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[发明专利]纯化肉毒杆菌毒素的方法-CN202080034458.2在审
发明人：金在永;南桢宣;金昇昊;崔乘官;林贤泽;崔真姬 -专利权人：株式会社技特玛
申请日： 2020-04-14 - 公布日： 2022-03-25 - 主分类号： C07K14/33 文献下载
摘要：本发明公开了一种纯化肉毒杆菌毒素的方法，该方法包括：(a)预先处理含有肉毒杆菌毒素的培养基溶液，(b)利用阳离子交换色谱来纯化预先处理的肉毒杆菌毒素，(c)利用疏水色谱来纯化所述肉毒杆菌毒素，以及(d)使用阴离子交换色谱来纯化所述肉毒杆菌毒素。所述方法能够纯化肉毒杆菌毒素，该肉毒杆毒素具有高纯度和高活性，因此该方法可用于肉毒杆菌毒素的生产。
纯化杆菌毒素方法

[发明专利]生产肉毒杆菌毒素的方法-CN201480012202.6有效
发明人：金清世;宋琯荣;闵庚旼;安荣德 -专利权人：株式会社大熊
申请日： 2014-05-07 - 公布日： 2019-11-22 - 主分类号： C07K1/36 文献下载
摘要：本发明涉及生产肉毒杆菌毒素的方法，更具体地涉及一种用于制备肉毒杆菌毒素的方法，该方法包括步骤：(a)用酸处理肉毒杆菌毒素生产株的培养物，以沉淀肉毒杆菌毒素；(b)向沉淀的肉毒杆菌毒素中加入缓冲液，接着用蛋白酶抑制剂和核酸酶处理，从而提取肉毒杆菌毒素；(c)用酸处理提取出的肉毒杆菌毒素以沉淀肉毒杆菌毒素并在缓冲液中溶解沉淀物；和(d)通过阴离子交换色谱纯化肉毒杆菌毒素。使用本发明的生产肉毒杆菌毒素的方法能够通过简单的过程生产出高纯度的肉毒杆菌毒素，这表明本发明的方法是非常经济有效的。相比于通过常规方法生产的肉毒杆菌毒素，通过本发明方法生产的肉毒杆菌毒素具有高纯度，并因此具有在局部作用增加的能力。因此，会导致副作用的肉毒杆菌毒素的体循减少，安全性增加。因此，本发明的肉毒杆菌毒素可用于各种目的，包括治疗神经肌肉障碍，去除皱纹，和治疗痉挛性偏瘫和脑瘫。
生产杆菌毒素方法

[发明专利]一种重组肉毒杆菌毒素及其制备方法-CN202211067411.3有效
发明人：蒋天宇;周小雪;尹进;李欣茹;滕欣;谈畅;李腾;张浩千 -专利权人：上海蓝晶生物科技有限公司
申请日： 2022-09-01 - 公布日： 2023-06-16 - 主分类号： C07K14/33 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种重组肉毒杆菌毒素及其制备方法。本发明通过对重组肉毒杆菌毒素重链和轻链序列的设计优化，实现了不因添加和切割蛋白标签引入肉毒杆菌毒素本身序列不存在的氨基酸残基，同时能够进行肉毒杆菌毒素的高效稳定表达和活性肉毒杆菌毒素的制备，还能够极大地简化毒素蛋白的纯化工艺，实现活性肉毒杆菌毒素的高效制备。本发明提供的肉毒杆菌毒素制备方法能够快速、高效地制备肉毒杆菌毒素，易于规模化放大生产，极大地降低了肉毒杆菌毒素的生产成本。
一种重组杆菌毒素及其制备方法

