本发明公开了一种泛生菌酰胺酶突变体、基因、工程菌及其应用，所述酰胺酶突变体是将SEQ ID No.2所示泛生菌酰胺酶氨基酸序列第105位、175位、301位、305位或309位进行单突变或多突变获得的。本发明提供的泛生菌酰胺酶突变体较亲本活力提高2～3倍，对底物2‑氯烟酰胺的耐受能力超过200mM，通过补料甚至超过1M，并且转化率仍能够保持在95％以上。利用本发明中所述的补料方法能够有效减轻2‑氯烟酸对酰胺酶或菌体的产物抑制效应，在保证较高催化效率的同时使得产物2‑氯烟酸尽可能地析出，方便产物的提取纯化。因此，本发明的酰胺酶突变体可以可用于酶法工业化生产2‑氯烟酸。
