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[发明专利]一种脐带血淋巴细胞制剂的制备方法-CN202210190947.8在审
发明人：庄盼;薛玲玲;张佩瑶 -专利权人：浙江卫未生物医药科技有限公司
申请日： 2022-02-28 - 公布日： 2022-05-06 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及免疫系统技术领域，具体涉及一种脐带血淋巴细胞制剂的制备方法，通过免疫细胞与干细胞进行共培养，能够诱导淋巴细胞与脐带血间充质干细胞、脐带血淋巴细胞进行相互作用，淋巴细胞能够促进脐带血淋巴细胞分泌细胞因子，且脐带血淋巴细胞具有较好的增殖分化的作用，从而能够提高活性细胞因子的产，且脐带血淋巴细胞为未分化的淋巴细胞，其活性较强，分泌活性细胞因子的能力也较强，因此提取得到的细胞因子的活性相较于成体的外周淋巴细胞更好，且通过脐带血淋巴细胞能够对淋巴细胞进行调节，能够减少炎性细胞因子的数量。
一种脐带血淋巴细胞制剂制备方法

[发明专利]基于线粒体代谢活性分析不同淋巴细胞亚群的方法、试剂盒及其用途-CN202210982871.2在审
发明人：梁昊岳;付伟超;于文颖;麻瑶;高瀛岱;周圆;张蔷;孔晓冬 -专利权人：中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所）;天津医科大学总医院
申请日： 2022-08-16 - 公布日： 2022-10-04 - 主分类号： C12N5/0781 文献下载
摘要：本发明提供了一种非诊断目的基于线粒体代谢活性区分淋巴细胞亚群细胞模型的构建方法、非诊断目的基于线粒体代谢活性区分淋巴细胞亚群细胞的方法以及所述模型、方法的用途，所述方法和模型可以用于对包括B淋巴细胞亚群、CD4+T淋巴细胞亚群、CD8+T淋巴细胞亚群和NK细胞的主要分化和活化阶段进行分析和鉴定；基于发明提供的不同分化和活化阶段的淋巴细胞亚群，为后续基于淋巴细胞亚群的免疫相关研究或细胞治疗提供了标准。
基于线粒体代谢活性分析不同淋巴细胞方法试剂盒及其用途

[发明专利]一种高活性的肿瘤浸润淋巴细胞的制备方法-CN202110309431.6在审
发明人：王桂芳;孟东;朱毅;踪家武 -专利权人：赜誉（上海）生物科技有限公司
申请日： 2021-03-23 - 公布日： 2021-06-18 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：本发明涉及细胞培养技术领域，特别是涉及一种高活性的肿瘤浸润淋巴细胞的制备方法，包括：步骤一、将经过胶原酶、DNA酶和透明质酶处理后的肿瘤浸润淋巴细胞消化液进行密度梯度离心；将原代肿瘤浸润淋巴细胞接种至完全RPMI培养基中扩增；将一代肿瘤浸润淋巴细胞接种至转瓶中继续培养，即得高活性的肿瘤浸润淋巴细胞。本发明解决现有技术中高活性的肿瘤浸润淋巴细胞制备手段繁琐、产率低的问题。上述制备方法中，在肿瘤浸润淋巴细胞消化液的制备过程中采用“综合酶消化法”消化组织或细胞富集物，综合酶消化可以确保的单个细胞最佳获取率。上述制备方法可以用于临床肿瘤浸润淋巴细胞的制备，可以获得足够数量的淋巴细胞。
一种活性肿瘤浸润淋巴细胞制备方法

[发明专利]一种用于自体淋巴细胞培养的组合物、培养液及其应用-CN202010940077.2有效
发明人：卢戌;刘静维;王跃;刘雪松;李君阳 -专利权人：北京奥康华医学检验所有限公司
申请日： 2020-09-09 - 公布日： 2022-07-26 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于自体淋巴细胞培养的组合物、培养液及其应用。本发明所要保护的用于自体淋巴细胞培养的组合物的活性成分由血浆、抗人CD3单克隆抗体、IL‑2、IL‑7、IL‑15和PHA‑P组成。相比较于作为对照的用于培养淋巴细胞的组合物，使用含有本发明所提供的组合物的培养基诱导培养外周血单个核细胞得到的T淋巴细胞亚群的含量显著升高；淋巴细胞数量在培养14天时也显著升高，升高了1.15倍；淋巴细胞对K562细胞的杀伤活性也显著增强，增强了1.6倍。本发明所提供的用于自体淋巴细胞培养的组合物可以用于特异性诱导扩增单个核细胞产生具有高纯度和较强生物学活性的自体淋巴细胞。
一种用于淋巴细胞培养组合培养液及其应用

