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[发明专利]脑钠肽的制备方法-CN201110232338.6无效
发明人：范文超;柳鹏福;吴黎诚;刘萍 -专利权人：中国科学院上海生命科学研究院湖州工业生物技术中心
申请日： 2011-08-15 - 公布日： 2011-12-14 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及生物医药工程技术领域，涉及一种基因工程方法构建脑钠肽重组工程菌，进而发酵、纯化制备脑钠肽的方法。本发明将编码脑钠肽的基因与硫氧还蛋白标签融合表达，并进一步构建完成能高表达BNP的基因工程菌；采用在发酵过程中添加IPTG和曲拉通X-100的化学渗透发酵技术，提高蛋白质在发酵过程释放至胞外，有利于其继续合成、避免胞内蛋白酶的攻击，从而促进蛋白高产量胞外积累；同时，针对硫氧还融合蛋白的热稳定性，在发酵到达终点时，对发酵液进行热处理，这样离心后，可以直接从发酵上清液中回收得到初步纯化的目标蛋白。
脑钠肽制备方法

[实用新型]一种沼气发酵罐直管式布料装置-CN201120314360.0有效
发明人：县永平;姜东平 -专利权人：县永平;姜东平
申请日： 2011-08-19 - 公布日： 2012-05-30 - 主分类号： C12M1/107 文献下载
摘要：本实用新型属于生物发酵工程技术领域，涉及大型沼气工程发酵罐或厌氧罐内的布料装置。具体应用于大型沼气工程发酵罐内布料系统中。由分流器和进料系统两部分组成。相比于传统的圆盘式布料系统，具有布料均匀，不易堵塞，结构简单，发酵周期短，劳动强度小，生产成本低，操作方便，便于维修等优点。
一种沼气发酵罐直管式布料装置

[发明专利]一种重组EK酶工程菌的高密度发酵方法-CN202210698517.7有效
发明人：曹海燕;林兆生;连婕妮;王惠;朱志伟;辛瑞 -专利权人：北京惠之衡生物科技有限公司;吉林惠升生物制药有限公司
申请日： 2022-06-20 - 公布日： 2022-10-04 - 主分类号： C12N9/64 文献下载
摘要：本发明涉及生物发酵工程技术领域，尤其涉及一种重组EK酶工程菌的高密度发酵方法，具体包括：合成表达包含EK酶的重组融合蛋白的表达框序列，表达框序列如SEQ ID No.4所示，构建重组EK酶工程菌，菌种活化，高密度发酵培养，诱导表达EK酶。本发明的重组EK酶工程菌的高密度发酵方法，表达量可提高至19g/L以上，同时可显著降低包涵体蛋白的色素含量。
一种重组 ek 工程高密度发酵方法

[发明专利]可产甘露糖基因工程菌的构建方法及其应用-CN202210838573.6在审
发明人：陆萍;朱亚伦;芦叶;白若璇;江柯;高婷;赵洪新;陈海敏 -专利权人：浙江理工大学
申请日： 2022-07-18 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种产甘露糖的基因工程菌的构建方法和应用。本发明公开了一种产甘露糖(Mannose)的基因工程菌：为产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)中敲除磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(EC 4.1.1.31)基因后所得到的基因工程菌E.aerogenes本发明还同时提供了利用上述基因工程菌进行的甘露糖的制备方法：将基因工程菌E.aerogenes△ppc接种至发酵培养基进行发酵培养，收集发酵液，所述发酵液中含有甘露糖。
甘露基因工程构建方法及其应用

