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[发明专利]一种同时检测多种支原体污染和确认支原体种类的快速检测方法、引物组及试剂盒-CN202211634631.X在审
发明人：孙山林;孙瑶敏;范夏萍;杨泽艳;朱莉莉 -专利权人：苏州琪霖智检细胞生物技术有限公司
申请日： 2022-12-19 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明采用多重荧光PCR结合CE技术(毛细管电泳)，可实现快速单次反应(3‑5小时)、且覆盖度高(通过生物信息学引物设计可实现55种支原体的特异检测)、同时确认污染支原体种类(对真实样本的检测，可确认7种支原体，经测序鉴定确认)：人源相关的口腔支原体(Mycoplasma orale)、咽支原体(Mycoplasma faucium)、发酵支原体(Mycoplasma fermentans)；牛源相关的精氨酸支原体(Mycoplasma arginini)、牛鼻支原体(Mycoplasma bovirhinis)；猪源的猪鼻支原体(Mycoplasma hyorinis)；鼠源的肺支原体(Mycoplasma pulmonis本发明同时对前述7种支原体的交叉污染也可以检测并区分，检测限低至10pg/ul，有利于对支原体污染来源进行溯源分析并提供质控依据。
一种同时检测多种支原体污染确认种类快速方法引物试剂盒

[发明专利]一种支原体检测的报告基因扩增试剂盒-CN200810094566.X无效
发明人：张辉;江洪 -专利权人：北京泰格瑞分子检验有限公司;张辉;江洪
申请日： 2008-05-14 - 公布日： 2009-11-18 - 主分类号： C12Q1/04 文献下载
摘要：细胞培养的支原体污染难题和各种支原体感染诊断急需可靠、高效的试剂盒。支原体培养加荧光染色法可靠，但费时费事，培养物还加剧污染。常规检测支原体就扩增支原体基因的直接PCR方法易交叉污染，假阳性高只作为辅助参考。本发明涉及支原体保守基因通过杂交探针交联植物拟南芥LEY序列为报告基因DNA，再扩增报告基因间接检测。其特征在于将支原体16sRNA与首尾带支原体保守序列探针的LEY报告基因DNA的首尾部位杂交，经耐热连接酶催化报告基因DNA成环，再反向PCR扩增环状报告基因，间接反映支原体的检测。调节连接酶反应，交叉污染不易杂交报告基因，也就减少了假阳性；如果系统污染了，还可换一套报告基因。
一种支原体检测报告基因扩增试剂盒

[发明专利]一种有效去除支原体污染的方法-CN201911343766.9在审
发明人：夏璇夷;杨光文;李改 -专利权人：武汉博士德生物工程有限公司
申请日： 2019-12-24 - 公布日： 2020-05-08 - 主分类号： C12N5/0786 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，公开一种有效去除支原体污染的方法，包括如下步骤：(1)取小鼠腹腔内巨噬细胞均匀的分布在带有支原体去除剂的完全培养基中，然后平铺在孔板中；(2)取支原体污染细胞平铺在孔板中，观察7天；(3)取小鼠腹腔内巨噬细胞均匀的分布在带有支原体去除剂的完全培养基中，然后平铺在孔板中，挑选步骤(2)中1‑3孔状态好的支原体污染细胞平铺在孔板中；(4)等待7天，将步骤(3)孔板拿出来观察，每板挑选状态好的细胞株进行检测；(5)将步骤(4)挑选的细胞株继续用带有支原体去除剂的完全培养基扩大培养5‑10天，最后挑选无支原体污染的细胞进行冻存。本发明方法可以有效去除支原体细胞污染。
一种有效去除支原体污染方法

[发明专利]一种同时检测细菌、支原体污染的引物组合及试剂盒-CN202310941470.7在审
发明人：代红圆;丁文鹏 -专利权人：深圳市库源生物科技有限公司
申请日： 2023-07-28 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明公开了一种同时检测细菌、支原体污染的引物组合及试剂盒。该同时检测细菌、支原体污染的引物组合包括4条广谱引物和4条特异引物，本发明的支原体检测种类多，本发明通过少数特定的引物组合，大大提升了可检测支原体的广谱性，目前已知的可检测种类，达到80种以上，包含了最常见的支原体种类检测范围更广，不仅能够检测出支原体污染，而且还能检测出细菌污染；检测结果更加准确。
一种同时检测细菌支原体污染引物组合试剂盒

[发明专利]猪PRRSV、猪肺炎支原体和PVC-2抗原在制备疫苗中的应用-CN201310076735.8在审
发明人：张许科;孙进忠;白朝勇 -专利权人：普莱柯生物工程股份有限公司
申请日： 2013-03-11 - 公布日： 2014-09-17 - 主分类号： A61K39/295 文献下载
摘要：本发明提供了一种致免疫量的PRRSV抗原、致免疫量的猪肺炎支原体抗原和致免疫量的PCV-2抗原在制备预防和治疗猪肺炎支原体污染的猪或受到猪肺炎支原体威胁的猪的疫苗中的应用。该应用对于猪肺炎支原体污染的猪群或受到猪肺炎支原体威胁的猪群在不影响猪肺炎支原体免疫效果的前提下，能使PCV2和PRRSV的免疫时间提前，能同时控制猪肺炎支原体、PRRSV和PCV-2三种疾病。
prrsv 肺炎支原体 pvc 抗原制备疫苗中的应用

