本发明公开一种牛巴贝斯虫棒状体蛋白的扩增引物,由这对引物构成的检测试剂,由这对引物制备的重组牛巴贝斯虫棒状体抗原蛋白,以及这一重组蛋白的用途。本发明的牛巴贝斯虫抗原重组蛋白的制备方法是以牛巴贝斯虫基因组DNA为模板,以引物对SEQ ID No.1和SEQ ID No.2进行扩增,将扩增产物和表达载体双酶切后进行连接,再转入大肠杆菌中诱导表达。用本发明的引物得到的重组抗原建立的间接ELISA检测方法可有效检测和区分感染牛的牛巴贝斯虫病和双芽巴贝斯虫病,完全避免了现有技术的不足。
本发明公开一种牛双芽巴贝斯虫棒状体蛋白的扩增引物,由这对引物构成的检测试剂,由这对引物制备的重组牛双芽巴贝斯虫棒状体抗原蛋白,以及这一重组蛋白的用途。本发明的牛双芽巴贝斯虫抗原重组蛋白的制备方法是以牛双芽巴贝斯虫基因组DNA为模板,以引物对SEQ ID No.1和SEQ ID No.2进行扩增,将扩增产物和表达载体双酶切后进行连接,再转入大肠杆菌中诱导表达用本发明的引物得到的重组抗原建立的间接ELISA检测方法可有效检测和区分感染牛的双芽巴贝斯虫病和牛巴贝斯虫病,完全避免了现有技术的不足。
本发明公开了一种牛荚膜A型多杀性巴氏杆菌基因,它的碱基序列如序列表SEQ ID NO.1所示;一种牛荚膜A型多杀性巴氏杆菌抗原蛋白,它是由上述的一种牛荚膜A型多杀性巴氏杆菌基因表达的蛋白;一种抗牛荚膜A型多杀性巴氏杆菌多克隆抗体,它是由上述的一种牛荚膜A型多杀性巴氏杆菌抗原蛋白制备的;一种抗牛荚膜A型多杀性巴氏杆菌免疫磁珠的制备方法;本发明在筛选选牛荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌的特异性抗原的基础上,通过其制备的多克隆抗体与磁性微球进行偶联制备免疫磁珠,对免疫磁珠的特异性和敏感性等方面进行检测,以构建一种能快速富集分离牛荚膜A型多杀性巴氏杆菌的方法,提高兽医临床诊治效率。
本发明公开一种牛巴贝斯虫鉴别检测与疾病检测的方法与试剂盒。本发明的鉴别检测牛巴贝斯虫的方法是:利用扩增引物SEQ ID No.1和SEQ ID No.2将待检牛的基因组DNA样本与牛巴贝斯虫标准质粒扩增后,进行高分辨率熔解曲线分析,根据待检样品绘制的熔解曲线与标准质粒熔解曲线的重合与否本方法囊括了国内现存的所有牛巴贝斯虫病原,可同时进行五种牛巴贝斯虫病原的鉴别检测,适用于牛巴贝斯虫种的鉴别检测和流行病学调查。