本发明提供了一种重组蛋白A,具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列,及编码该蛋白的基因。本发明还提供了表达该重组蛋白A的重组表达载体,和被它所转化的的大肠杆菌BL21/DE3。本发明提供的重组蛋白A用于抗体检测、分离、纯化,并能与层析介质载体组成亲和层析介质。本发明生产的重组蛋白A具有蛋白结合特异性强,亲和力高,纯化效率大大改善的优点,与市售的ProteinA Sepharose 4 Fast Flow相比,其动态吸附载量明显提高。
本发明公开了一种抗迟缓爱德华氏菌的TAT‑EseD重组蛋白及用途,抗迟缓爱德华氏菌的TAT‑EseD重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的抗迟缓爱德华氏菌的TAT‑EseD重组蛋白,其中的TAT可以携带EseD蛋白进入细胞,增强EseD蛋白作为亚单位疫苗的免疫水平,显著提高激发EseD蛋白特异性细胞毒性淋巴细胞反应水平,对于海水养殖鱼类迟缓爱德华氏菌病有更高、更长久的保护效果;利用大肠杆菌表达TAT‑EseD重组蛋白,表达量大,操作简单,成本低,安全性好。
一种类人细胞综合因子基因重组蛋白,它具有序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,具有序列表中SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。经过基因克隆、表达、纯化获得其重组蛋白,类人细胞综合因子基因重组蛋白在制备预防或治疗皮肤过敏性疾病药物中的用途,在制备预防或治疗皮肤炎症性疾病药物中的用途。类人细胞综合因子基因重组蛋白经过抗过敏、止痒、炎症抑制试验,实验结果表明,类人细胞综合因子基因重组蛋白具有消炎、止痒、抗过敏高能,达到了明显的效果。
本发明公开了一种RHDV VP10‑VP60重组蛋白,属于动物病毒抗体检测领域。所述重组蛋白包括SEQ ID NO.1所示氨基酸序列或由SEQ ID NO.1所示氨基酸序列组成。本发明还进一步公开了所述重组蛋白的基因,包含所述基因的载体和宿主细胞,以及所述重组蛋白的其制备方法和在检测RHDV的抗体中应用。利用本发明的重组蛋白检测RHDV抗体,方便快捷,灵敏度高,与其他病原体无交叉反应,特异性强,具有巨大的临床意义和和广泛的应用前景。
本发明公开了一种猫杯状病毒VP1‑VP2重组蛋白,属于动物病毒抗体检测领域。所述重组蛋白包括SEQ ID NO.1所示氨基酸序列或由SEQ ID NO.1所示氨基酸序列。本发明还进一步公开了所述重组蛋白的基因,包含所述基因的载体和宿主细胞,以及所述重组蛋白的其制备方法和在检测猫杯状病毒抗体中应用。利用本发明的重组蛋白检测猫杯状病毒,方便快捷,灵敏度高,与其他病原体无交叉反应,特异性强,具有巨大的临床意义和和广泛的应用前景。
本发明公开了一种调节鱼类肠道健康的重组蛋白及其制备方法和应用,该重组蛋白为草鱼sFasL重组蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码上述蛋白的基因的cDNA序列如SEQ ID NO.2所示,含有上述蛋白编码基因的表达载体为重组质粒pGEX‑4T‑1‑sFasL。该重组蛋白的制备包括克隆草鱼sFasL蛋白基因、表达、纯化、复性。本发明重组蛋白具有很好的生物学活性和广泛的生物学功能,能够在短时间内显著改善肠道凋亡水平,降低鱼类肠道炎症因子的表达,显著缓解鱼类肠道炎症反应,有利于提高鱼类的抗病能力,可用于制备鱼类肿瘤坏死因子抗体,
本发明涉及一种重组蛋白及其表达方法、纯化方法及用途。重组蛋白为RSV的F蛋白,即RSV‑F,所述RSV‑F的核苷酸序列为序列表SEQ ID No.1,所述RSV‑F蛋白的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2。所述重组蛋白的表达方法包括:1)RSV‑F编码片段的扩增;2)根据扩增后的RSV‑F编码片段构建包含F蛋白的亚克隆质粒;3)根据所述亚克隆质粒构建RSV‑F的真核表达质粒;4)转染所述RSV‑F的真核表达质粒于所述重组蛋白的纯化经阴离子交换柱纯化、阳离子交换柱纯化以及凝胶过滤色谱柱纯化。纯化后的RSV‑F重组蛋白,具有免疫原性,可用于RSV亚单位疫苗的研发或者RSV感染的免疫诊断。
本发明提供了一种SARS‑ConV‑2病毒S蛋白膜外BD端结构域高靶向性重组蛋白及其亚单位疫苗,编码所述重组蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示或者如SEQ ID NO:6所示;所述新型冠状病毒亚单位疫苗包含所述的重组蛋白以及药学上接受的佐剂本发明对S蛋白膜外结构域表面抗原决定簇进行筛选,找到能够刺激细胞产生强免疫反应的Sc、Se肽段基因序列,进行密码子优化后克隆到含有白喉毒素T结构的质粒载体上,分泌表达和纯化,获得纯化的重组SARS‑ConV‑2病毒S蛋白膜外BD端结构域高靶向性重组蛋白,经实验验证表明该重组蛋白可诱导特异性细胞反应,安全高效,具有良好的开发和应用前景。