[发明专利]一种制备A、B、E、F型四价肉毒抗毒素的方法-CN201810567507.3有效
发明人：余云舟;师丹阳;杨志新;陆建昇;王荣;周晓巍 -专利权人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
申请日： 2018-06-05 - 公布日： 2019-12-24 - 主分类号： C07K16/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种制备A、B、E、F型四价肉毒抗毒素的方法。本发明方法包括：以四种免疫原(A、B、E和F型肉毒毒素重组Hc蛋白)分别免疫动物，制备得到四种单价肉毒抗毒素；将所述四种单价肉毒抗毒素混合后制备得到A、B、E、F型四价肉毒抗毒素。本发明建立了肉毒毒素各型重组Hc免疫原免疫马以制备肉毒毒素治疗性中和抗体的新技术方案和中试工艺，通过精制工艺制备了高纯度、高效价的四价肉毒抗毒素。解决了不用类毒素作为免疫原制备马抗肉毒毒素治疗性抗体这个关键问题，提高了抗毒素的中和效价和产品的质量。本发明所制备的四价肉毒抗毒素可全面治疗各型肉毒素中毒。
肉毒抗毒素制备四价免疫原肉毒毒素单价抗肉毒毒素治疗性抗体工艺制备关键问题免疫动物治疗各型中和抗体中和效价中试工艺高纯度高效价抗毒素类毒素肉毒素治疗性精制蛋白

[发明专利]肉毒毒素的制造方法-CN201980076236.4在审
发明人：横内大辅;三浦亚希子;冈田龙;山下雄三;佐佐木勇弥;西畑省吾 -专利权人：一般财团法人阪大微生物病研究会
申请日： 2019-12-17 - 公布日： 2021-06-29 - 主分类号： C07K14/195 文献下载
摘要：本发明提供一种简便、毒素收率高、且可得到比活性高的毒素的肉毒毒素的制造方法。一种肉毒毒素的制造方法，其包含：(A)在培养基中由肉毒毒素产生菌产生肉毒毒素，得到包含源自上述肉毒毒素的菌体成分以及核酸成分和肉毒毒素的混合物a的工序；(B)将上述混合物a供于上述菌体成分的除去，得到包含核酸成分和肉毒毒素的混合物b的工序；(C)在上述混合物b中添加核酸内切酶，得到包含核酸分解物和肉毒毒素的混合物c的工序；(D)将上述混合物c供于核酸分解物的除去，得到肉毒毒素分离液d的工序。
毒素制造方法

[发明专利]纯化肉毒杆菌毒素的方法-CN202080034507.2在审
发明人：金在永;南桢宣;金昇昊;崔乘官;尹范镇;崔真姬 -专利权人：株式会社技特玛
申请日： 2020-04-14 - 公布日： 2022-04-12 - 主分类号： C07K14/33 文献下载
摘要：本发明公开了一种纯化肉毒杆菌毒素的方法，该方法包括：(a)预先处理含有肉毒杆菌毒素的培养基溶液，(b)利用阴离子交换色谱来纯化预先处理的肉毒杆菌毒素，以及(c)利用阳离子交换色谱来纯化所述肉毒杆菌毒素。所述方法能够使用包括阴离子交换色谱和阳离子交换色谱的简单过程纯化肉毒杆菌毒素，该肉毒杆毒素具有高纯度和高活性，因此该方法可用于肉毒杆菌毒素的生产。
纯化杆菌毒素方法

[发明专利]肉毒杆菌毒素的微结构制剂技术-CN201710947885.X在审
发明人：文景烨;李昌珍;金大建;吴东勋;姜都显;李雨兰;李廷圭;尹准镇 -专利权人：秀杰股份公司;（株）设模磊
申请日： 2017-10-12 - 公布日： 2019-04-19 - 主分类号： A61K38/48 文献下载
摘要：本发明涉及肉毒杆菌毒素的微结构制剂技术。本发明的肉毒杆菌毒素的微结构制剂技术使得精确地控制肉毒杆菌毒素的浓度，当肉毒杆菌毒素施用于人体时减轻产生的疼痛成为可能，并且还使肉毒杆菌毒素能够精确地施用于所需的位置。因此，本发明可望大大有助于安全和方便的医疗使用肉毒杆菌毒素。
肉毒杆菌毒素制剂技术微结构医疗使用疼痛安全

