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[发明专利]一种表达荧光基因的根瘤菌HH103及其构建方法与应用-CN202210541561.7在审
发明人：辛大伟;陈庆山;马超;王锦辉;武小霞;刘春燕;齐照明;赵莹;杨明亮 -专利权人：东北农业大学
申请日： 2022-05-18 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开一种表达荧光基因的根瘤菌HH103及其构建方法与应用，属于农用微生物的技术领域。为了更快更方便的找到根瘤菌的侵染线。本发明提供一种表达荧光基因的根瘤菌HH103，所述表达荧光基因的根瘤菌HH103是以根瘤菌HH103为出发菌株，通过真核表达载体在出发菌株中表达荧光基因获得的，所述荧光基因为GFP基因、gus基因和rfp上述表达荧光基因的根瘤菌HH103在制备检测根瘤菌侵染大豆能力的试剂盒中的应用。
一种表达荧光基因根瘤菌 hh103 及其构建方法应用

[发明专利]一种抗污染根瘤菌剂及其制作方法-CN200910157223.8无效
发明人：师尚礼;李剑峰;曹文侠;张淑卿;刘建荣;祁娟 -专利权人：甘肃农业大学
申请日： 2009-07-02 - 公布日： 2011-01-05 - 主分类号： C05F11/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种抗污染根瘤菌剂，包括耐抗生素根瘤菌菌株的发酵菌液及相应的抗生素，所述的相应的抗生素在发酵菌液中的终浓度为100～250mg/L。同时本发明还公开了一种抗污染根瘤菌剂的制备方法，包括根瘤菌的辐照诱变，抗药突变体的筛选，及抗污染根瘤菌剂的生产等步骤，本发明的一种抗污染根瘤菌剂，可以克服现有技术中根瘤菌剂高污染率、目的菌株与土著根瘤菌的低竞争力等缺陷，以实现在降低菌剂污染率、提高菌株竞争力、增大有效活菌数的同时可有效降低菌剂的保存和运输成本。
一种污染根瘤菌剂及其制作方法

[发明专利]一种共生固氮用高浓度复合根瘤菌剂及其制备方法-CN201410208260.8在审
发明人：段一皋;王羲元 -专利权人：段一皋;王羲元
申请日： 2014-05-19 - 公布日： 2015-11-25 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种共生固氮用高浓度复合根瘤菌剂及其制备方法，是由以下四个以下重量份组分菌种菌剂制备而成的菌剂复合液：豌豆根瘤菌剂10-30；豇豆根瘤菌剂10-30；紫云英根瘤菌剂40-50；慢生大豆根瘤菌剂10-30；将上述比例将豌豆根瘤菌剂、豇豆根瘤菌剂、紫云英根瘤菌剂、慢生大豆根瘤菌剂混合，得混合液，进行三级扩大培养：摇床液体培养、种子罐液体培养、发酵液体罐扩大培养，得菌数达到40-50亿/ml的高浓度成品
一种共生固氮浓度复合根瘤菌剂及其制备方法

[发明专利]一种转基因大豆基因向根瘤菌水平漂移的评价方法-CN201010205343.3无效
发明人：丁伟;李文滨;程茁;王振华 -专利权人：东北农业大学
申请日： 2010-06-22 - 公布日： 2010-10-27 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供一种转基因大豆基因向根瘤菌水平漂移的评价方法。把转基因大豆种子用目前正在商业化应用的大豆根瘤菌接种并播种在条件可控的人工气候室内。待转基因大豆第2片三出复叶完全展开时，取出转基因大豆根系并从根系上取下根瘤，对根瘤表面消毒后进行根瘤菌分离。对从转基因大豆根瘤中分离的根瘤菌进行室内纯培养后提取DNA，对分离的转基因大豆根瘤菌进行16S rDNA鉴定，然后对经过鉴定的转基因大豆根瘤菌进行PCR扩增，检测从转基因大豆根瘤中分离的根瘤菌是否具有转基因大豆的目的基因
一种转基因大豆基因根瘤菌水平漂移评价方法

[发明专利]一种根瘤菌的快速划线分离方法-CN201610236100.3在审
发明人：严君;韩晓增;邹文秀 -专利权人：中国科学院东北地理与农业生态研究所
申请日： 2016-04-15 - 公布日： 2016-06-29 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：一种根瘤菌的快速划线分离方法，它涉及一种菌的快速划线分离方法，它要解决现有方法进行大量的根瘤菌分离时存在耗时长、效率低和成本高的问题。方法：一、根瘤菌培养皿；二、移液器枪头预处理；三、YMA培养基倒入根瘤菌培养皿中，冷却凝固，8个根瘤样品分别放入到8连PCR管中并编号，8头排枪插好预处理后的枪头，将8连PCR管中的根瘤样品同时捣碎，并蘸取根瘤菌液，在根瘤菌培养皿中划线，进行分离培养，即完成。本发明中根瘤菌培养皿和移液器枪头预处理可大量制作后备用；本发明方法便于应用在大量根瘤菌分离试验中，能快速提高划线的速度及精准度，提高试验效率和加速试验进展，具有耗时短、效率高和成本低的特点，适合推广使用
一种根瘤菌快速划线分离方法