[发明专利]一种活性化T淋巴细胞培养液及其活性化T淋巴细胞的制备方法-CN201910504262.4有效
发明人：杨罕闻 -专利权人：蓝莲（杭州）生物科技有限公司
申请日： 2019-06-12 - 公布日： 2021-04-06 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：一种活性化T淋巴细胞培养液及其活性化T淋巴细胞的制备方法，属于细胞培养技术领域。包括AT细胞的培养和AT细胞的收获两大步骤。上述一种活性化T淋巴细胞培养液及其活性化T淋巴细胞的制备方法，其通过使用Lymactin‑T抗CD3单克隆抗体配合IL‑2，IL‑6的方法，效率极高的激活T淋巴细胞并诱导期快速增殖；并使用PMA和离子霉素配合的方法激活T细胞；该方法具有效率高，纯度高等优点。
一种活性淋巴细胞培养液及其制备方法

[发明专利]采用CD137表达量检测淋巴细胞抗大肠癌活性的方法-CN201610599781.X有效
发明人：刁宏燕;王琳;陈佳宁;崔光莹;卢翀;张琼 -专利权人：浙江大学
申请日： 2016-07-26 - 公布日： 2019-02-01 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种采用CD137表达量检测淋巴细胞抗大肠癌活性的方法，包括以下步骤：(1)、采用以下任一方案：方案①、从已分离于人体的外周血全血中分离出外周血单个核细胞PBMC；利用PBMC通过流式细胞术检测NK细胞上CD137的表达量；方案②、利用已分离于人体的外周血全血，通过流式细胞术检测NK细胞上CD137的表达量；(2)、根据CD137表达量判定淋巴细胞抗大肠癌活性。本发明通过检测大肠癌患者外周血液内淋巴细胞上CD137的表达量来指示患者淋巴细胞抗大肠癌活性的能力，能够更直观精准地提示患者淋巴细胞的活性，进而更明确的说明淋巴细胞抗肿瘤细胞的活性的强度。
采用 cd137 表达检测淋巴细胞抗大肠癌活性方法

[发明专利]制造抗原特异性T淋巴细胞的方法-CN202080059223.9在审
发明人： P·特宗科夫斯基;D·伊瓦什凯维奇-杰泽斯;M·格林维斯齐 -专利权人：格但斯克医科大学
申请日： 2020-08-24 - 公布日： 2022-04-01 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明涉及一种体外制造抗原特异性T淋巴细胞(CellTrAg)的新方法，该细胞用细胞内燃料标记并在载有抗原的单核细胞的存在下扩增，随后基于低强度的细胞内染料进行分类，其中低强度荧光是抗原特异性的标志，因为荧光损失与增殖强度相关在功能测试中评估抗原特异性，该功能测试中基于低荧光而分选的抗原特异性淋巴细胞在分选过程中比具有高荧光的非特异性淋巴细胞更具活性；在调节性T淋巴细胞的情况下，活性被定义为抑制效应性淋巴细胞功能，而在效应性T淋巴细胞的情况下，活性被定义为增强这些细胞的特征，比如增殖、细胞因子和细胞毒性因子的产生。
制造抗原特异性淋巴细胞方法

