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[发明专利]一种全层皮肤模型的构建方法-CN201510183861.2有效
发明人：明磊国;张勇杰;卢永波 -专利权人：陕西博溪生物科技有限公司
申请日： 2015-04-17 - 公布日： 2015-06-24 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明涉及一种全层皮肤模型的构建方法，该全层皮肤模型具有成纤维细胞组成的真皮层和表皮细胞组成的表皮层，可用于替代动物皮肤组织进行化妆品等的物质检测；本发明通过梯度时间进行真皮层细胞的接种，同时联合Vc的使用，促使真皮层的细胞大量分泌胶原并形成成熟的胞外基质，在细胞复层化的过程中胞外基质又为细胞提供了天然的三维支架和生长空间，提高了其生物活性和生物相容性；同时，通过多次借种与细胞增殖自身的复层化过程相结合，增加了真皮层的厚度、机械强度、稳定性；真皮层与表皮结合后，培养液能够满足真皮层和表皮层细胞的活性及生物学功能的发挥。
一种皮肤模型构建方法

[发明专利]人原代角质形成细胞和成纤维细胞的提取和培养方法-CN202310197456.0在审
发明人：徐明恺;张博文;刘时光;赵冬梅;杨宗艺;刘双;张志强;吕静;王宇;霍冉 -专利权人：沈阳泽尔检测服务有限公司
申请日： 2023-03-03 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明涉及分子细胞生物学领域，具体涉及人原代角质形成细胞和成纤维细胞的提取和培养方法；将待处理人体组织先与dispaseII中性分离酶在37℃下处理30‑60min，取出组织进行4℃低烈度超声波处理后，再机械分离得到表皮层和真皮层。分别对表皮层和真皮层进行低温苏醒，胰酶处理，从表皮层得到角质形成细胞，从真皮层得到成纤维细胞，并用对应的培养基进行培养。本发明利用低烈度超声加快了组织的分离速度，并采用独创的低温苏醒步骤保护了细胞结构，易于梳理、提取活细胞，整体处理过程简单，成本消耗较低，适合广泛应用，尤其适用于对人上皮细胞的提取和研究。
人原代角质形成细胞纤维提取培养方法

[发明专利]一种含基底膜的人工皮肤及制备方法-CN202310858924.4在审
发明人：张甜甜;王敏;邢志青;张平;蔺易;单风娟;孙红;王鑫玉;王杰;王红丽 -专利权人：济南磐升生物技术有限公司
申请日： 2023-07-13 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： A61L27/60 文献下载
摘要：本发明提供了一种含基底膜的人工皮肤及制备方法，该方法以真皮成纤维细胞、角质形成细胞以及基底膜的结构组成成分制备含基底膜的人工皮肤。该方法中，在真皮成纤维细胞中添加了基底膜的结构组成成分、细胞外基质成分和维持细胞生长需要的成分，这些成分可以促进真皮成纤维细胞的生长、增殖，或可以作为真皮成纤维细胞的支架材料，或可以增强细胞间粘连及细胞与基质的粘连，或可刺激、促进真皮细胞或者表皮细胞分泌一些细胞外基质成分，在真皮层和表皮层之间形成基底膜，使真皮层和表皮层之间的连接更加紧密。该人工皮肤包含表皮层、基底膜和真皮层，含有活细胞，与正常皮肤结构相似，可用于多种创伤造成的皮肤创面的治疗、皮肤模型的制备。
一种基底人工皮肤制备方法

