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[发明专利]一种鸡胚培养及活体电转基因方法-CN201110241537.3无效
发明人：林俊堂;杨慈清;王聪睿;毛会丽;李小英;石晓卫 -专利权人：新乡医学院
申请日： 2011-08-22 - 公布日： 2012-01-18 - 主分类号： C12N5/073 文献下载
摘要：本发明公开了一种鸡胚培养及活体电转基因方法，包括以下步骤：带壳培养，培养2天—3天时分别做带壳原位电转基因；去壳培养，将受精鸡蛋培养到第3天时，去壳置培养器皿放入恒温恒湿培养箱中培养；原位电转基因步骤，带壳培养2-3天将0.5μg/μl的质粒0.5-1μl用显微注射毛细玻璃针在体视显微镜下注射到脊髓或去壳培养5-6天注射到视顶部位，将电极放在已注射质粒的脊髓或视顶部位两侧，阳性电极在拟转基因一侧，进行电转通过对传统培养方法的优化，建立鸡胚胎带壳和去壳培养技术，提高鸡胚培养成活率，为鸡胚活体原位电转基因提供了基础。
一种培养活体转基因方法

[发明专利]一种鸡胚中枢神经系统单个神经元动态研究模型的制备方法及应用-CN201810630993.9在审
发明人：杨慈清;林俊堂;李小英;管丽红;乔梁;李晗;李栓庆 -专利权人：新乡医学院
申请日： 2018-06-19 - 公布日： 2018-11-02 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种鸡胚中枢神经系统单个神经元动态研究模型的制备方法及应用，属于基因功能研究技术领域。本发明将活体电转基因技术和组织片培养相结合，以进行鸡胚中枢神经系统单个神经元的基因功能研究，具体是将鸡胚脊髓或者视顶盖组织经活体电转基因技术，得到转基因组织块，将其切片后对组织切片进行培养，培养后进行外源基因功能研究使用本发明的方法培养得到的组织片上可以清晰的观察到单个神经元完整的结构，并且神经元轴突的投射更具有规律性，本发明培养的组织片没有经过酶的消化，同时还受到组织片其他细胞及相关分泌因子的影响，更接近活体，组织片上的单个神经元可以模拟活体内神经元的动态变化的过程
神经元组织片中枢神经系统活体电转基因基因功能研究动态研究种鸡制备转基因组织动态变化功能研究鸡胚脊髓外源基因组织切片顶盖活体鸡胚切片投射轴突分泌规律性应用体内细胞消化清晰观察

[发明专利]用荧光素酶活体整株检测转基因植株法及在转基因玉米中的应用-CN201911200713.1在审
发明人：白建荣;闫蕾;李锐;常利芳;郝曜山;杨瑞娟;康晨 -专利权人：山西省农业科学院作物科学研究所;山西省农业科学院生物技术研究中心
申请日： 2019-11-29 - 公布日： 2020-04-10 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明属分子生物学及基因工程技术领域，为解决目前转基因植物检测中用一系列操作复杂、耗时、高成本体外分子检测的技术。提供一种用荧光素酶报告分子活体整株检测转基因玉米的方法，荧光素酶报告基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。用超声波介导花粉的转化方法将荧光素酶基因导入到玉米中去，用植物活体成像技术活体、整株、实时检测转基因玉米中的荧光素酶的荧光信号,通过信噪比的引入和应用可鉴定高表达的转基因植株。直观、准确、实时、低成本地淘汰大量非转基因和表达不强的植株或株系,为植物功能基因组学研究中转基因植株的鉴定提供了操作简单、准确、快速、低成本的鉴定方法。
荧光活体检测转基因植株玉米中的应用