[发明专利]一种支原体PCR通用引物及其应用-CN201910703993.1在审
发明人：姚茂金;任娇艳;李宇娟 -专利权人：中新国际联合研究院
申请日： 2019-07-31 - 公布日： 2020-01-17 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明公开了一种支原体PCR通用引物及其应用。本发明提供的支原体PCR通用引物是一对保守引物，其正向引物myco‑F包括21个碱基：GGC GAA TGG GTG AGT AAC ACG，反向引物myco‑R有22个碱基：CGG ATA ACG CTT本发明设计的支原体PCR通用引物可快速地扩增细胞培养基中支原体的DNA序列，从而能够准确地鉴定细胞系有无被支原体污染，能够作为细胞培养过程中支原体污染的检测重要的工具；该支原体PCR通用引物应用在鉴定支原体时
支原体支原体污染碱基扩增细胞培养过程细胞培养基保守引物反向引物正向引物灵敏度应用检测

[发明专利]一种提升改善细胞状态的方法及其应用-CN201910598578.4在审
发明人：李鹏;黄晓涵;蒋治武;姚瑶;程琳;王素娜;吴绮婷;龙有国;黄启键;林思妙 -专利权人：广州医科大学附属肿瘤医院
申请日： 2019-07-04 - 公布日： 2019-09-24 - 主分类号： C12N5/0781 文献下载
摘要：本发明涉及一种提升改善细胞状态的方法及其应用，所述方法为：向免疫缺陷小鼠体内移植支原体阳性细胞系，并饲养小鼠，再从小鼠体内分离出细胞系，获得支原体阴性细胞系。该去除细胞中支原体污染的方法相对于目前常用的去除细胞支原体污染的方法其操作流程更为简单也更加安全，同时该方法避免了抗生素和高温因素，可把对细胞的伤害降到最低，且处理周期较短，也能够彻底清除支原体污染且不复发
支原体污染细胞状态支原体细胞去除体内免疫缺陷小鼠阳性细胞系阴性细胞系操作流程处理周期高温因素小鼠抗生素应用复发饲养移植伤害安全

[发明专利]一种高效分离猪肺炎支原体的方法-CN202110792367.1有效
发明人：宗冰冰;张焱焱;任明星;刘宇;付书林;叶纯;吴仲元;邱银生 -专利权人：武汉轻工大学
申请日： 2021-07-14 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及支原体的分离，公开了一种高效分离猪肺炎支原体的方法。本发明高效分离猪肺炎支原体的方法为使用含左氧氟沙星的培养基对猪肺炎支原体进行纯化培养，其中左氧氟沙星的浓度为50‑200μg/mL。本发明发现了左氧氟沙星在一定浓度范围内能明显抑制了猪鼻支原体的生长而不影响猪肺支原体的生长，可用含左氧氟沙星的培养基对猪肺支原体进行纯化、减少猪鼻支原体的污染。通过本发明发方法分离猪肺炎支原体的效率可以达到50％左右，远远高于传统方法分离纯化方法。
一种高效分离肺炎支原体方法

[发明专利]一种去除肿瘤细胞中支原体污染的方法及其应用-CN201910598573.1在审
发明人：李鹏;黄晓涵;蒋治武;姚瑶;程琳;王素娜;吴绮婷;龙有国;黄启键;林思妙 -专利权人：广州医科大学附属肿瘤医院
申请日： 2019-07-04 - 公布日： 2019-10-11 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本发明涉及一种去除肿瘤细胞中支原体污染的方法及其应用，所述方法为：将支原体阳性的肿瘤细胞系移植到向NSI免疫缺陷小鼠体内并进行饲养，再将肿瘤细胞系从小鼠体内分离出来，获得支原体阴性肿瘤细胞系。该方法相对于目前常用的去除细胞支原体污染的方法其操作流程更为简单也更加安全，同时该方法避免了抗生素和高温因素，可把对细胞的伤害降到最低，且处理周期较短，也能够彻底清除肿瘤细胞中的支原体污染且不易复发。
支原体污染肿瘤细胞去除肿瘤细胞系支原体体内免疫缺陷小鼠细胞操作流程处理周期高温因素阴性肿瘤抗生素复发应用饲养移植伤害安全

