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[发明专利]一种黄瓜大孢子培养中克服再生植株花打顶的方法-CN201410678014.9有效
发明人：刘立功;李军;张峰;王晶;赵泓;于拴仓;崔瑾;杨红红 -专利权人：北京市农林科学院
申请日： 2014-11-21 - 公布日： 2015-04-22 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明属于植物组织培养领域，提供一种黄瓜大孢子培养中克服再生植株花打顶的方法，该方法通过将发生花打顶现象的再生植株移至恢复培养基进行恢复培养，并控制所述恢复培养的光照条件、温度条件、湿度条件，将所述发生花打顶的再生植株恢复为正常再生植株所述恢复培养基为：以MS基本培养基为基础，添加赤霉素0.3-1.0mg/L。本发明通过恢复培养基，与光照条件、温度条件、湿度条件协同作用，可以使发生花打顶的小植株打破花打顶生理障碍，大大提供黄瓜大孢子培养的植株再生率；本发明操作简便易行，成本低廉，适合在黄瓜大孢子培养中广泛推广使用
一种黄瓜大孢子培养克服再生植株打顶方法

[实用新型]一种细菌生物被膜耐药性检测装置-CN202123332763.0有效
发明人：赵勇;陶倩;许天明;张昭寰;刘静;吴倩;黄振华 -专利权人：上海海洋大学
申请日： 2021-12-28 - 公布日： 2022-05-24 - 主分类号： C12Q1/18 文献下载
摘要：本实用新型提出一种细菌生物被膜耐药性检测装置，包括容纳构件、承载构件及遮罩构件，容纳构件通过可拆卸部件组合形成，其内部具有细菌生物被膜培养室、清洗室、药敏室及恢复培养室，承载构件安装于容纳构件中，并分别与细菌生物被膜培养室、清洗室、药敏室及恢复培养室配合，其内部具有放置检测溶液的空间，遮罩构件安装于容纳构件上，并分别与细菌生物被膜培养室、清洗室、药敏室及恢复培养室配合，由遮罩构件对细菌生物被膜培养室、清洗室、药敏室及恢复培养室进行遮罩防护该检测装置可拆卸为独立的细菌生物被膜培养室、清洗室，药敏室及恢复培养室，可将培养室单独拆下对培养室的细菌进行生物被膜培养，不其余各室内溶液的储存及效能。
一种细菌生物耐药性检测装置

[发明专利]一种茄子遗传转化方法-CN201710744775.3有效
发明人：陈火英;李想;周露;刘杨;葛海燕 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2017-08-25 - 公布日： 2021-08-06 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明提供了一种茄子遗传转化方法，包括如下步骤：S1、将茄子种子前处理后置于发芽培养基中进行发芽培养，得无菌茄子幼苗；S2、对幼苗进行处理获得外植体，取外植体接种于预培养基中进行预培养；S3、活化含目的基因的农杆菌，配置含所述农杆菌的侵染菌液；S4、将预培养所得外植体用所述侵染菌液侵染后，在共培养基中进行共培养；S5、将共培养所得外植体经清洗、浸泡后，置于第一恢复培养基中进行第一恢复培养，再置于筛选培养基中进行筛选培养；将筛选所得外植体置于第二恢复培养基进行第二恢复培养；S6、取第二恢复培养所得不定芽进行生根培养，将再生植株进行驯化移栽。
一种茄子遗传转化方法

[发明专利]一种恢复间充质干细胞全能性的方法-CN201210326437.5有效
发明人：吴耀炯;郭玲;周莹 -专利权人：清华大学深圳研究生院
申请日： 2012-09-06 - 公布日： 2014-03-26 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种恢复间充质干细细胞全能性的培养方法。本发明提供了一种恢复间充质干细细胞全能性的方法，包括如下步骤：1）将全能性降低的离体间充质干细胞悬滴培养，得到悬滴培养后的细胞；2）将所述悬滴培养后的细胞继续悬浮培养，实现恢复间充质干细细胞全能性。本发明的实验证明，本发明提供了一种恢复间充质干细胞全能性的方法，具体采用3D培养，将经过多次传代培养的间充质干细胞（全能性降低的离体间充质干细胞）经3D培养处理后，其增大的体积逐渐恢复、细胞活性增强、克隆能力和分化能力增强、其旁分泌作用也有所提高，使已经衰老的间充质干细胞重返年轻，恢复了干细胞特性。
一种恢复间充质干细胞全能性方法