[发明专利]一种玉米自交系茎尖活体转化方法-CN201710324843.0有效
发明人：高勇;陈建民;居鹏;张冬平;陶海霞 -专利权人：扬州大学
申请日： 2017-05-10 - 公布日： 2020-05-08 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明属于作物遗传育种领域，涉及一种玉米自交系SL1303茎尖活体转化方法，该方法是以玉米自交系SL1303为受体材料进行农杆菌介导的茎尖活体转化转入外源基因，获得转基因玉米。该方法与传统的农杆菌介导转基因方法相比，具有许多不可比拟的优势：成本低，操作简便，不受季节、植物发育时期等因素的限制，而且当代即可获得转基因的种子，T2代可获得纯合的转基因株系，无需组培再生阶段，对于保持主栽品种的生产力而改善其某一性状具有特殊的优势，有望发展为玉米转基因的常规技术，在提高玉米的品质性状和抗逆性能等方面的品种改良中发挥重要作用。
一种玉米自交系活体转化方法

[发明专利]棉花的基因枪活体快速转化方法-CN201310046202.5无效
发明人：叶武威;王德龙;阴祖军;王俊娟;王帅;樊宝香;王桂峰;孔静静;宋贵方;张德超;陆许可 -专利权人：中国农业科学院棉花研究所
申请日： 2013-02-05 - 公布日： 2013-05-01 - 主分类号： A01H1/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种棉花的基因枪活体快速转化方法。该方法包括如下步骤：（1）利用基因枪轰击的方法，将含有外源基因的载体轰入父本棉花的花粉中；（2）将基因枪轰击后的父本花粉授粉到活体母本棉花中；（3）授粉后的母本棉花所结的种子便是转基因棉花种子，实现了棉花的基因转化本发明方法无需组织培养步骤，直接在活体棉花上便实现基因转化。而且本发明方法通过第三代便携式基因枪和优化转化的参数使活体转化时对花蕾和花粉形成微创伤，大大缩短了获得转基因植株的周期。
棉花基因活体快速转化方法

[发明专利]一种用于通过睾丸注射制备转基因动物的试剂盒-CN201110195423.X有效
发明人：王超;李颍;唐涛;杨蕾蕾;池亚菲;余辰;陈振文 -专利权人：首都医科大学
申请日： 2011-07-13 - 公布日： 2013-01-16 - 主分类号： C12N15/89 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于通过睾丸注射制备转基因动物的试剂盒。本发明的用于制备转基因动物的试剂盒，包括由聚乙烯亚胺和磁小体组成的组合物。本发明的试剂盒大大提高了转基因效率，且能获得较多数量的转基因活体后代。因此，用本发明试剂盒进行转基因操作提高了转基因动物的生产的效率，在转基因动物制备领域具有重要意义。
一种用于通过睾丸注射制备转基因动物试剂盒

[发明专利]一种清除水体有机污染物的转基因复合型水蕹菜的培育方法-CN201410493727.8有效
发明人：孙扬;向太和;韩依萱;王嫚;宋亚玲;吴玲 -专利权人：杭州师范大学
申请日： 2014-09-24 - 公布日： 2017-04-26 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明公开了一种清除水体有机污染物的转基因水蕹菜的培育方法；本发明首先将含有cyp2e1基因的质粒载体转入发根农杆菌，利用发根农杆菌转基因法在活体植株上获得转cyp2e1基因的毛状不定根，进而获得含有cyp2e1基因毛状根的复合型转基因水蕹菜，利用这种复合型转基因植株对水体有机污染物进行吸收。
一种清除水体有机污染物转基因复合型蕹菜培育方法

[发明专利]一种农杆菌介导的水稻活体转基因方法-CN201010560948.4无效
发明人：李绍清;田裴秀子;朱英国 -专利权人：武汉大学
申请日： 2010-11-25 - 公布日： 2011-05-18 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种农杆菌介导的水稻活体转基因方法，其步骤：A、幼穗转化处理：利用分光光度计测定农杆菌浓度后，将农杆菌溶液用液体LB培养基稀释；B、转基因阳性苗的除草剂筛选：除草剂进行转基因阳性水稻的筛选，筛选时，将pCAMBIA3301-ubi转化处理所获得的种子催芽后，播种于营养钵中；C、转基因阳性株的检测PCR鉴定：筛选出的转基因水稻为阳性植株；D、转基因阳性株的GUS检测：取对照9311和转基因阳性植株的新鲜叶片直接浸泡在溶液中处理，GUS基因在转基因植株的叶片中表达，叶片被染色成深蓝色；转基因水稻中外源基因正常表达，证明其为阳性。本发明具有可行性，转化效率达0.33-1.59%，简便、实用，突破了水稻尤其是籼稻转基因操作的瓶颈，具有较强的应用价值。
一种杆菌水稻活体转基因方法