[发明专利]一株发根根瘤菌及其应用-CN201410620034.0有效
发明人：杜丽琴;闭海;裴建新;庞浩;江民华;唐婷婷;林厚民;韦宇拓 -专利权人：广西大学
申请日： 2014-11-06 - 公布日： 2017-12-01 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一株发根根瘤菌及其应用。该发根根瘤菌的分类命名为发根根瘤菌(Rhizobium rhizogenes)gxas‑815，其保藏编号为CCTCC NO.M2013326。该发根根瘤菌可用于以蔗糖为主要原料的发酵培养基生产多糖。本发明利用发根根瘤菌(Rhizobium rhizogenes)gxas‑815发酵生产多糖效率高，成本低，易于工业化。
发根根瘤菌及其应用

[发明专利]多壁碳纳米管在根瘤菌菌剂中的应用及其菌剂和制备方法-CN202010777172.5在审
发明人：李友国;赵静 -专利权人：华创佳农生物科技（武汉）有限公司
申请日： 2020-08-05 - 公布日： 2020-10-27 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明提供了多壁碳纳米管在根瘤菌菌剂中的应用及其菌剂和制备方法，将多壁碳纳米管应用于根瘤菌菌剂中，可以显著降低菌剂中活菌数的死亡，延长保存时间。同时还提供了根瘤菌菌剂，包括多壁碳纳米管和根瘤菌浓缩培养液，其中，多壁碳纳米管的浓度为0.01～0.2mg/ml，根瘤菌浓缩培养液的浓度为1010cfu/mL。该菌剂通过将多壁碳纳米管添加至根瘤菌浓缩培养液中得到。本发明根瘤菌菌剂保存时间达十二个月时，比常规菌剂中的存活菌数提高了10倍，具有很好的商业应用前景。
多壁碳纳米根瘤菌中的应用及其制备方法

[发明专利]一种苜蓿根瘤菌改善土壤品质的方法-CN201610914092.3在审
发明人：刘淑霞;孙宇峰;王晓飞;魏国江;关向军;郭永霞;徐海军;郭梦桥;程薪宇;肖宇;石杰;杜春玉;沈玉江 -专利权人：黑龙江省科学院大庆分院
申请日： 2016-10-20 - 公布日： 2017-03-15 - 主分类号： A01B79/02 文献下载
摘要：本发明属于农业微生物利用领域，具体涉及一种苜蓿根瘤菌改善土壤品质的方法。针对现有技术在盐碱地种植紫花苜蓿产量低、质量差等问题。本发明提供一种苜蓿根瘤菌改善土壤品质的方法，包括以下步骤a、将有机肥、钙镁磷肥、苜蓿根瘤菌制备成苜蓿根瘤菌缓释肥；b、施用酸性肥，调节土壤pH值c、苜蓿播种时用苜蓿根瘤菌缓释肥做基肥；d、苜蓿开花后一周，用根瘤菌缓释肥追肥。本发明在苜蓿种植时，施用苜蓿根瘤菌缓释肥，应用苜蓿根瘤菌与苜蓿的共生关系，改善土壤品质，提高苜蓿产量；本发明方法相比普通的盐碱地种植，苜蓿亩产量提高了30‑40%，并且提高了土壤的肥力，改善了盐碱地种植土壤的品质
一种苜蓿根瘤菌改善土壤品质方法

[发明专利]一种鹰嘴豆根瘤菌菌剂制备方法-CN201710362116.3有效
发明人：张俊杰;陈文峰;郑坚强;孟牒;何培新;杨旭;郭晨;尚益民 -专利权人：郑州轻工业学院
申请日： 2017-05-11 - 公布日： 2020-04-24 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种鹰嘴豆根瘤菌菌剂制备方法，属于鹰嘴豆栽培方法技术领域。目的是提供一种鹰嘴豆根瘤菌菌剂制备方法，具体的，所述制备方法具体为用鹰嘴豆根瘤菌菌株、培养基、微量元素营养液、粘合剂制备鹰嘴豆根瘤菌菌剂；所述培养基为优化的YMA培养基。通过本方法制备的鹰嘴豆根瘤菌菌剂，在大田对鹰嘴豆进行接种，鹰嘴豆的株高、根重量、地上部重量、根瘤重量等都获得了明显的提升。
一种鹰嘴豆根瘤菌制备方法