[发明专利]治疗窦性头痛的方法-CN200480011676.5无效
发明人： M·A·沃伊特 -专利权人：阿勒根公司
申请日： 2004-04-30 - 公布日： 2006-05-31 - 主分类号： A61P29/00 文献下载
摘要：窦性头痛可以通过对患者给予肉毒毒素来治疗。所述肉毒毒素可以是A型肉毒毒素并且所述肉毒毒素可以给予至患有窦性头痛的患者的窦膜或其附近。
治疗头痛方法

[发明专利]神经毒素/肉毒毒素复合物于制备治疗三叉神经痛的药物中的用途-CN202211582664.4在审
发明人：罗蔚锋;秦正红;齐若含;徐莹莹;邵建锋;刘晶;周旭平;黄译腺;刘春风 -专利权人：核工业总医院
申请日： 2022-12-08 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： A61K38/48 文献下载
摘要：本发明公开了一种神经毒素/肉毒毒素复合物于制备治疗三叉神经痛的药物中的用途。所述神经毒素/肉毒毒素复合物由眼镜蛇神经毒素和肉毒毒素组成。本发明采用神经毒素/肉毒毒素复合物对三叉神经痛模型进行镇痛效果实验，相比与单独使用肉毒毒素，本发明中的神经毒素/肉毒毒素复合物可以在短时间内显著提升机械丝痛阈中的痛阈值，延长镇痛效果的药效时间。
神经毒素复合物制备治疗三叉神经痛药物中的用途

[发明专利]可长期储存的肉毒杆菌毒素冻干制剂剂型-CN202280013766.6在审
发明人：徐正德;金韩星;金敬伦 -专利权人：株式会社大熊
申请日： 2022-02-07 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： A61K9/19 文献下载
摘要：本发明涉及可长期储存的肉毒杆菌毒素冻干剂型组合物，其包含肉毒杆菌毒素、硫酸鱼精蛋白、等渗剂和缓冲剂，并且根据本发明的肉毒杆菌毒素冻干剂型降低了肉毒杆菌毒素在冻干过程中的失活速率，可以比常规肉毒杆菌毒素冻干剂型更长时间地保持肉毒杆菌毒素的稳定性，形成均匀的粒度，使得在给药部位表现出的效果相同，并且能够防止仅在一些部位处表现出过量毒素给药效果的副作用。
长期储存杆菌毒素制剂剂型

[发明专利]一种重组肉毒杆菌神经毒素及其制备方法和应用-CN202211539717.4在审
发明人：王师亮;王江田;张彦军;刘应康 -专利权人：海雅美生物技术（珠海）有限公司
申请日： 2022-12-02 - 公布日： 2023-03-21 - 主分类号： C07K14/33 文献下载
摘要：一种重组肉毒杆菌神经毒素及其制备方法和应用，属于生物工程技术领域，重组肉毒杆菌神经毒素的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示。本发明的一种重组肉毒杆菌神经毒素，其插入外源蛋白酶识别位点，有效提高对单链多肽的切割效率，得到具有较高生物活性的双链形式BoNT/A。本发明的一种双链式肉毒杆菌神经毒素的制备方法，通过高效切割所述的重组肉毒杆菌神经毒素制得双链式肉毒杆菌神经毒素。进一步地，在大肠杆菌中定量等比表达单链形式重组肉毒杆菌神经毒素和外源蛋白酶，外源蛋白酶可在大肠杆菌中切割单链形式重组肉毒杆菌神经毒素产生活性形式的双链式肉毒杆菌神经毒素，从而实现利用大肠杆菌进行一步生产
一种重组杆菌神经毒素及其制备方法应用