[发明专利]一种鉴定转基因抗虫植物抗虫性的生物测定方法-CN200610124968.0无效
发明人：郑进;洪华珠;康薇 -专利权人：华中师范大学
申请日： 2006-11-08 - 公布日： 2007-05-23 - 主分类号： G01N33/00 文献下载
摘要：一种鉴定转基因抗虫植物抗虫性的生物测定方法。以离体培养的粉纹夜蛾细胞为试材，通过转基因抗虫植物蛋白质对昆虫细胞的毒性，测定转基因抗虫植物的抗虫性。利用昆虫细胞测定转基因抗虫植物的抗虫性，便于从分子水平观察分析转基因抗虫植物的杀虫机理。离体培养的昆虫细胞相对于饲养或田间的活体昆虫而言，其均一性好，不易受外界环境和活体昆虫体壁、肠道内蛋白酶活性、体液pH值等因素的影响。此法操作简单、便捷，节省人力、物力。
一种鉴定转基因植物抗虫性生物测定方法

[发明专利]监测视网膜病的方法-CN200880022995.4无效
发明人： L·卓;G·何;S·库马尔 -专利权人：新加坡科技研究局
申请日： 2008-05-02 - 公布日： 2010-03-31 - 主分类号： G01N33/48 文献下载
摘要：本发明提供一种在活的转基因的非人类的动物中监测视网膜病的方法，该方法包括：提供活的转基因的非人类的动物，该动物具有视网膜病或具有易患视网膜病的体质，其中在GFAP助催化剂的控制下对荧光蛋白质编码的核酸分子被整合到所述转基因的非人类的动物的基因组中；以及在所述转基因的非人类的动物的视网膜神经胶质中活体检测所述荧光蛋白质的荧光水平。
监测视网膜方法

[发明专利]一种小鼠脊髓体外电转基因方法、小鼠脊髓电转组织切片培养模型建立方法及其应用-CN201810616045.X在审
发明人：杨慈清;林俊堂;李小英;李栓庆;管丽红;乔梁;李晗 -专利权人：新乡医学院
申请日： 2018-06-14 - 公布日： 2018-11-20 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种小鼠脊髓体外电转基因方法、小鼠脊髓电转组织切片培养模型建立方法及其应用，属于神经系统基因功能研究技术领域。本发明小鼠脊髓体外电转基因方法，包括：将胚鼠从母鼠子宫中取出，剥离出所述胚鼠的脊髓，将含有目的基因的质粒注射到所述离体脊髓的脊髓腔内，然后将电转仪的电极放到脊髓的两侧，其中正极放到需要转染一侧，进行电转，得电转脊髓。将电转后的脊髓进行组织切片培养，利用该方法可以建立小鼠脊髓电转组织切片培养模型，为外源基因在小鼠胚胎发育过程在脊髓中对神经元的影响提供了一种新的研究方法，从而寻找治疗脊髓疾病的有效手段；该方法更适合神经元的动态变化观察，是介于活体与细胞之间的一种研究技术。
电转小鼠脊髓脊髓组织切片转基因神经元模型建立基因功能研究正极动态变化发育过程脊髓疾病目的基因神经系统外源基因小鼠胚胎有效手段脊髓腔电极活体离体质粒转染子宫应用剥离取出注射细胞研究观察治疗