[发明专利]一种淋巴细胞永生化的构建方法-CN202211037387.9在审
发明人：杨国华;程亚婷;狄鹤仙;李颖;陈志毅;林宝怡;邵彤 -专利权人：武汉百翼生物科技有限公司
申请日： 2022-08-26 - 公布日： 2022-10-14 - 主分类号： C12N5/0781 文献下载
摘要：本发明公开了一种淋巴细胞永生化的构建方法，涉及生物技术领域。所述方法包括：将EBV悬液和环孢菌素A加入到外周血淋巴细胞中，混合均匀后放入培养箱中培养，即得永生化的淋巴细胞。本发明通过EBV悬液转化外周血B淋巴细胞，使之永生化，并通过环孢菌素A抑制血液中T淋巴细胞的活性，能极大的提高永生化淋巴细胞的构建成功率。同时，本发明通过探索不同稀释比例的外周血与淋巴细胞分离液的体积比，确定了最大成功率时，稀释血与淋巴细胞分离液的体积，为进一步构建淋巴细胞的永生化方法提供参考。
一种淋巴细胞永生构建方法

[发明专利]一种从动物肺组织中分离纯化II型固有淋巴细胞的方法-CN201611263313.1在审
发明人：万晓春;毕嘉成;崔璐璐 -专利权人：深圳先进技术研究院
申请日： 2016-12-30 - 公布日： 2017-05-17 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：本发明提供了一种从动物肺组织中分离纯化II型固有淋巴细胞的方法，该方法包括：取动物肺脏组织，破碎，加入I型胶原酶消化，得到肺组织消化溶液；将肺组织消化溶液过滤；通过Percoll法分离得到肺组织淋巴细胞；用Ⅱ型固有淋巴细胞特异性抗体标记所得到的肺组织淋巴细胞，经细胞流式技术分选得到Ⅱ型固有淋巴细胞。本发明的方法能从小鼠肺组织中分离并纯化出高活性的II型固有淋巴细胞。
一种动物组织分离纯化 ii 固有淋巴细胞方法

[发明专利]从小鼠体内获取II型固有淋巴细胞的方法及所用载体-CN201611263314.6有效
发明人：万晓春;毕嘉成;崔璐璐 -专利权人：深圳先进技术研究院
申请日： 2016-12-30 - 公布日： 2020-03-06 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供了一种从小鼠体内获取II型固有淋巴细胞的方法及所用载体，所述载体是通过基因重组技术将小鼠IgG的κ链信号肽的编码序列与鼠源IL‑33活性区编码序列连接到pcDNA3.1真核表达载体上而得到的重组表达载体本发明通过将所述重组表达载体导入动物体内，使动物体内过表达鼠源IL‑33，从而在肝脏中诱导扩增出II型固有淋巴细胞；然后分离得到肝脏组织淋巴细胞，并用Ⅱ型固有淋巴细胞特异性抗体标记所得到的肝脏组织淋巴细胞，经细胞流式技术分选得到Ⅱ型固有淋巴细胞。本发明的技术能能从C57BL/6小鼠中诱导并大量扩增、分离并纯化出高活性的II型固有淋巴细胞。
小鼠体内获取 ii 固有淋巴细胞方法所用载体

[发明专利]间充质干细胞免疫功能检测方法-CN202010096163.X在审
发明人：陶伟;贺光锐;王慧琴 -专利权人：深圳市芙丽嘉生物科技有限公司
申请日： 2020-02-17 - 公布日： 2020-05-15 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明提供一种间充质干细胞免疫功能检测方法，包括以下步骤：(1)将脐带间充质干细胞与外周血单个核细胞共培养，得到待测样本；(2)检测待测样本中淋巴细胞的增殖活性及淋巴细胞亚群的比例，该间充质干细胞免疫功能检测方法适用于非诊断目的本发明实施例所提供的间充质干细胞免疫功能检测方法将间充质干细胞与人外周血单个核细胞进行共培养，得到待测样本，通过对待测样本中的淋巴细胞亚群的比例和淋巴细胞的增殖活性的检测来评价间充质干细胞的免疫调节能力如果淋巴细胞亚群的比例、和淋巴细胞增殖的变化量越大，说明该间充质干细胞的免疫功能更强、质量更好。
间充质干细胞免疫功能检测方法