[发明专利]一种发酵生产L-高丝氨酸的工程菌及其构建方法和应用-CN202310958813.0在审
发明人：王志敏 -专利权人：杭州精构生物科技有限责任公司
申请日： 2023-08-01 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种发酵生产L‑高丝氨酸的工程菌及其构建方法和应用，涉及基因工程技术领域。所述工程菌的初始菌株为大肠杆菌，通过全部或部分敲除所述大肠杆菌的ygeA基因构建得到所述工程菌；所述ygeA基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。该工程菌可以提高L‑高丝氨酸的发酵产量和纯度，具有重要的工业应用价值。本发明通过敲除ygeA基因，构建得到了一种发酵生产L‑高丝氨酸的工程菌，该工程菌可以提高大肠杆菌发酵生产L‑高丝氨酸的产量和纯度，具有重要的工业应用价值。
一种发酵生产丝氨酸工程及其构建方法应用

[发明专利]一种工程化高氨氮厌氧发酵菌种驯化及发酵液浓缩的方法-CN202210090108.9有效
发明人：董泰丽;孙宪法;张东明;孙颖材;陈莉;崔青青;宁彩宏;吴军宁;李晓萍 -专利权人：山东民和生物科技股份有限公司
申请日： 2022-01-25 - 公布日： 2023-02-10 - 主分类号： C02F3/28 文献下载
摘要：本发明涉及一种工程化高氨氮厌氧发酵菌种驯化及发酵液浓缩的方法，所述工程化高氨氮厌氧发酵菌种驯化的方法通过厌氧发酵体系培菌阶段、耐高氨氮厌氧发酵菌种一级驯化阶段、耐高氨氮厌氧发酵菌种二级驯化阶段，在不增加工程运行成本的情况下，氨氮耐受浓度达到7000mg/L以上，而不产生发酵抑制现象；发酵液浓缩采用高氨氮畜禽粪污水解预处理结合固氨、超声波预处理与膜浓缩的工艺，增加膜对氨氮的截留率，减少氨氮损失，保障后续膜浓缩系统的稳定运行
一种工程化高氨氮厌氧发酵菌种驯化浓缩方法

[发明专利]一种重组腈水合酶大肠杆菌基因工程菌的高密度发酵方法-CN201710962094.4有效
发明人：杨立荣;周海胜;张红玉;吴坚平;徐刚 -专利权人：浙江大学
申请日： 2017-10-16 - 公布日： 2018-09-28 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组腈水合酶大肠杆菌基因工程菌的高密度发酵工艺，该工艺采用补料分批发酵，过程包括：细胞快繁阶段：将菌种接种至基础发酵培养基；温度为30～37℃，溶氧量为5～75％，pH值为6.8～7.2；工程菌比生长速率为0.2～0.5；产酶阶段：细胞浓度达到OD600＝70～90时，加入乳糖诱导工程菌产酶，直至发酵结束；培养温度为15～25℃，溶氧量为5～75％，pH值为6.8～7.2；工程菌比生长速率为本发明工艺将补料分批发酵人为分成两个阶段并控制各阶段的培养条件，使得重组腈水合酶基因工程菌实现高密度发酵，不仅提高了产腈水合酶的工程菌的菌浓度，还提高了腈水合酶的酶活。
腈水合酶工程菌高密度发酵大肠杆菌基因工程菌补料分批发酵溶氧量基础发酵培养基细胞基因工程菌产酶阶段菌种接种培养条件乳糖诱导生长产酶快繁酶活发酵

[发明专利]一种使用两种菌株藕合发酵实现丁二酸高产的方法-CN201510110556.0在审
发明人：吕涛 -专利权人：吕涛
申请日： 2015-03-13 - 公布日： 2015-05-20 - 主分类号： C12P7/46 文献下载
摘要：一种使用两种菌株藕合发酵实现丁二酸高产的方法，属于生物工程技术领域。本发明利用产丁二酸的基因工程菌CCTCC NO：M2012041和筛选自野生菌的放线杆菌CGMCC 1593两个发酵系统藕合代谢，工艺分三步：1、根据传统的制备纤维素水解液的方法制备葡萄糖和戊糖混合物，2、基因工程菌CCTCC NO：M 2012041发酵系统的发酵，3、放线杆菌CGMCC 1593发酵系统的发酵。基于基因工程菌CCTCC NO：M 2012041在发酵系统中利用纤维素水解糖中的葡萄糖，而天然菌株CGMCC 1593在发酵系统中利用纤维素水解糖中的戊糖，两个发酵系统藕合代谢，提高纤维素水解糖中葡萄糖和戊糖的利用率
一种使用菌株发酵实现丁二酸高产方法

