本发明公开了一种野生蓝莓中熊果酸和紫檀芪的抗肿瘤活性组分的提取方法及应用,该方法包括浆渣分离;微波加热提取果酸;滤膜过滤;减压浓缩;石油醚淋洗乙醇溶液溶解,滤膜超滤,超滤后用吸附树脂进行处理,得到熊果酸洗脱液;洗脱液浓缩,得浸膏,甲醇溶解过滤;超高压提取渣;得浓缩物,将浓缩物用正己烷溶解,得到滤饼;将滤饼用甲醇溶解过滤,收集过滤液;将得到的过滤液混合,利用模拟移动床色谱分离技术分离得到熊果酸和紫檀芪,本发明可以降低蓝莓熊果酸与紫檀芪的提取成本,提高提取率,使用本发明提取方法,蓝莓熊果酸与紫檀芪提取率能高于60 m g/g,该方法易控制,操作简单,节约成本,通过脉冲超高压设备进行提取,提高提取率。