[发明专利]一种人工双层皮肤及其制备方法-CN201910067699.6在审
发明人：唐辉;杨涛;伍津津;雷霞;杨桂红 -专利权人：中国人民解放军陆军特色医学中心
申请日： 2019-01-24 - 公布日： 2019-04-02 - 主分类号： A61L27/40 文献下载
摘要：本发明属于器官组织工程技术领域，具体涉及一种人工双层皮肤及制备方法，其中本发明的人工双层皮肤有类似于正常人体皮肤的表皮层和真皮层，所述真皮层包括支架材料和真皮层细胞，且真皮层内还包含有血管样结构；所述表皮层为覆盖在真皮层的表皮细胞通过切片H.E染色显示，本发明制备的人工皮肤有着和天然皮肤相似的组织结构特征，表皮层细胞分化良好，真皮层细胞分布均匀，形态饱满，组织间可见血管样结构，赋予了人工皮肤重要的生理功能。含血管结构的人工双层皮肤在移植后的早期，能为细胞提供足够的氧气和其他营养成分，可直接应用于因各种因素导致的皮肤缺损的修复。
真皮层双层皮肤表皮层制备人工皮肤血管工程技术领域正常人体皮肤组织结构特征细胞表皮细胞皮肤缺损器官组织生理功能天然皮肤细胞分布细胞分化血管结构支架材料染色切片氧气修复移植覆盖赋予应用

[发明专利]诱导多能干细胞向皮层神经细胞分化的无血清培养体系-CN201810818078.2在审
发明人：甄威;刘子铖;康健;周海荣 -专利权人：九三极恒生物医药科技江苏有限公司
申请日： 2018-07-24 - 公布日： 2018-11-27 - 主分类号： C12N5/079 文献下载
摘要：本发明属于干细胞生物学和细胞培养技术领域，提出了促进诱导多能干细胞向皮层神经细胞分化的无血清培养体系，具体包括无血清分化基本培养基及促进皮层神经细胞分化的添加物。其中，无血清基本培养基必要成分包括：DMEM/F12培养基，人血清白蛋白，L‑谷氨酰胺，D‑葡萄糖，维生素C，N2/B27细胞培养添加剂，非必需氨基酸。促进皮层神经细胞分化的添加物，具体包括：SB431542，皮啡肽，成纤维生长因子‑2，维甲酸，BDNF，GDNF，CTNF，DAPT，阿糖胞苷。用此培养基可以帮助提高细胞混合体系中的皮层神经细胞分化，减少向其他类型细胞的分化，从而最终得到高纯度的皮层神经细胞。
皮层神经细胞分化诱导多能干细胞添加物基本培养基无血清培养无血清成纤维生长因子细胞培养添加剂非必需氨基酸干细胞生物学人血清白蛋白细胞培养技术神经细胞葡萄糖分化细胞阿糖胞苷谷氨酰胺混合体系培养基维生素C 高纯度维甲酸帮助

[发明专利]人胚皮层神经干细胞的原代细胞的分离培养方法-CN201110448000.4无效
发明人：陆华 -专利权人：陆华
申请日： 2011-12-27 - 公布日： 2012-07-04 - 主分类号： C12N5/0735 文献下载
摘要：本发明提出一种人胚皮层神经干细胞的原代细胞的分离培养方法，其其应用于人胚皮层神经干细胞的分离和培养过程，所述人胚皮层神经干细胞的分离和培养过程包括步骤：原代细胞的分离和培养；传代培养及单细胞克隆、传代；本发明采用无血清培养和单细胞克隆技术从从胚龄12周的新鲜人胚皮层中成功建立一株人胚神经干细胞，该细胞具有连续克隆能力，可传达培养，表达神经巢蛋白抗原。分化后的细胞表达神经元细胞、胶质细胞和少突胶质细胞的特异性抗原。
皮层神经干细胞细胞分离培养方法

[发明专利]一种人工皮肤及其制备方法-CN201510071024.0有效
发明人：陈海佳;王一飞;葛啸虎;马岩岩;王小燕 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2015-02-10 - 公布日： 2017-01-18 - 主分类号： A61L27/60 文献下载
摘要：该人工皮肤中包括真皮层和表皮层；其中，真皮层与表皮层贴合；真皮层包括支架材料与成纤维细胞；表皮层包括支架材料与表皮细胞；支架材料包括DMEM/F12培养基、I型鼠胶原、壳多糖、糖胺聚糖和戊二醛；表皮细胞和成纤维细胞由脂肪干细胞分化制得
一种人工皮肤及其制备方法

