊膜糖蛋白基因与大聚合酶蛋白基因进行位置互换，构建不分节段单股负链RNA病毒的重组减毒病毒株。以新城疫病毒Lasota株为例，利用Vero细胞系成功救获了野生型重组病毒株，成功构建并拯救了囊膜糖蛋白基因(HN或F或F和HN共同)与大聚合酶蛋白(L)基因位置互换的重组病毒；拯救的重组病毒的毒力与亲本株相比，差异极显著，可以作为无毒疫苗株应用于免疫接种实践。
一种分节段单股负链 rna 病毒重组构建方法应用

[发明专利]一种表达非洲猪瘟病毒p72蛋白的重组病毒疫苗株-CN201510161432.5有效
发明人：杨吉飞;朱启运;陈新新;刘志杰;关贵全;罗建勋;殷宏 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2015-04-07 - 公布日： 2018-05-25 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供一种表达非洲猪瘟病毒p72蛋白的重组新城疫病毒疫苗株的制备方法及重组新城疫病毒疫苗株。本发明的方法包括：构建其中插入非洲猪瘟病毒（ASFV）的p72基因的重组转录质粒，构建转录辅助质粒系统，将上述转录质粒和转录辅助质粒共转染所述新城疫致弱株可以复制的宿主细胞BHK‑21，拯救获得重组病毒株利用本发明制备的表达非洲猪瘟病毒p72蛋白的疫苗株，在防控该动物疫病方面具有重要的储备和战略意义，并可在治疗与预防非洲猪瘟病毒中应用。
非洲猪瘟病毒疫苗株重组新城疫病毒转录辅助质粒蛋白转录质粒构建制备重组病毒疫苗重组病毒株动物疫病宿主细胞战略意义共转染新城疫复制储备基因预防治疗应用

[发明专利]一种耐热型口蹄疫重组病毒株及其在制备口蹄疫灭活疫苗中的应用-CN202010724770.6有效
发明人：郭慧琛;孙世琪;董虎;卢源录;张韵;白满元;吴金恩;茹嘉喜;尹双辉;冯霞;马军武 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2020-07-24 - 公布日： 2022-10-25 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明公开了一种耐热型口蹄疫重组病毒株及其在制备口蹄疫灭活疫苗中的应用。本发明所述的一种耐热型口蹄疫重组病毒株，命名为rM10，其是由SEQ ID NO.1所示的感染性cDNA通过病毒拯救获得的。实验证明，该重组病毒株的衣壳完全裂解的温度比野生毒株病毒的高，表明该拯救获得的口蹄疫重组病毒株rM10比野生毒株更耐热。
一种耐热口蹄疫重组病毒及其制备疫苗中的应用

[发明专利]一种重组A型口蹄疫病毒VP1基因的塞内卡重组病毒、重组疫苗株及其制备方法和应用-CN202010212907.X有效
发明人：郑海学;杨帆;曹伟军;蒋保余;朱紫祥;魏婷;郑敏;田宏;张克山;张伟;刘永杰;党文;马旭升;李丹;茹毅;何继军;郭建宏;刘湘涛 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2020-03-24 - 公布日： 2021-07-13 - 主分类号： C12N15/41 文献下载
摘要：本发明提供一种重组A型口蹄疫病毒VP1基因的塞内卡重组病毒、重组疫苗株及其制备方法和应用，涉及基因工程技术领域。本发明提供了塞内卡病毒重组核酸、包含所述重组核酸的塞内卡重组病毒、包含所述塞内卡重组病毒的塞内卡重组疫苗株及其制备方法和应用。本发明对SVV/FJ/001株基因缺失突变改造，在其cDNA中融合进A型FMDV的VP1基因，得到塞内卡重组病毒，该重组病毒能够表达融合进的基因，且表达产物具有良好的反应原性；获得的疫苗株抗原产能高，致病性显著降低甚至对猪无致病性
一种重组口蹄疫病毒 vp1 基因塞内卡病毒疫苗及其制备方法应用

[发明专利]表达J亚群禽白血病病毒Gag和Env基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株及其构建方法和应用-CN201610147336.X有效
发明人：李凯;高玉龙;王笑梅;刘长军;张艳萍;崔红玉;高立;祁小乐;王永强 -专利权人：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
申请日： 2016-03-15 - 公布日： 2019-12-10 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明公开了一种表达J亚群禽白血病病毒(ALV‑J)Gag和Env基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株及其构建方法和应用，属于医学或兽医学技术领域。本发明利用重组克隆技术，将包含ALV‑J Gag和Env基因以及CAG启动子序列的基因片段CAG‑ALVGE插入到鸡马立克氏病病毒弱毒疫苗814株的US2基因内部，构建获得在US2基因内部插入CAG‑ALVGE表达框的重组粘粒，由其拯救获得表达ALV‑J Gag和Env基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株。研究表明，本发明获得的疫苗株具有与亲本毒814疫苗株同等的体外复制能力以及良好的遗传稳定性，并且能够同时抵抗MDV超强毒株以及ALV‑J超强毒株的攻击。由此可见，本发明获得的表达ALV‑J Gag和Env基因的重组MDV疫苗株可以用于制备预防或治疗禽白血病和鸡马立克氏病的药物。
表达亚群禽白血病病毒 gag env 基因重组鸡马立克氏病病毒疫苗及其构建方法

