本公开涉及生物技术领域,具体地,涉及一种用于检测野八角和/或红毒茴的核酸试剂、试剂盒及检测方法。其中,所述核酸试剂是针对野八角和/或红毒茴的叶绿体基因片段psbA‑trnH设计得到的,包括SEQ ID NO.1‑2所示的引物和SEQ ID NO.5所示的探针,以及SEQ ID NO.3‑4所示的引物和利用本公开提供的核酸试剂、试剂盒或者方法,能够基于psbA‑trnH基因实现野八角和/或红毒茴成分的双重PCR检测,能够快速、准确地实现待测样本中野八角和/或红毒茴的检测或鉴别,具有良好的灵敏性、特异性和重复性