[发明专利]一种在体筛选促胰岛β细胞功能药物的方法-CN201710010182.4有效
发明人：刘彦梅;赵佳;陈良怡 -专利权人：北京大学
申请日： 2017-01-06 - 公布日： 2021-09-14 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种在体筛选促胰岛β细胞功能药物的斑马鱼模型，所述在体筛选促胰岛β细胞功能药物的斑马鱼模型，其基因BAC_CH211_69I14上ins基因的编码序列替换为荧光蛋白序列，荧光信号均特异性地表达在胰岛β细胞中，可以指示活体内胰岛β细胞钙离子信号变化。本发明创建了第一个可以指示活体内胰岛β细胞功能的动物模型，本发明的转基因斑马鱼系在其活体中可以实时观测胰岛β细胞内钙信号的变化，直观并准确地报告胰岛β细胞功能状态。运用该转基因斑马鱼系，可以在活体水平进行便捷、自动化和高通量地分析胰岛β细胞的功能特点，从而实现对于促进胰岛β细胞功能药物的高通量筛选，具有重要的现实意义和广泛的应用前景。
一种筛选胰岛细胞功能药物方法

[发明专利]一种草莓匍匐茎生长转基因毛状根的诱导方法及其应用-CN202210206160.6在审
发明人：郝福玲;吴沐谦;张露露;孙启涵;吴思鑫 -专利权人：安徽农业大学
申请日： 2022-02-28 - 公布日： 2022-05-31 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明涉及植物培养技术领域，具体涉及一种草莓匍匐茎生长转基因毛状根的诱导方法及其应用，包含了植物培养，侵染液制备，匍匐茎离体注射和毛状根诱导，以草莓小苗作为试验材料，对草莓小苗进行草莓匍匐茎离体注射、离体抽真空和活体注射方法的比较，筛选出活体注射法后，用携带有pCAMBIA1302和pCAMBIA1302‑FaNRT1.1载体的K599发根农杆菌进行匍匐茎注射，获得转基因毛状根，并通过PCR和荧光显微观察确定为转基因毛状根，本发明成功建立了草莓匍匐茎生长转基因毛状根诱导体系
一种草莓匍匐茎生长转基因毛状根诱导方法及其应用

[发明专利]可特异性清除T细胞的转基因斑马鱼的制备方法及应用-CN202010756545.0有效
发明人：李崇勇;何明芳;蔡阳 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2020-07-31 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了可特异性清除T细胞的转基因斑马鱼的制备方法和应用，其中制备方法包括：将重组质粒pTol2‑lck‑NTR‑mVenus与Tol2转座酶mRNA共同导入野生型斑马鱼胚胎中；以及培养获得稳定遗传的转基因斑马鱼品系，所述稳定遗传的转基因斑马鱼品系即为可特异性清除T细胞的转基因斑马鱼，其中，所述重组质粒pTol2‑lck‑NTR‑mVenus中携带斑马鱼lck基因启动子序列和大肠杆菌NTR基因序列。利用该方法能够有效制备获得在T细胞特异性表达NTR基因且能够稳定遗传的转基因斑马鱼，并且在甲硝唑的作用下，该转基因斑马鱼的少T细胞可以被特异性清除，使其出现免疫功能缺陷，进而，该转基因斑马鱼能够为活体研究免疫细胞发育
特异性清除细胞转基因斑马制备方法应用

[发明专利]一种温山药转基因毛状根的诱导方法-CN201910261837.4有效
发明人：向太和;金婷婷;李亚菲;章铖超;王克云;李蓉;徐正贤;贺宸靖 -专利权人：杭州师范大学
申请日： 2019-04-02 - 公布日： 2020-11-10 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：一种温山药转基因毛状根的诱导方法，属于植物培养和转基因技术领域。该方法包括：1)外植体的消毒；2)外植体的培养；3)侵染液的制备；4)毛状根的诱导和繁殖；5)毛状根的繁殖。本发明以温山药带叶腋的茎段为外植体，通过对诱导培养基、分化培养基和生根培养基进行优化，通过诱导、分化和生根培养获得完整植株，再通过发根农杆菌K599(带重组质粒pRI101‑AN‑gfp)活体侵染温山药无菌苗的茎，获得转基因毛状根，并通过PCR和荧光显微观察鉴定毛状根为转基因毛状根，建立了温山药转基因毛状根诱导体系，实现了温山药的快速有效繁殖。
一种山药转基因毛状根诱导方法

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