[发明专利]一种重组弱毒肠炎沙门氏菌-CN201611261996.7有效
发明人：李明义;孙化露;刘阳;毕云英;李思菲;于泽坤;马丽;马礼照;单学强;颜瑞娟;胡秀香;李朝阳 -专利权人：山东信得科技股份有限公司;青岛信得药业有限公司
申请日： 2016-12-31 - 公布日： 2020-07-24 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明提供一种弱毒肠炎沙门氏菌rSD株，其保藏编号为CGMCC NO.13346。本发明所提供的弱毒肠炎沙门氏菌用于制备重组疫苗株。本发明另一个方面提供一种重组肠炎沙门氏菌活载体疫苗株，其基因组中包含IBDV的VP2基因。其中一个重组肠炎沙门氏菌活载体疫苗株的保藏编号为CGMCC NO.13251。本发明提供的弱毒肠炎沙门氏菌作为宿主所构建的重组疫苗株遗传稳定性好，在普通培养基连续传代20代，插入的外源基因没有发生任何突变；重组菌不含任何抗性，这符合现代细菌活疫苗的发展趋势，安全性好，不用考虑抗生素残留重组菌生长繁殖性能良好，没有因为外源基因的插入而影响细菌的增殖。
一种重组肠炎沙门氏菌

[发明专利]重组修饰的猪传染性胃肠炎病毒弱毒株及其应用-CN201910728643.0在审
发明人：冯力;陈建飞;朱向东;张鑫;时洪艳;石达;刘建波 -专利权人：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
申请日： 2019-08-07 - 公布日： 2019-11-19 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明涉及猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)弱毒株的重组及表达。由于不同病毒株之间的序列存在特异性，本发明以TGEV流行弱毒株H165为研究对象，以BAC载体pBeloBAC11为基本骨架，构建TGEV H165株感染性克隆，在感染性克隆的基础上，构建表达外源基因的重组质粒，获得了重组TGEV‑H165病毒。
感染性克隆弱毒株构建猪传染性胃肠炎病毒病毒表达外源基因基本骨架研究对象重组质粒

[发明专利]一种不依赖胰酶的猪流行性腹泻病毒变异毒株及其构建与应用-CN202210214959.X有效
发明人：肖少波;方六荣;李明翔;周艳荣;方谱县;卢佑新;彭旋 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2022-03-05 - 公布日： 2022-09-20 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明涉及一种不依赖胰酶的猪流行性腹泻病毒变异毒株及其构建与应用。具体是利用CRISPR/Cas9切割猪流行性腹泻病毒变异毒株AJ1102株感染性克隆质粒pBAC‑AJ1102，再通过同源重组方式获得将PEDV AJ1102株S2'基因替换为JS2008株S2'基因的重组质粒pBAC‑AJ1102‑S2'JS2008，转染细胞后拯救出不依赖胰酶的重组病毒rAJ1102‑S2'JS2008。重组病毒rAJ1102‑S2'JS2008在细胞中的增殖滴度明显高于AJ1102株；与AJ1102株相比，rAJ1102‑S2'JS2008株可诱导更高水平的针对PEDV经典毒株JS2008的中和抗体。
一种不依赖流行性腹泻病毒变异及其构建应用

[发明专利]制备猪链球菌GZ0565株无痕缺失突变株的方法-CN201210467416.5有效
发明人：吴宗福;邵靓;琚存祥;王卫雪;唐敏;陆承平 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2012-11-19 - 公布日： 2013-02-13 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明提供制备猪链球菌GZ0565株无痕缺失突变株的方法，涉及基因工程领域。该方法包括如下步骤：采用融合PCR方法，得到由待敲除靶基因上下游片段组成的同源重组片段；将同源重组片段插入pSET4S质粒，然后电转化至猪链球菌GZ0565株的感受态细胞进行同源重组，筛选猪链球菌GZ0565株无痕缺失突变株。本发明提供的制备猪链球菌GZ0565株无痕缺失突变株的方法，筛选效率高，得到的猪链球菌GZ0565株无痕缺失突变株，敲除了靶基因，但是不含有抗性基因，因此具有成为疫苗株的潜能。
制备链球菌 gz0565 株无痕缺失突变方法

[发明专利]串联式杂合三聚体新冠疫苗-CN202210510493.8在审
发明人：高福;戴连攀;张艳芳;徐坤 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2022-05-11 - 公布日： 2022-09-30 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种新型冠状病毒原型株、Delta和Omicron变异株的重组嵌合抗原、其制备方法和应用。本发明的重组嵌合抗原由来自新型冠状病毒原型株、Delta和Omicron变异株的RBD结构域的氨基酸序列(或其衍生序列)直接串联或者通过适当的连接序列串联而成；相较于新冠病毒原型株的RBD同源三聚体，本发明的重组嵌合抗原具有较高的免疫原性，能够高效地激活广谱保护性抗体，对原始毒株以及当前流行的各种变异株都能起到很好的预防或治疗效果。
串联式三聚体疫苗