[发明专利]用于外用制剂的穿膜肽介导的肉毒毒素的组合物及其制备方法和应用-CN201310021667.5无效
发明人：刘睿;吴皓;程建明;卞慧敏;王令充 -专利权人：南京中医药大学
申请日： 2013-01-22 - 公布日： 2013-05-08 - 主分类号： A61K38/48 文献下载
摘要：本发明公开了用于外用制剂的穿膜肽介导的肉毒毒素的组合物及其制备方法和应用，所述穿膜肽通过与肉毒毒素组合的形式存在或者穿膜肽通过与肉毒毒素形成融合蛋白的形式存在。本发明通过大量实验筛选，优选出最佳的氨基酸序列与肉毒毒素进行组合，另外本发明还通过大量实验将穿膜肽与肉毒毒素通过基因重组方式获得融合蛋白质，通过经皮扩散实验研究表明，本发明提供的基于穿膜肽介导下的肉毒毒素转运速率与透过率明显高于现有技术的肉毒毒素外用给药制剂
用于外用制剂穿膜肽介导毒素组合及其制备方法应用

[发明专利]肉毒杆菌毒素的微结构制备技术-CN202080077063.0在审
发明人：文景烨;李昌珍;金大建;吴东动;姜都显;李雨兰;申周衡;李廷圭;尹明熙 -专利权人：秀杰股份公司;（株）设模磊
申请日： 2020-10-30 - 公布日： 2022-06-14 - 主分类号： A61K38/48 文献下载
摘要：本发明涉及肉毒杆菌毒素的微结构制备技术。本发明的肉毒杆菌毒素的微结构制备技术能够精细调节肉毒杆菌毒素的浓度，减轻其施用于人体时的疼痛，并使毒素能够注射到准确的施用部位。因此，该技术有望在肉毒杆菌毒素安全、方便的医疗应用中得到广泛应用。
杆菌毒素微结构制备技术

[发明专利]含有单宁酸的肉毒杆菌毒素药物组合物-CN202011167855.5在审
发明人：朴淳铉;金基锡;李在冕;李在赫 -专利权人：韩国化学研究院
申请日： 2020-10-27 - 公布日： 2021-02-09 - 主分类号： A61K38/16 文献下载
摘要：本发明涉及包含单宁酸作为有效成分的肉毒杆菌毒素药物组合物，本发明一方面提供的包含单宁酸的肉毒杆菌毒素药物组合物不仅改善肉毒杆菌神经毒素本身的活性，而且还通过单宁酸的特性使得肉毒杆菌神经毒素停留在注射部位并防止其扩散到血液中，因此具有使由肉毒杆菌神经毒素的扩散引起的现有的肉毒杆菌的副作用最小的效果。
含有单宁酸杆菌毒素药物组合

[发明专利]一种D型肉毒毒素的仿生矿化加工方法及应用-CN201710769674.1有效
发明人：李生庆;张西云;刘怀新;黄荣;胡国元;王亭亭 -专利权人：青海省畜牧兽医科学院
申请日： 2017-08-31 - 公布日： 2020-07-14 - 主分类号： C07K14/33 文献下载
摘要：本发明属于生物农药技术领域，具体公开了一种D型肉毒毒素的仿生矿化加工方法，包括用甲基纤维素溶液、羧甲基纤维素钠溶液、含蔗糖的明胶溶液的混合物对D型肉毒毒素蛋白进行保护，得到的D型肉毒毒素核液经海藻酸钙保护壳膜包被，最后经精蛋白/氧化硅杂化壳壁包被，得到仿生矿化加工的D型肉毒毒素颗粒。本发明公开的方法首次将仿生矿化技术应用于D型肉毒毒素的加工，明显提高了D型肉毒毒素对温度的耐受性，降低了D型肉毒毒素储藏要求，极大的降低了毒素的冷链保护条件要求。
一种型肉毒毒素仿生加工方法应用

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