[发明专利]一种桃休眠芽茎尖超低温离体保存方法-CN202010731089.4有效
发明人：方伟超;陈璋;王力荣;曹珂;王新卫;陈昌文 -专利权人：中国农业科学院郑州果树研究所
申请日： 2020-07-27 - 公布日： 2021-10-26 - 主分类号： A01N3/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种桃休眠芽茎尖超低温离体保存方法，包括以下步骤：预培养：取桃休眠芽茎尖，置于预培养基中进行预培养；玻璃化脱水处理：采用PVS3溶液进行80～120min的脱水处理；液氮冻存；解冻、卸载；恢复培养：卸载后的桃休眠芽茎尖置于恢复培养基中进行恢复培养；预培养基和恢复培养基中均添加一定量的活性炭和抗坏血酸。本发明以桃休眠芽茎尖为材料，减少了低温驯化步骤，简化了加载液处理、玻璃化液脱水处理步骤，改良了预培养基和恢复培养基，各步骤处理过程中对茎尖造成的损伤小，经保存后的茎尖再生率高，为桃种质资源长期稳定保存提供了一种新途径
一种休眠芽茎尖超低温保存方法

[发明专利]一种农杆菌介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法-CN202010074742.4有效
发明人：武莹;贺晓庆;宋金岭;杨进孝 -专利权人：北京市农林科学院
申请日： 2020-01-22 - 公布日： 2022-03-01 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：所述方法包括如下步骤：1)用含有目的基因的载体的农杆菌侵染玉米自交系京724幼胚，得到侵染后幼胚；2)将所述侵染后幼胚接种至共培养基培养基中进行培养，得到共培养后幼胚；3)将所述共培养后幼胚接种至恢复培养基中进行培养，得到恢复培养后幼胚；4)将所述恢复培养后幼胚接种至筛选培养基中进行培养，得到抗性愈伤；5)将所述抗性愈伤接种至再生培养基中进行培养，得到幼苗；6)将所述幼苗在生根培养基中培养，得到玉米自交系京724转基因植株
一种杆菌玉米骨干自交系遗传转化方法

[发明专利]氨基酸营养缺陷型恢复的原核菌株用于重组产生多肽的用途-CN201910857484.4在审
发明人： E·科佩茨基;C·尚茨 -专利权人：弗·哈夫曼-拉罗切有限公司
申请日： 2014-02-19 - 公布日： 2019-12-06 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本文报道的是用于在原核细胞中产生多肽的方法，其包括在化学成分明确的基础生长培养基中培养包含编码多肽的一种或多种核酸的原核细胞并从所述原核细胞或所述原核细胞的细胞周质或从培养基中回收多肽的步骤，其中所述原核细胞是氨基酸营养缺陷型恢复的原核细胞，其中所述氨基酸营养缺陷型恢复的原核细胞在相同的培养条件下和在相同的生长培养基中相比于未恢复的原核细胞需要向所述生长培养基中补充较少的氨基酸，并且其中所述化学成分明确的基础生长培养基不含对应于已经在营养缺陷型恢复的原核细胞中恢复的营养缺陷型的氨基酸
原核细胞生长培养基多肽氨基酸营养缺陷营养缺陷型恢复氨基酸培养包含编码培养条件细胞周质培养基核酸回收补充

