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[发明专利]一种微囊藻毒素MC-LR的批量纯化方法-CN202110600925.X有效
发明人：谢林伸;刘瑛;黎双飞;冯杰;刘芳;王煜;郝明途;蒙艳 -专利权人：深圳市环境科学研究院
申请日： 2021-05-31 - 公布日： 2021-08-24 - 主分类号： C07K14/405 文献下载
摘要：一种微囊藻毒素MC‑LR的批量纯化方法，旨在克服现有技术中从自然水体中得到的微囊藻样品复杂度高、杂质干扰大，得到的藻毒素含量低，且样品重复性差导致藻毒素制备工艺需不断调整的缺点，该方法是从铜绿微囊藻中提取并纯化得到微囊藻毒素MC‑LR，包括以下步骤：一、铜绿微囊藻的实验室培养；二、微囊藻毒素MC‑LR的粗提取；三、采用MCI GEL CHP20P为填料的色谱柱去除粗提液中的杂质，得到初步纯化的微囊藻毒素；四、通过制备型HPLC对初步纯化的微囊藻毒素进一步纯化，得到色谱纯度大于95%的微囊藻毒素MC‑LR。本发明得到的微囊藻毒素纯度较高，且能够实现批量制备，为后续藻毒素的各项研究奠定了物质基础。
一种微囊藻毒素 mc lr 批量纯化方法

[发明专利]一种微囊藻毒素的提取和纯化方法-CN201010524841.4有效
发明人：谢平;王文静;国晓春;梁高道;吴来燕;张伟;戴明;张大文 -专利权人：中国科学院水生生物研究所
申请日： 2010-10-29 - 公布日： 2011-01-26 - 主分类号： C07K14/405 文献下载
摘要：本发明公开了一种微囊藻毒素的提取和纯化方法，是一种以收获于野外的水华蓝藻的干粉为原料，从中提取高纯度的微囊藻毒素MC-RR与MC-LR的方法，步骤如下：A、甲醇粗提微囊藻毒素MC-RR与MC-LR；B、粗提液过ODS柱精提微囊藻毒素MC-RR与MC-LR；C、半制备色谱仪分离微囊藻毒素MC-RR与MC-LR；D、微囊藻毒素MC-RR与MC-LR保存。本发明方法原料来源广，成本低，操作过程简单，并且所提取出的微囊藻毒素的纯度均在97%以上，符合科研工作对毒素纯度的要求。
一种微囊藻毒素提取纯化方法

[发明专利]利用辐照降解水体中微囊藻毒素－LR的方法-CN200510037643.4无效
发明人：郑正;张继彪;杨光俊;冯景伟;帖靖玺;周培国;喻晓;牟艳艳;杨林锋;钟云 -专利权人：南京大学
申请日： 2005-01-07 - 公布日： 2005-08-03 - 主分类号： C02F1/00 文献下载
摘要：本发明提供一种利用辐照的方法降解水体中的微囊藻毒素－LR的方法，是一种高效节能型的水处理技术。本发明利用辐照降解水体中微囊藻毒素－LR的方法，采用γ射线或高能电子束对含有微囊藻毒素－LR的水体进行辐照处理，将水体中的微囊藻毒素－LR降解。
利用辐照降解水体中微囊藻毒素 lr 方法