[发明专利]一种重组牛粒细胞集落刺激因子工程菌的高密度发酵方法-CN201710034661.X在审
发明人：孙珊珊;王建;程雪娇;王宇鹏;李丽琴;朱士江;杨雪;王猛;于小婷;姬荣曼;杜宁宁;焦晓军;余贵菊;甄盼盼;姜淋洁;张立会;王勇;崔志刚 -专利权人：天津市中升挑战生物科技有限公司
申请日： 2017-01-18 - 公布日： 2017-08-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组牛粒细胞集落刺激因子工程菌的高密度发酵方法。本发明的方法包括将重组牛粒细胞集落刺激因子工程菌进行冻干保藏，并经过活化、摇瓶培养、种子培养后转入发酵罐进行通气搅拌发酵培养，在发酵罐培养过程中通过提高搅拌转速及空气流量来保证溶氧水平，采用补料分批培养，变指数‑恒pH值混合流加补料的方法来进行重组牛粒细胞集落刺激因子工程菌的高密度发酵。本发明降低了发酵过程中由于菌种退化导致生产异常现象的出现，优化了发酵、补料培养基及补料方法，提供的发酵方法具有发酵工艺简单，能够获得理想的高活菌浓度和稳定性好等优点，可用于重组牛粒细胞集落刺激因子工程菌的规模化生产
一种重组粒细胞集落刺激因子工程高密度发酵方法

[发明专利]重组烟酰胺核糖激酶大肠杆菌工程菌的高密度发酵方法-CN202211411364.X在审
发明人：刘灿珍;刘鹏;刘凯;王硕;王澜婷 -专利权人：广西天铭药业有限公司
申请日： 2022-11-11 - 公布日： 2023-08-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组烟酰胺核糖激酶大肠杆菌工程菌的高密度发酵方法。本发明首先构建烟酰胺核糖激酶大肠杆菌工程菌；然后采用高密度发酵培养基(氮源含量低)对工程菌进行分批补料高密度发酵，再经两次IPTG诱导产生烟酰胺核糖激酶，发酵结束时菌体湿重达到240g/L以上，将菌体破碎后进行酶活检测，其单位酶活达到90U/mL以上，总酶活达到11万U以上，其发酵方法具有发酵成本低、菌体及酶活产量高、发酵稳定性好的特点。
重组烟酰胺核糖激酶大肠杆菌工程高密度发酵方法

[发明专利]一种产碱性果胶酸裂解酶基因工程菌及其构建和应用-CN201110075505.0有效
发明人：赵庆新;沈敏;吴生才;葛月潭;成秀梅 -专利权人：盐城师范学院
申请日： 2011-03-29 - 公布日： 2017-07-14 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种产碱性果胶酸裂解酶基因工程菌及其构建方法和应用，属于遗传工程领域。本发明以全人工合成的构巢曲霉pel基因，从工业化角度，构建了大肠杆菌高效率胞外分泌表达Pel果胶酶的工程菌，还提供了用工程菌生产果胶酶的方法。该工程菌发酵时间短，37℃条件下前期发酵4 h，后期发酵2 h，共发酵6 h；酶活产量高，可达到400 U/mL；此外，所产果胶酶可以直接分泌到胞外，杂蛋白少，容易提纯，该工程菌具有很好的工业应用前景。
一种碱性果胶裂解基因工程及其构建应用