[发明专利]一株耐苦参碱根瘤菌株及其应用和以其制备的抗污染根瘤菌剂-CN201410314002.8有效
发明人：师尚礼;霍平慧;李剑峰;曹文侠;祁娟;苗阳阳 -专利权人：甘肃农业大学
申请日： 2014-07-03 - 公布日： 2017-03-15 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一株耐苦参碱根瘤菌株，并公开了其在降低根瘤菌剂污染率及提高占瘤率中的应用，此作用是通过将耐苦参碱根瘤菌株发酵培养后的菌液，与苦参碱抑菌液混合制备得到抗污染根瘤菌剂来实现的。本发明的有益效果为本发明提供的抗污染根瘤菌剂具有以下优点对环境友好；可有效增强菌剂抗污染效果；可保持较高活菌数；施用后可抑制土著根瘤菌结瘤，提高目标根瘤菌占瘤率；抑制土壤环境中的病原菌，减少农药使用量；降低菌剂生产过程中对无菌环境的要求，降低制备成本；方法简便，易于推广。
一株耐苦参根瘤菌株及其应用以其制备污染根瘤菌剂

[发明专利]利用远缘嫁接进行根瘤菌转移的方法-CN201010046310.9无效
发明人：王成玉;马贵龄 -专利权人：王成玉;马贵龄
申请日： 2010-01-12 - 公布日： 2010-06-23 - 主分类号： A01G1/06 文献下载
摘要：本发明是一种利用远缘嫁接进行根瘤菌转移的方法，包括以下步骤：1)选用可塑性大的杂种向日葵和玉米作为砧木；2)选用豆科植物里固氮活性高、遗传性稳定的品种作为接穗；3)嫁接采用劈接，砧木长出1-6片叶时，接穗也长出利用远缘嫁接，将生长根瘤菌的植物与无根瘤菌的植物进行嫁接，从而使根瘤菌向无根瘤菌的植物转移，使无根瘤菌的植物自然生长出根瘤。
利用远缘嫁接进行根瘤菌转移方法

[发明专利]一种生态安全型根瘤菌制剂生产工艺与方法-CN01133548.3无效
发明人：周俊初 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2001-10-11 - 公布日： 2003-04-23 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于微生物根瘤菌分子生物学技术领域。其特征在于提出一种生态安全型根瘤菌制剂的生产工艺和方法，该根瘤菌只能在人工控制条件下生长繁殖并发挥其作用，在土壤、河流、湖泊和海洋等自然环境中将因得不到必需的营养物而死亡。本发明的要点是通过根瘤菌必需基因突变株的筛选，必需基因purL结构基因的克隆，诱导表达purL基因的克隆，从而构建、筛选得到生态安全型重组根瘤菌，以该菌为原料制成一种生态安全型根瘤菌制剂。
一种生态安全根瘤菌制剂生产工艺方法

[发明专利]一种提高根瘤菌液体菌剂活菌数和结瘤固氮效果的辅料及应用-CN201811369756.8有效
发明人：李友国;杜倩;王宏丽;陈大松 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2018-11-17 - 公布日： 2021-10-08 - 主分类号： C12N1/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高根瘤菌液体菌剂接种效果的辅料，包括：聚乙二醇1g/L‑10g/L、海藻酸钠0.5g/L‑2g/L、羟甲基丙基纤维素0.5g/L‑5g/L，其余为生理盐水。利用本发明提供的配方，与根瘤菌配伍制备成根瘤菌液体菌剂，可提高根瘤菌的活菌数量，同时提高根瘤菌的结瘤固氮效果，促进豆科植物生长。与不加辅料的根瘤菌剂相比，其结瘤数量以及根瘤固氮酶活性均有显著提高。
一种提高根瘤菌液体菌剂活菌数固氮效果辅料应用

[发明专利]一种大豆根瘤菌筛选及培养方法-CN202211010486.8在审
发明人：张日平 -专利权人：张日平
申请日： 2022-08-23 - 公布日： 2022-11-01 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及根瘤菌培养技术领域，且公开了一种大豆根瘤菌培养方法，培养步骤包括：第一配制大豆根瘤菌液体培养基，第二将待培养的根瘤菌活化接种于液体培养基内进行恒温搅拌培养，最后培养得到的根瘤菌置于低温冰箱内进行保存，按配重配比称取大豆根瘤菌液体培养基的原料；一种大豆根瘤菌筛选方法，包括以下工作步骤：第一步：筛选种子和消毒；第二步：设置播种地土壤PH值；第三步：设置播种地温度湿度环境；第四步：播种作业；第五步：取样记录50天后从每组播种地里取出10株进行检测，检测其生长状态：株高、根部结瘤数量、根瘤的干重和植株干重，最终检测出最适合大豆根瘤菌生长的土壤环境。
一种大豆根瘤菌筛选培养方法

[发明专利]根瘤菌剂的液体剂型制备方法-CN202210106149.2在审
发明人：杨国平;王明 -专利权人：宁夏五丰农业科技有限公司;五丰生物科技（宁夏）有限公司
申请日： 2022-01-28 - 公布日： 2022-04-15 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种根瘤菌剂的液体剂型制备方法，其适合苜蓿根瘤菌、三叶草根瘤菌的菌剂制备，通过将活化的菌种进行高密度发酵，以提高根瘤菌的有效活菌数；最终将发酵后的菌液与PVP保护剂混合后，进行无菌灌装，保护剂可以稳定活菌数，并且延长活菌的存活时间。
根瘤菌剂液体剂型制备方法