[发明专利]一种微囊藻毒素单克隆抗体及其制备方法与应用-CN200710119212.1有效
发明人：何苗;盛建武;施汉昌 -专利权人：清华大学
申请日： 2007-07-18 - 公布日： 2008-02-20 - 主分类号： C07K16/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种微囊藻毒素单克隆抗体及其制备方法与应用。本发明的微囊藻毒素单克隆抗体是微囊藻毒素－LR的单克隆抗体，它按照包括以下步骤的方法制备：1)在微囊藻毒素－LR的第七位氨基酸残基N－甲基脱氢丙氨酸上引入一个氨基，得到经氨基修饰的微囊藻毒素－LR多肽；将该经氨基修饰的微囊藻毒素－LR多肽与载体蛋白偶联得到完全抗原A；2)将步骤1)的完全抗原A免疫小鼠，取免疫小鼠的脾细胞，与小鼠骨髓瘤细胞融合，筛选出阳性杂交瘤细胞株；培养所述阳性杂交瘤细胞株或将所述阳性杂交瘤细胞株注入同系小鼠腹腔诱生腹水，得到微囊藻毒素－LR的单克隆抗体。该单克隆抗体可用于微囊藻毒素－LR的检测及其免疫亲和纯化。
一种微囊藻毒素单克隆抗体及其制备方法应用

[发明专利]一种微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒-CN200710119213.6有效
发明人：何苗;盛建武;施汉昌 -专利权人：清华大学
申请日： 2007-07-18 - 公布日： 2007-12-26 - 主分类号： G01N33/577 文献下载
摘要：本发明公开了一种微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒。该微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒，包括包被抗原、微囊藻毒素－LR多克隆抗体或单克隆抗体以及酶标二抗；所述包被抗原为完全抗原A；所述完全抗原A按照如下方法制备：在微囊藻毒素－LR的第七位氨基酸残基N－甲基脱氢丙氨酸上引入一个氨基，得到经氨基修饰的微囊藻毒素－LR；再将该经氨基修饰的微囊藻毒素－LR与载体蛋白偶联得到所述微囊藻毒素－LR与载体蛋白的偶联物，即完全抗原A。本发明的微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒检测范围在0.10μg/L－30.00μg/L之间，定量检测区间在0.30μg/L－10.00μg/L之间，平均回收率(100.3±5.9)％，批内误差小于15％，准确度和精密度符合要求，能进行环境样品中微囊藻毒素－LR的大规模快速筛查和预警监测。
一种微囊藻毒素免疫检测试剂盒

[发明专利]微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒-CN200710119211.7有效
发明人：何苗;盛建武;施汉昌 -专利权人：清华大学
申请日： 2007-07-18 - 公布日： 2007-12-26 - 主分类号： G01N33/577 文献下载
摘要：本发明公开了一种微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒。该微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒，包括包被的微囊藻毒素－LR多克隆抗体或单克隆抗体和酶标抗原；所述酶标抗原中的抗原为完全抗原A；所述完全抗原A按照如下方法制备：在微囊藻毒素－LR的第七位氨基酸残基N－甲基脱氢丙氨酸上引入一个氨基，得到经氨基修饰的微囊藻毒素－LR；再将该经氨基修饰的微囊藻毒素－LR与载体蛋白偶联得到所述微囊藻毒素－LR与载体蛋白的偶联物，即完全抗原A。本发明的微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒检测范围在0.08μg/L－16.30μg/L之间，定量检测区间在0.20μg/L－10.70μg/L之间，检测时间1.5小时，可同时检测上百个样品，平均回收率(98.8±4.7)％，批内误差小于10％，能进行环境样品中微囊藻毒素－LR的大规模快速筛查和预警监测。
微囊藻毒素免疫检测试剂盒

[发明专利]微囊藻毒素-LR在制备预防和治疗肺纤维化的药物中的应用-CN201710014483.4有效
发明人：王亚平;徐力致;王洁;赵庆亚 -专利权人：南京大学
申请日： 2017-01-09 - 公布日： 2018-12-28 - 主分类号： A61K38/12 文献下载
摘要：本发明涉及微囊藻毒素‑LR的医药用途，尤其是微囊藻毒素‑LR在制备预防和治疗肺纤维化的药物中的应用，属于医药技术领域。本发明经过验证，微囊藻毒素‑LR可以改善由博来霉素引发的肺纤维化状态。微囊藻毒素‑LR可抑制博莱霉素引发的肺纤维化相关分子TGF‑β、TNF‑α、IL‑1β、IL‑6、NF‑κB、ET‑1 mRNA表达的升高。微囊藻毒素‑LR可抑制博莱霉素引发的肺组织VEGF mRNA表达的增高。微囊藻毒素‑LR通过TGF‑β/Smad通路及抑制血管生成等途径，干预并缓解博莱霉素诱导大鼠肺纤维化。
微囊藻毒素 lr 制备预防治疗纤维化药物中的应用

