本发明属于人核酸体外检测技术领域,具体涉及人类5号、19号、21号及X/Y染色体23个基因位点的基因分型检测试剂盒。本发明首先设计了对分布于人类5号、19号、21号及X/Y染色体上的23个基因位点同时进行基因分型的复合PCR扩增系统,其中PCR扩增引物组为:SEQ ID No.1~SEQ ID No.53;本发明的基因分型检测试剂盒包括引物组合物容器、PCR反应母液容器;引物组合物容器包含引物SEQ ID No.1~SEQ ID No.53组合物贮存液。本发明实现了对23个基因位点的单管扩增,各荧光通道内以及不同荧光通道内的基因位点扩增均衡,分型图谱良好;而且可显著节省成本、人力和时间,提高工作效率。