[发明专利]氨基酸营养缺陷型恢复的原核菌株用于重组产生多肽的用途-CN201480009903.4在审
发明人： E·科佩茨基;C·尚茨 -专利权人：弗·哈夫曼-拉罗切有限公司
申请日： 2014-02-19 - 公布日： 2015-11-04 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本文报道的是用于在原核细胞中产生多肽的方法，其包括在化学成分明确的基础生长培养基中培养包含编码多肽的一种或多种核酸的原核细胞并从所述原核细胞或所述原核细胞的细胞周质或从培养基中回收多肽的步骤，其中所述原核细胞是氨基酸营养缺陷型恢复的原核细胞，其中所述氨基酸营养缺陷型恢复的原核细胞在相同的培养条件下和在相同的生长培养基中相比于未恢复的原核细胞需要向所述生长培养基中补充较少的氨基酸，并且其中所述化学成分明确的基础生长培养基不含对应于已经在营养缺陷型恢复的原核细胞中恢复的营养缺陷型的氨基酸
氨基酸营养缺陷恢复菌株用于重组产生多肽用途

[发明专利]一种淡水砂梨种质离体保存与恢复方法-CN201810773644.2在审
发明人：曾令达;宋冠华;陈勇智;尹艳;郑倩;庄伟敏;翟秋艳 -专利权人：惠州学院
申请日： 2018-07-15 - 公布日： 2019-06-11 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明提供一种淡水砂梨种质离体保存与恢复方法，包括步骤：步骤(1)诱导无菌试管苗，选取淡水砂梨幼嫩新梢预处理后的带芽茎段为外植体，获得无菌试管苗；步骤(2)继代保存试管苗，将所述无菌试管苗切成高为1‑3cm、带1‑4片小叶的无菌试管苗茎段接入保存培养基并保存培养试管苗6‑7个月；步骤(3)恢复培养试管苗，将保存的试管苗的带节茎段接种于恢复培养基，室温和光照条件下进行恢复培养，本发明所提供的一种淡水砂梨种质离体保存与恢复方法是一种消耗电能少，低保存成本的种质保存方法，本方法操作简单方便，工序少，本方法保存淡水砂梨种质资源的成活率高，恢复培养成活率可达90％以上。
淡水砂无菌试管苗试管苗保存种质离体保存恢复培养培养基恢复成活率预处理带节茎段带芽茎段光照条件种质保存种质资源小叶外植体继代茎段新梢接种诱导消耗

[发明专利]一种食用菌液体菌种及其生产方法-CN201410244283.4有效
发明人：黄伟 -专利权人：保山富群农业科技有限公司
申请日： 2014-06-04 - 公布日： 2014-10-22 - 主分类号： A01G1/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种食用菌液体菌种的生产方法，其中，所述生产方法包括以下步骤：步骤一：将食用菌菌种接种于PDA培养基中进行活化，培养后分离获得活化菌丝体；步骤二：将活化菌丝体接种于固态木屑培养基中培养28-32天获得由菌丝体和固态木屑培养基组成的恢复培养物1；步骤三：将恢复培养物1粉碎至粒径为20-40目后以3-4cm的厚度平铺在浅盘中密封培养2-3天，获得恢复培养物2；步骤四：将恢复培养物2捣碎至粒径不大于本发明所提供的方法操作简单、不需要复杂的培养设备，生产效率高。利用本发明所提供的方法制备获得的食用菌液体菌种具有质量稳定、菌种强壮、退化慢、宜于保藏运输等优点。
一种食用菌液体菌种及其生产方法

[发明专利]一种悬浮培养细胞单克隆筛选培养方法-CN201911361000.3有效
发明人：吴宗学;李跃;王增福;李海鹰;倪娇;赵成全;程海波;史张艳 -专利权人：乾元浩生物股份有限公司
申请日： 2019-12-25 - 公布日： 2021-12-14 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开一种悬浮培养细胞单克隆筛选培养方法，属于细胞培养技术领域。本发明通过在细胞培养容器内加入明胶溶液预处理，辅助促贴壁培养基，驯化悬浮细胞恢复贴壁特性，待适应贴壁后经有限稀释法进行单克隆培养，再以悬浮驯育培养基进行悬浮培养驯化，完成悬浮培养细胞单克隆筛选培养。本发明方法通过对悬浮细胞恢复贴壁培养特性，有效解决了悬浮细胞单克隆筛选培养的难题，细胞具有悬浮亲源性，大大缩短悬浮培养驯化时间。本发明提供了一种促贴壁培养基和一种悬浮驯育培养基，分别可用于恢复悬浮细胞贴壁特性和辅助细胞悬浮培养驯化。
一种悬浮培养细胞单克隆筛选方法