[发明专利]一种采用可见光催化剂磷酸银降解水中微囊藻毒素-LR的方法-CN201310311666.4在审
发明人：隋欣;樊正球;王祥荣;邵伟;陆君;赵恒 -专利权人：复旦大学
申请日： 2013-07-24 - 公布日： 2013-11-27 - 主分类号： C02F1/30 文献下载
摘要：本发明属环保技术领域，具体涉及一种采用磷酸银催化剂降解水中微囊藻毒素-LR的方法。本发明通过磷酸银在模拟可见光源——氙灯照射下产生羟基自由基来降解微囊藻毒素-LR。羟基自由基通过进攻Adda氨基酸侧链上的共轭双键、苯环基团、甲氧基以及微囊藻毒素-LR七肽环的不饱和双键，使其结构改变，从而彻底降解微囊藻毒素-LR，达到脱毒的目的。在合理的实验参数运行下，采用本方法在5h内对微囊藻毒素-LR的降解率可达99.91%。
一种采用可见光催化剂磷酸降解水中微囊藻毒素 lr 方法

[发明专利]水体中微囊藻毒素MC-LR浓度的反演方法-CN201910456816.8有效
发明人：王志刚;王赛赛;张晴静;孙宇 -专利权人：扬州大学
申请日： 2019-05-29 - 公布日： 2022-02-11 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明公开了水体中微囊藻毒素MC‑LR浓度的反演方法，包括：以水样中铜绿微囊藻胞外有机物归一化的特征荧光峰强度作为自变量，水样中归一化的微囊藻毒素MC‑LR浓度为因变量构建一元线性反演方程，其中，特征荧光峰强度和微囊藻毒素MC‑LR浓度均以水样中叶绿素a浓度进行归一化处理；取待检测的水样，测量水样中铜绿微囊藻胞外有机物的三维激发发射矩阵荧光光谱，获得铜绿微囊藻胞外有机物的特征荧光峰强度，然后代入一元线性反演方程中，获得微囊藻毒素MC‑LR的浓度。本方法无需样品前处理，可实现微囊藻毒素MC‑LR浓度的快速在线监测，以铜绿微囊藻胞外有机物特征荧光峰强度作为构建方程的变量，为反演方法提供了新的思路。
水体中微囊藻毒素 mc lr 浓度反演方法

[发明专利]蛋白磷酸激酶PP2A催化亚基与微囊藻毒素MC-LR结合位点的应用-CN202310522054.3在审
发明人：龚健科;展春华 -专利权人：华中科技大学
申请日： 2023-05-10 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： A61K45/00 文献下载
摘要：本发明涉及蛋白磷酸激酶PP2A催化亚基与微囊藻毒素MC‑LR结合位点的应用，属于生物医药领域。本发明蛋白磷酸激酶PP2A催化亚基第243位亮氨酸和/或第269位半胱氨酸作为微囊藻毒素MC‑LR结合位点的应用，或者该第243位亮氨酸和/或第269位半胱氨酸作为微囊藻毒素MC‑LR中毒的解毒药物靶点的应用，所述解毒药物靶点用于筛选阻断微囊藻毒素MC‑LR与蛋白磷酸激酶PP2A催化亚基结合的药物。该第269位的半胱氨酸与微囊藻毒素MC‑LR形成共价键，所述第243位的亮氨酸与微囊藻毒素MC‑LR形成范德华力。将上述位点作为药物靶标，设计筛选阻断MC‑LR与PP2A催化亚基C亚基结合的药物，从而对MC‑LR中毒进行解毒。
蛋白磷酸激酶 pp2a 催化微囊藻毒素 mc lr 结合应用