[发明专利]串联式杂合三聚体新冠疫苗-CN202211554909.2有效
发明人：高福;戴连攀;张艳芳;徐坤 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2022-12-06 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种新型冠状病毒原型株、Delta和Omicron变异株的重组嵌合抗原、其制备方法和应用。本发明的重组嵌合抗原由来自新型冠状病毒原型株、Delta和Omicron变异株的RBD结构域的氨基酸序列(或其衍生序列)直接串联或者通过适当的连接序列串联而成；相较于新冠病毒原型株的RBD同源三聚体，本发明的重组嵌合抗原具有更高的免疫原性，能够高效地激活广谱保护性抗体，对原始毒株以及当前流行的各种变异株都能起到很好的预防或治疗效果。
串联式三聚体疫苗

[发明专利]一种表达VP2基因的重组Ⅰ型马立克氏病病毒疫苗毒株-CN201910786990.9在审
发明人：孙鹏;楚电峰;侯玉超;杜元钊;范根成;刘相娥 -专利权人：青岛易邦生物工程有限公司
申请日： 2019-08-24 - 公布日： 2019-10-18 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明构建了一株表达传染性法氏囊病毒VP2基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株并对其应用进行了探究。本发明利用同源重组技术，将包含传染性法氏囊病毒VP2基因和CMV启动子序列的基因片段CMV‑VP2及含flp识别位点的Kana基因插入到鸡马立克氏病病毒弱毒疫苗SC9‑1株的UL45/UL46基因之间，构建获得在UL45/UL46基因间插入CMV‑VP2表达框和Kana表达框的重组质粒，而后通过阿拉伯糖将Kana基因诱导掉，得到只含有CMV‑VP2表达框的重组质粒，由其拯救获得表达传染性法氏囊病毒VP2基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株。由此可见，本发明获得的表达IBDV‑VP2基因的重组MDV疫苗株可用于预防鸡传染性法氏囊病和马立克氏病。
疫苗株传染性法氏囊病毒VP2基因鸡马立克氏病病毒表达框超强毒株重组质粒构建马立克氏病病毒疫苗鸡传染性法氏囊病同源重组技术马立克氏病遗传稳定性阿拉伯糖基因插入基因片段基因诱导弱毒疫苗体外复制识别位毒株可用亲本抵抗攻击预防应用研究

[发明专利]一种表达IBDV的VP2蛋白的重组Ⅰ型马立克氏病病毒-CN201911002769.6在审
发明人：孙鹏;楚电峰;侯玉超;孙化露;李振;于晓璐;杜元钊;范根成 -专利权人：青岛易邦生物工程有限公司
申请日： 2019-10-21 - 公布日： 2020-02-11 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明构建了一株表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的重组鸡马立克氏病病毒。本发明利用同源重组技术，将包含传染性法氏囊病病毒VP2基因和CMV启动子序列的基因片段CMV‑VP2及两端含FRT识别位点的Kana基因插入到鸡马立克氏病病毒弱毒疫苗SC9‑1株的UL45/UL46基因之间，构建获得在UL45/UL46基因间插入CMV‑VP2表达框和Kana表达框的重组质粒，而后通过阿拉伯糖诱导产生FLP重组酶，识别FRT位点，将Kana基因诱导掉，得到只含有CMV‑VP2表达框的重组质粒，由其拯救获得表达传染性法氏囊病病毒VP2基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株。本发明获得的疫苗株具有与亲本毒SC9‑1疫苗株同等的体外复制能力以及良好的遗传稳定性，并且能够同时抵抗MDV超强毒株以及IBDV超强毒株的攻击。
鸡马立克氏病病毒表达框疫苗株传染性法氏囊病病毒超强毒株重组质粒构建鸡传染性法氏囊病病毒同源重组技术遗传稳定性阿拉伯糖基因插入基因片段基因诱导弱毒疫苗体外复制识别位亲本诱导抵抗攻击

[发明专利]O型口蹄疫病毒重组核酸、重组疫苗株及其制备方法和应用-CN201710256371.X有效
发明人：郑海学;杨帆;朱紫祥;曹伟军;张克山;李丹;田宏;靳野;郭建宏;何继军;才学鹏;刘湘涛 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2017-04-19 - 公布日： 2021-01-05 - 主分类号： C12N15/42 文献下载
摘要：本发明涉及一种分离的口蹄疫病毒核酸及其在制备口蹄疫病毒重组核酸和/或口蹄疫重组疫苗株中的用途、一种口蹄疫病毒重组核酸、包含所述重组核酸的口蹄疫重组病毒、由所述重组核酸编码的口蹄疫重组病毒、包含所述口蹄疫重组病毒的口蹄疫重组疫苗株、一种制备所述口蹄疫重组病毒的方法、由所述方法制备得到的口蹄疫重组疫苗以及所述口蹄疫重组疫苗在制备用于预防和/或控制动物口蹄疫疾病的药物中的用途。
口蹄疫病毒重组核酸疫苗及其制备方法应用