[发明专利]一种石榴玻璃化试管苗恢复培养基和培养方法-CN202010053215.5在审
发明人：王菲;尹燕雷;冯立娟;杨雪梅;唐海霞;王增辉 -专利权人：山东省果树研究所
申请日： 2020-01-17 - 公布日： 2020-05-15 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种石榴玻璃化试管苗恢复培养基和培养方法。本发明的石榴玻璃化试管苗恢复培养基专门针对石榴玻璃化试管苗，可使90％以上的石榴玻璃化试管苗恢复为正常壮苗，并实现增殖系数达到2.6～4.7，是一种实用高效的培养基。本发明依次采用依次采用紫光+中性光混合培养、中性光培养进行石榴玻璃化试管苗的培养，其中光培养阶段采用夹层培养，紫光培养能够调节隐花色素的比例、促进合成叶绿素，加速蛋白质合成、抑制徒长；LED中性光中红光光谱比例大，既促进壮苗形成又克服了单色光照射引起的生长弊端，夹层培养克服了培养容器上下产生温度差和内部产生水珠等不利生长的因素。
一种石榴玻璃化试管恢复培养基培养方法

[发明专利]一种恢复失活石蒜属种子活力的方法-CN201110027393.1有效
发明人：常乐;夏宜平;陈菁珏;肖郁绵;郑日如;吴昀 -专利权人：浙江大学
申请日： 2011-01-26 - 公布日： 2011-09-07 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种恢复失活石蒜属种子活力的方法，包括：将干瘪的石蒜属种子第一次消毒后播种于仅含琼脂的第一固体培养基中，恢复饱满后第二次消毒，剥取完整的胚，离体培养。本发明方法采用胚抢救技术，对失活种子的胚进行离体培养，使失活的石蒜属种子恢复活力，胚在培养基中迅速膨大、伸长，萌发率高，而且操作简单。
一种恢复石蒜种子活力方法

[发明专利]一种农杆菌介导的葡萄座腔菌基因转化方法-CN201410172134.1有效
发明人：王洪凯;林福呈 -专利权人：浙江大学
申请日： 2014-04-25 - 公布日： 2017-05-10 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了一种农杆菌介导的葡萄座腔菌基因转化方法，包括制备葡萄座腔菌的原生质体，并对原生质体进行恢复培养；将含有目的基因的质粒载体转化到农杆菌中；将农杆菌与原生质体混合，于诱导平板上共培养后转移到筛选平板上培养并且原生质体在共培养前，需要进行恢复培养，当恢复培养时间为2～6h时，每管转化材料可获得20～30个潜在转化子，当恢复培养时间超过6h或低于2h，转化效率迅速下降，只能获得少数潜在转化子甚至难以得到潜在转化子
一种杆菌葡萄座腔菌基因转化方法

[发明专利]一种西藏虎头兰茎尖微滴玻璃化法超低温保存方法-CN201610954253.1有效
发明人：李唯奇;林亮;贾艳霞;徐倩 -专利权人：中国科学院昆明植物研究所
申请日： 2016-10-27 - 公布日： 2017-07-11 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种西藏虎头兰微滴玻璃化超低温保存方法，包括以下步骤：1)材料获取，在西藏虎头兰离体植株上取大约2mm长的节段，将节段在无菌条件下接入VW基础培养基；2)茎尖切割，在体视镜下，切割茎尖，将外层的两片叶原基切去；3)茎尖预培养，切割得到的茎尖在预培养培养基上暗处理；4)加载处理，将茎尖在加载溶液中；5)植物微滴玻璃化处理，在冰上处理；6)超低温保存，将经过PVS2处理的茎尖转移到无菌铝箔条上并插入液氮；7)解冻和卸载处理，将铝箔条从液氮中移出并直接转入卸载溶液；8)恢复培养，将解冻后的茎尖转移到恢复培养基上进行恢复培养，超低温保存茎尖的存活率和再生率更高，解冻后的茎尖在恢复培养阶段生长更为迅速。
一种西藏虎头兰茎尖微滴玻璃化超低温保存方法

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