[发明专利]微生物发酵制备单体香料2,3－丁二酮的方法-CN200610043817.2无效
发明人：胡文效;魏彦锋;渊辛华 -专利权人：山东省九州食品生产力促进中心
申请日： 2006-04-19 - 公布日： 2006-12-20 - 主分类号： C12P7/26 文献下载
摘要：微生物发酵制备单体香料2，3－丁二酮的方法，属于生物化工技术领域。本发明利用农副产品如玉米、豆饼等廉价原料，利用高抗产物阻遏的地衣芽孢工程菌株，应用酶工程、发酵工程和生化工程技术，先液体发酵，制备2，3－丁二酮发酵培养物；再常压蒸馏浓缩，馏出液加入氧化剂氧化，转入精馏塔精馏本发明发酵工艺条件温和，所得产品风味自然、安全性高，产品应用于食品、化工等行业。
微生物发酵制备单体香料丁二酮方法

[发明专利]一种发酵生产谷胱甘肽的方法-CN201710896084.5在审
发明人：张传志;夏春光;于敏;王光明;王蓓华 -专利权人：正大天晴药业集团股份有限公司;正大天晴药业集团南京顺欣制药有限公司
申请日： 2017-09-28 - 公布日： 2018-01-16 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种毕赤酵母工程菌发酵生产谷胱甘肽的方法，具体的包括将毕赤酵母工程菌活化后接种至可供发酵的培养基，在可供生长的条件下进行发酵，在发酵过程中，向培养基补加补料培养基1和补料培养基2，培养至单位体积发酵液中菌体产GSH量达最高后停止发酵。该发酵方法产量高、生产周期短、发酵过程易于控制，可用于规模化发酵生产。
一种发酵生产谷胱甘肽方法

[发明专利]一种实时监测沼气发酵体系的方法及应用-CN201510983115.1有效
发明人：李十中;韩娅新;张成明;姜立;陈雪兰 -专利权人：清华大学
申请日： 2015-12-24 - 公布日： 2020-02-14 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开了一种实时监测沼气发酵体系的方法及应用，属于沼气发酵技术领域。本发明所提供的方法是通过扩增gfp基因、将其连接转化入宿主微生物中、筛选阳性克隆构建GFP基因标记的工程菌，然后将GFP基因标记的工程菌用于沼气发酵体系中，实时监测发酵系统。本发明方法克服了厌氧发酵过程中微生物生物量及代谢活性在空间和时间的分布难以实时监测的问题，将GFP基因标记的工程菌应用于沼气发酵系统的监测，能够实现快速、准确监测发酵状态及检测发酵体系中的目标微生物，定量追踪微生物数量，及时发现发酵过程中的不稳定因素，从而进一步优化产气。
实时监测工程菌沼气发酵体系微生物生物量厌氧发酵过程沼气发酵系统目标微生物宿主微生物代谢活性发酵过程发酵体系发酵系统发酵状态稳定因素阳性克隆沼气发酵准确监测产气构建扩增微生物应用筛选追踪监测检测转化优化发现

[实用新型]一种利用基因工程酶发酵温度控制降压降温的发酵装置-CN202122126365.7有效
发明人：李新华 -专利权人：山东汇牧人动物药业有限公司
申请日： 2021-09-05 - 公布日： 2022-05-06 - 主分类号： C12M1/38 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程技术领域，且公开了一种利用基因工程酶发酵温度控制降压降温的发酵装置，包括发酵仓，所述发酵仓的内部活动连接有搅拌棍，所述发酵仓的上方活动连接有温压盖，所述温压盖的下方活动连接有转动板，所述温压盖的内部活动连接有阻挡轨道，所述温压盖的下方活动连接动力轨道，所述动力轨道外部的左侧活动连接有转动轮，所述发酵仓的外部活动连接有进水管。从而打动搅拌棍搅拌发酵仓内部的原料，同时利用雾化喷头对发酵仓内部进行补水，降低内部温度，利用降压管降低发酵仓内部的气压，从而提高酶的活性，从而达到了保证基因工程的酶的活性的效果，保证了加工的效率。
一种利用基因工程发酵温度控制降压降温装置