[发明专利]一种用于制备CART细胞的具有高效转染能力和生物学活性的慢病毒-CN201510279570.3有效
发明人：曹跃琼;王庆亮;胥建源;李军;朱向莹 -专利权人：上海吉凯基因科技有限公司
申请日： 2015-05-27 - 公布日： 2018-05-25 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于制备CAR‑T细胞的具有高效转染能力和生物学活性的慢病毒，该慢病毒可作为CAR‑T淋巴细胞治疗中的外源基因的载体，可以更高的效率感染T淋巴细胞，将外源基因导入到T淋巴细胞中，从而对T淋巴细胞进行基因组修饰，而且在此过程中同时起到对T淋巴细胞活化的作用，极大的简化了肿瘤免疫治疗的过程。
慢病毒生物学活性高效转染外源基因制备肿瘤免疫治疗基因组修饰细胞感染治疗

[发明专利]人外周血T淋巴细胞的处理方法及免疫原制剂和应用-CN202110293348.4有效
发明人：邹浩勇;张智;薛红刚;殷文曲;王智;程文静;黄梦;张颂;邓龙兴;余健;洪紫兰 -专利权人：武汉中生毓晋生物医药有限责任公司
申请日： 2021-03-18 - 公布日： 2022-05-17 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明涉及一种人外周血T淋巴细胞处理方法及免疫原制剂、抗血清的制备和应用，具体利用废弃的白细胞滤盘分离纯化T淋巴细胞，并进行增殖培养，对分离后的T淋巴细胞和培养后的T淋巴细胞进行抗原表面标志鉴定比较及活性比较；再将扩增培养后的高活性T淋巴细胞作为免疫原，用健康猪进行抗血清的制备，用E玫瑰花环抑制实验和细胞毒实验结果评价免疫后的效价，制定免疫程序，即可大量制备抗血清；再采集抗血浆进行血浆的分离，用于ALG产品的制备本发明可以解决抗人T淋巴细胞免疫球蛋白制备原料效价检定、成品效价检定中每次需要采集新鲜全血的限制问题，同时还能够解决抗人T淋巴细胞免疫球蛋白原料瓶颈的问题。
人外周血淋巴细胞处理方法免疫原制剂应用

[发明专利]淋巴细胞冷冻保存的方法-CN200410062235.X无效
发明人：宋清华 -专利权人：宋清华
申请日： 2004-07-01 - 公布日： 2006-01-04 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：一种细胞分离、保存的方法，是将健康或较为健康的、有较大活性的细胞取出体外，进行分离、激活、增殖，然后冷冻保存或不进行冷冻保存，以期在需要的时候，提供一个有效的、且安全可靠的、疾病预防或治疗的材料。其内容包括志愿者为细胞保存提出申请，申请者的血液检查，静脉采血，通过密度离心法自静脉血中分离淋巴细胞，淋巴细胞的激活和培养，活性化淋巴细胞的回收，淋巴细胞的冷冻保存，使用时冷冻细胞的解冻复原等过程。
淋巴细胞冷冻保存方法

[发明专利]一种体外人工分离淋巴细胞及冷冻保存的方法-CN201610247715.6在审
发明人：李成毅;朱彤 -专利权人：广东常青生命科学研究有限公司
申请日： 2016-04-20 - 公布日： 2016-06-15 - 主分类号： C12N5/0781 文献下载
摘要：本发明公开了一种体外人工分离淋巴细胞及冷冻保存的方法，包括：抽取静脉血注入采血管，3000rpm离心10分钟；取上层淡黄色血浆作为自体血浆，采血管加特定培养液；第一离心管加Ficoll-Paque Plus，将稀释血样加在其上,400g离心30分钟；第二吸管吸取第一离心管中不透明细胞层转第二离心管；第二离心管加冷特定培养液，250g离心10分钟；弃上清，重悬淋巴细胞于冷特定培养液，洗涤两次，留细胞悬液；将第二离心管中淋巴细胞重悬于冷冻保存液；将淋巴细胞转冻存管，4℃平衡10分钟，按1℃/分钟降温，将细胞存在-150℃气态液氮罐。本发明改良并建立一种能长期冻存在深低温下高活性淋巴细胞体外生产流程，可获得足量高活性淋巴细胞，通过预存淋巴细胞，可择机复苏、培养、回输淋巴细胞。
一种体外人工分离淋巴细胞冷冻保存方法

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