本发明属于动物疾病检测技术领域,公开了J亚群禽白血病病毒特异性抗原表位、融合蛋白、特异性抗体及其应用。本发明所述J亚群禽白血病病毒特异性抗原表位其氨基酸序列如SEQ ID NO1所示。实验表明,该抗原表位对J亚群血清有反应同时对AB亚群血清无反应,能够特异性识别J亚群禽白血病病毒。本发明所述融合蛋白能够制成疫苗,刺激受体产生抗体,保护受体抵抗J亚群禽白血病病毒感染。本发明所述融合蛋白免疫动物可制备J亚群禽白血病病毒特异性抗体。本发明所述J亚群禽白血病病毒特异性抗体可以与J亚群禽白血病特异性抗原表位特异性识别,开发检测试剂盒,用于区分AB亚群和J亚群禽白血病。
本发明属于动物疾病检测技术领域,公开了J亚群禽白血病病毒特异性抗原表位、融合蛋白、特异性抗体及其应用。本发明所述J亚群禽白血病病毒特异性抗原表位其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。实验表明,该抗原表位对J亚群血清有反应同时对AB亚群血清无反应,能够特异性识别J亚群禽白血病病毒。本发明所述融合蛋白能够制成疫苗,刺激受体产生抗体,保护受体抵抗J亚群禽白血病病毒感染。本发明所述融合蛋白免疫动物可制备J亚群禽白血病病毒特异性抗体。本发明所述J亚群禽白血病病毒特异性抗体可以与J亚群禽白血病特异性抗原表位特异性识别,开发检测试剂盒,用于区分AB亚群和J亚群禽白血病。
本发明公开了一种检测A、B、J和K亚群禽白血病病毒的多重PCR引物组、试剂盒及检测方法,包括检测禽白血病病毒的通用上游引物SEQ ID NO.1,A亚群禽白血病病毒的下游引物SEQ ID NO.2,B亚群禽白血病病毒的下游引物SEQ ID NO.3,J亚群禽白血病病毒的下游引物SEQ ID NO.4,K亚群禽白血病病毒的下游引物SEQ ID NO.5。实验证明,应用本发明可以同时从样品中检测出A、B、J和K亚群禽白血病病毒,特异性强,灵敏度高,操作和结果判定简便,适合进行批量样品的检测及外源性ALV的初步鉴定。
本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种快速检测禽白血病毒J亚群的RPA引物和探针、试剂盒及检测方法。该快速检测禽白血病毒J亚群的RPA引物的正向引物序列如SEQ ID No.1所示、反向引物序列如SEQ ID No.2所示;探针序列如SEQ ID No.3所示。本发明所建立的RPA方法可实现对ALV‑J亚群的快速检测,RPA检测限为10copies/μL;RPA仅特异性扩增禽白血病病毒J亚群GP85基因。采用本发明的引物和探针及检测方法具有优异的特异性、敏感性,简便、快速,实现了禽白血病毒J亚群现场快速检测;为禽白血病J亚群的临床快速检测提供了一种新的可靠的快速检测工具。
本发明公开了一种Ⅰ亚群禽腺病毒通用型PCR检测引物及检测方法,属于禽类病毒检测技术领域。本发明Ⅰ亚群禽腺病毒通用型PCR检测引物由上游引物和下游引物组成;所述上游引物如SEQ ID NO.1所示,所述下游引物如SEQ ID NO.2所示。Ⅰ亚群禽腺病毒检测方法,包括使用所述的Ⅰ亚群禽腺病毒通用型PCR检测引物进行PCR扩增反应。所述PCR扩增反应产物出现494bp片段时为阳性,否则为阴性。本发明方法为能够检测I亚群禽腺病毒A、B、C、D、E等5个种共12个血清型的通用方法,具有通用性好、特异性强、敏感性高、操作方便、快速准确等特点。
本发明公开一种血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒基因及其感染性克隆的构建。本发明J亚群禽白血病病毒全长基因组序列如SEQ IDNO:1所示,然后采用特异性引物对SEQ ID NO:1所示血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒基因进行扩增,并采用pBlueskript SK(-)为载体,鸡胚成纤维细胞为宿主细胞,构建得到血管瘤病变型型J亚群禽白血病病毒基因的感染性克隆,这为后续研究血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒的ALV-J的致病机理、基因结构以及功能的关系、病毒的复制及遗传变异规律等奠定了基础