[发明专利]一种无支架3D细胞球结构皮肤器官的构建方法-CN202310040691.7在审
发明人：谭禹;文学军;邵漠宇;张浩 -专利权人：泛领生物医学技术（苏州）有限公司
申请日： 2023-01-12 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种无支架3D细胞球结构皮肤器官的构建方法，将人源上皮细胞和成纤维细胞按照一定比例混合，进行3D培养，这两种细胞会自组装形成类似皮肤的细胞结构，外面是上皮层，内部是真皮层。本发明制备的皮肤器官模拟了人体皮肤上皮层和真皮层的结构，可以作为一种体外皮肤模型平台，用于药物或材料进行快速高通量的筛选或鉴定，具有巨大的应用前景。
一种支架细胞结构皮肤器官构建方法

[发明专利]皮肤微球及其制备方法和应用-CN202110419985.1有效
发明人：吴耀炯;谢俊东;杨清漾 -专利权人：清华大学深圳国际研究生院
申请日： 2021-04-19 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本申请的第一方面，提供皮肤微球，该皮肤微球包括：真皮细胞微球，真皮细胞微球包含真皮细胞，真皮细胞具有第一信号通路活性报告系统；表皮层，表皮层包覆于所述真皮细胞微球的表面，表皮层包含表皮细胞，表皮细胞具有第二信号通路活性报告系统根据本申请实施例的皮肤微球，至少具有如下有益效果：该皮肤微球采用真皮细胞形成的内核和外层表皮细胞包裹的复合双层结构，更好地模拟人体本身的皮肤结构。同时，在内核和外壳上分别携带信号通路活性报告系统，使其能够及时地对待测品的作用效果产生响应，从而实现对待测品在表皮层和/或真皮层的作用的检测。
皮肤及其制备方法应用

[发明专利]基于3D打印的含血管及毛囊结构组织工程皮肤及其制备方法-CN201810340531.3有效
发明人：于保锋;曾思衡;傅松涛;解军;李静静;袁洋洋;姚志坚;张丽娜;王萱;马培元;田九博;穆秀丽;孟涛涛 -专利权人：山西医科大学
申请日： 2018-04-17 - 公布日： 2021-05-18 - 主分类号： A61L27/60 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于3D打印的含血管及毛囊结构组织工程皮肤及其制备方法，所述组织工程皮肤由表皮层、脱细胞真皮支架和真皮层构成，表皮层以表皮干细胞作为种子细胞，与载体水凝胶复合后，通过3D打印机打印在脱细胞真皮支架的上表面，分化形成正常表皮结构，真皮层以骨髓间充质干细胞、血管内皮细胞、毛乳头细胞和脂肪干细胞作为种子细胞，与载体水凝胶复合，通过3D打印机在脱细胞真皮支架的下表面打印复合有细胞因子的明胶缓释微球，同时将种子细胞的水凝胶复合物打印在明胶缓释微球中
基于打印血管毛囊结构组织工程皮肤及其制备方法

[发明专利]一种利用微流体芯片制备银屑病模型的装置和方法-CN202211698104.5在审
发明人：周卿 -专利权人：华夏启恒（上海）医药科技有限公司
申请日： 2022-12-28 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本发明涉及皮肤病治疗技术领域，具体为一种利用微流体芯片制备银屑病模型的装置和方法，包括利用微流体芯片制成的皮肤器官芯片，所述皮肤器官芯片包含表皮层、真皮层和皮下脂肪层，所述表皮层包括角质层和棘细胞层，所述真皮层含有胶原纤维、结缔组织细胞和成纤维细胞，所述皮下层主要含有脂肪细胞，所述表皮层、真皮层和皮下脂肪层的网络通路和培养室都与其他细胞层独立操作，可以在不影响其他细胞层的时候进行操作。
一种利用流体芯片制备银屑病模型装置方法

