本发明涉及一种转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶。本发明提供一种转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶,氨基酸序列如SEQ ID No.1所示;本发明还提供了编码该转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶的基因。本发明所述的转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶出现了新的受体选择性,能对天然β-半乳糖苷酶难以糖基化或无法糖基化的酚类化合物进行转糖反应,可作为酚类化合物及相关药物分子修饰和改性的有力工具,应用前景广阔
本发明公开了一种能将三七皂苷R1转化为人参皂苷Rg1的木糖苷酶突变体,涉及基因工程及蛋白质改造技术领域。具体来说是一种能将三七皂苷R1转化为人参皂苷Rg1的木糖苷酶突变体MutY257T,突变体MutY257T的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。MutY257T可降解三七皂苷R1,产物为人参皂苷Rg1;但该突变体几乎不能降解三七皂苷R2。本发明的木糖苷酶突变体MutY257T可应用于医药、保健品等行业。
本发明公开了一种三七转录因子基因PnbHLH1及其用途,即在提高三七皂苷生物合成关键酶基因表达量和增加三七愈伤组织中总皂苷与单体皂苷含量的应用,PnbHLH1基因核苷酸序列如SEQ ID NO︰1所示,编码bHLH类转录因子;本发明采用功能基因组学和代谢工程相关技术证明三七PnbHLH1转录因子具有正调控三七皂苷生物合成的功能;将本发明所述的三七PnbHLH1转录因子基因构建到植物表达载体上并转入三七愈伤组织中使其过量表达,增强了三七皂苷合成途径关键酶基因的表达量,提高了三七总皂苷与单体皂苷的产量。
本发明公开了一种三七转录因子基因PnWRKY1的用途,即在提高三七皂苷生物合成关键酶基因表达量和增加三七愈伤组织中总皂苷与单体皂苷含量的应用,PnWRKY1基因核苷酸序列如SEQ ID NO︰1所示,编码WRKY类转录因子;本发明采用功能基因组学和代谢工程相关技术证明三七PnWRKY1转录因子具有正调控三七皂苷生物合成的功能。将本发明所述的三七PnWRKY1转录因子基因构建到植物表达载体上并转入三七愈伤组织中使其过量表达,增强了三七皂苷合成途径关键酶基因的表达量,提高了三七总皂苷与单体皂苷的产量。