[发明专利]一种用于支原体检测的电化学生物传感器及检测支原体方法-CN202210223154.1在审
发明人：秦洁玲;王蕴 -专利权人：上海市第十人民医院
申请日： 2022-03-09 - 公布日： 2023-05-19 - 主分类号： G01N27/327 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于支原体检测的电化学生物传感器及检测支原体方法，所述电化学生物传感器包括纳米棒电极，所述纳米棒电极的表面连接有核酸序列如SEQIDNO.1所示的第一序列。通过捕捉待检测支原体ssDNA，随后结合含有金纳米星‑电化学指示剂修饰的第二序列，根据指示剂的特异性峰位实现多种支原体的同步电化学检测。本发明的电化学生物传感器能够实现对肺炎支原体、猪鼻支原体、解脲支原体、人型支原体和生殖支原体等的多种支原体进行快速、高效和高灵敏度的检测，为临床支原体感染疾病与生物实验中细胞污染的早期检测提供指导。
一种用于支原体检测电化学生物传感器方法

[发明专利]一种支原体污染的处理方法-CN201710006948.1在审
发明人：高毅;傅超毅;李阳;彭青 -专利权人：南方医科大学珠江医院
申请日： 2017-01-05 - 公布日： 2017-05-10 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种支原体污染的处理方法，其包括如下步骤获取待处理的细胞；用含10ug/mL环丙沙星的培养基培养所述待处理的细胞；定时更新所述培养基，并且使所述待处理的细胞的生长密度保持在50％‑80％；检测不到支原体污染的情况之后停止使用所述培养基本发明一种支原体污染的处理方法采用在培养基中添加环丙沙星的方法去除支原体，达到了在对细胞的影响小情况下，即并不是采用先灭活后丢弃方式，彻底清除支原体污染的目的，同时还具有停止使用环丙沙星后不复发的优势。
一种支原体污染处理方法

[发明专利]支原体的PCR检测方法-CN201110194160.0无效
发明人：张贵刚;刘国英;郭伟;徐师军;张领月 -专利权人：金宇保灵生物药品有限公司
申请日： 2011-07-14 - 公布日： 2011-11-16 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明属于生物检测技术领域，涉及一种用于检测支原体的PCR方法。本发明通过提取支原体核酸，应用支原体特异性引物进行PCR扩增及电泳来判断检测样品中是否存在支原体污染，电泳图中如出现435bp特异性条带，表明该样品中存在支原体，如果没有出现435bp特异性条带，表明该样品中不存在支原体
支原体 pcr 检测方法

[发明专利]支原体核酸恒温扩增方法-CN201310330643.8有效
发明人：王敏;马道亮;汤嘉维;于明辉;居金良 -专利权人：上海仁度生物科技有限公司
申请日： 2013-07-31 - 公布日： 2018-02-02 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种支原体核酸恒温扩增方法，具体地，本发明方法包括步骤在反应体系中进行扩增，所述的反应体系中含有扩增支原体的特异性引物对，所述引物可以从极低支原体拷贝数的检测样品中扩增出对应于支原体特征性序列的扩增产物本发明方法能够高特异性、高灵敏度、低污染、快速地对含有支原体RNA的待测样品进行扩增，尤其适用于对含有生殖支原体MG和/或肺炎支原体MP的待测样品进行扩增和检测，具有检测效率高，准确度高的特点。
支原体核酸恒温扩增方法

[发明专利]一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法-CN201310579845.6有效
发明人：张秀文;李阳;闫艳丽;刘雪;王二先;盛璐丝 -专利权人：浙江美保龙生物技术有限公司
申请日： 2013-11-19 - 公布日： 2014-02-05 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法，属于兽用生物制品技术领域。本发明的猪肺炎支原体培养基，在培养猪肺炎支原体时可以提高猪肺炎支原体耐受力，降低猪肺炎支原体凋亡率；本发明的猪肺炎支原体培养基，可以提高猪肺炎支原体培养菌数，培养菌液浓度达1010-11/ml，比普通培养基提高5-10倍以上；本发明的猪肺炎支原体培养基，在培养猪肺炎支原体时可以同时抑制其他细菌生长，降低培养猪肺炎支原体培养的污染风险。
种猪肺炎支原体培养基及其制备方法

[发明专利]一种可区分阳性对照污染的支原体荧光定量PCR阳性对照品、检测方法及其应用-CN202210151566.9在审
发明人：陈宗梦;李靖;曾志琴;吴强;曹春来;李文丹 -专利权人：联邦生物科技（珠海横琴）有限公司;珠海联邦生物医药有限公司;珠海联邦制药股份有限公司
申请日： 2022-02-18 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明公开了一种可区分阳性对照污染的支原体荧光定量PCR阳性对照品、检测方法及其应用。本发明提供了一种荧光定量PCR阳性对照品，是在支原体的高度保守区插入一段无关序列得到；以其作为阳性对照，设计内部探针来区分阳性样品和阳性对照，规避了可能出现交叉污染的问题，建立了一种可区分阳性对照污染的支原体检测方法该方法可判断qPCR检测结果的准确性，排除阳性对照污染对待测样品的干扰，高度灵敏、检测范围广，可在科研及生物制品业对细胞支原体污染进行检测。
一种区分阳性对照污染支原体荧光定量 pcr 检测方法及其应用

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