[发明专利]一种含黑色素的体外皮肤测试模型及其制备方法-CN201510795792.0有效
发明人：程蕊苹;卢永波;李潇 -专利权人：陕西博溪生物科技有限公司
申请日： 2015-11-18 - 公布日： 2016-02-24 - 主分类号： G01N33/50 文献下载
摘要：该测试模型包含真皮层和表皮层，其中所述表皮层为表皮细胞和黑色素细胞构成，真皮层为成纤维细胞及其分泌的细胞外基质形成的膜片。此皮肤模型与人体皮肤结构非常相似，构建过程模拟皮肤发育的过程，在真皮层的滋养下进行表皮层的生发并可促进黑色素的合成、分泌、转运等。
一种黑色素体外皮肤测试模型及其制备方法

[发明专利]一种具有多层表皮细胞的组织工程皮肤及其制备方法和应用-CN202111233250.6在审
发明人：朱萌;牛忠伟 -专利权人：中国科学院理化技术研究所
申请日： 2021-10-22 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开一种具有多层表皮细胞的组织工程皮肤，包括真皮层和表皮层，所述表皮层由平铺于真皮层的表皮种子细胞分化形成；其中，表皮层包括多层表皮细胞。由于包括多层表皮细胞，皮肤具有更优良的机械性能、耐磨性，能够有效保护缺损皮肤组织，避免创面二次损伤及暴露感染。同时，组织工程皮肤的真皮层是通过3D打印技术以及细胞培养得到的，具有所需的三维结构，且打印过程生物墨水中使用的聚乙二醇胍基双改性壳聚糖不仅为活细胞的分化增殖提供了养分，更能够诱导表皮细胞形成多层结构，且具有一定的抗菌性
一种具有多层表皮细胞组织工程皮肤及其制备方法应用

[发明专利]海藻酸钠水凝胶支架构建的组织工程皮肤及其制备方法-CN201610793440.6在审
发明人：朱家源;唐冰;胡志成 -专利权人：朱家源;胡志成
申请日： 2016-08-31 - 公布日： 2016-11-16 - 主分类号： A61L27/60 文献下载
摘要：本发明公开了一种海藻酸钠水凝胶支架构建的组织工程皮肤，自上而下由表皮层和真皮层组成，表皮层是位于真皮层上方的一层种子细胞，真皮层包括种子细胞和海藻酸钠水凝胶支架，种子细胞位于海藻酸钠水凝胶支架的表面和支架中由于水凝胶支架交联网络中含有大量水分，可以很好地供给细胞养分，同时交联了EGF，可以调节细胞的生长和分化，因此水凝胶支架可以更好地模拟细胞生长所需的类组织样物理和空间结构，也就是提供了细胞的三维培养空间，更有利于表皮基底层细胞的培养和功能维持，构建具有生物活性的组织工程皮肤替代物。
海藻酸钠水凝胶支架构建组织工程皮肤及其制备方法

[实用新型]海藻酸钠水凝胶支架构建的组织工程皮肤-CN201621027284.4有效
发明人：胡志成;朱家源;唐冰 -专利权人：朱家源;胡志成
申请日： 2016-08-31 - 公布日： 2017-06-30 - 主分类号： A61L27/60 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种海藻酸钠水凝胶支架构建的组织工程皮肤，自上而下由表皮层和真皮层组成，表皮层是位于真皮层上方的一层种子细胞，真皮层包括种子细胞和海藻酸钠水凝胶支架，种子细胞位于海藻酸钠水凝胶支架的表面和支架中由于水凝胶支架交联网络中含有大量水分，可以很好地供给细胞养分，同时交联了EGF，可以调节细胞的生长和分化，因此水凝胶支架可以更好地模拟细胞生长所需的类组织样物理和空间结构，也就是提供了细胞的三维培养空间，更有利于表皮基底层细胞的培养和功能维持，构建具有生物活性的组织工程皮肤替代物。
海藻酸钠水凝胶支架构建组织工程皮肤

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