[发明专利]一种微囊藻毒素‑LR酶联免疫检测试剂盒-CN201710212973.5在审
发明人：齐红莉;王睿睿;王茜;徐海龙;郭立;杨广 -专利权人：天津农学院
申请日： 2017-04-01 - 公布日： 2017-07-28 - 主分类号： G01N33/577 文献下载
摘要：本发明公开了一种微囊藻毒素‑LR酶联免疫检测试剂盒，属于酶联免疫分析技术领域。本发明配制的试剂盒，包括盒体，设在盒体内的酶标板和盒体内的试剂，试剂盒采用酶联免疫吸附(ELISA)直接竞争法检测微囊藻毒素‑LR；其特征在于，酶标板上包被微囊藻毒素‑LR抗体；所述试剂包括微囊藻毒素‑LR辣根过氧化物酶标记抗原溶液、微囊藻毒素‑LR标准溶液、浓缩洗涤液、底物显色液、反应终止液。本发明的酶联免疫检测试剂盒具有简便、快速、灵敏、准确、廉价的特点，其灵敏度可以达到0.05ng/mL，尤其适用于水体、藻类食品中微囊藻毒素‑LR的残留检测。
一种微囊藻毒素 lr 免疫检测试剂盒

[发明专利]一种检测生物体内微囊藻毒素MC-LR的方法-CN201310120054.7无效
发明人：刘利平;苏晓明;陈桃英 -专利权人：上海海洋大学
申请日： 2013-04-09 - 公布日： 2013-07-10 - 主分类号： G01N30/88 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测生物体内微囊藻毒素MC-LR的方法，包括微囊藻毒素MC-LR的提取、微囊藻毒素MC-LR的富集、分离与纯化、UPLC-MS定性分析和外标法定量分析步骤。本发明方法能对生物体内的微囊藻毒素MC-LR进行定性、定量检测，检测结果可靠，重现性好，灵敏度高，应用该方法能检测虾类等生物体内是否存在累积的MC-LR；本发明方法不仅适用于生物体内微囊藻毒素MC-LR的定性及定量检测，而且能为研究微囊藻毒素在生物体内的累积、传递和代谢解毒以及对水产品进行的安全性评估提供参考；该发明方法操作简单，能节省检测时间和化学试剂。
一种检测生物体内微囊藻毒素 mc lr 方法

[发明专利]抗微囊藻毒素抗体的杂交瘤细胞株及其所分泌的单克隆抗体-CN201710212862.4有效
发明人：齐红莉;王睿睿;徐海龙;王茜;贾旭颖;周文礼 -专利权人：天津农学院
申请日： 2017-04-01 - 公布日： 2020-04-24 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种抗微囊藻毒素抗体的杂交瘤细胞株及其所分泌的单克隆抗体，所述细胞株的保藏号为CGMCC NO.13802。用BSA与微囊藻毒素‑LR偶联后的微囊藻毒素‑LR‑BSA免疫BALB/c小鼠，取其脾脏与Sp2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合，用HAT培养基进行选择性培养。用OVA与微囊藻毒素‑LR偶联后的抗原微囊藻毒素‑LR‑OVA作为酶联免疫吸附分析的包被原，用ELISA方法，对杂交瘤细胞培养上清中的抗体进行检测，筛选获得稳定分泌抗微囊藻毒素抗体的杂交瘤细胞株6G7。本发明单克隆抗体可特异性识别MC‑LR，对MC‑LR的50％抑制浓度IC50为0.26ng/mL。可用于微囊藻毒素的生物活性的研究、免疫学检测方法建立及其样品前处理试剂的制备。
抗微囊藻毒素抗体杂交瘤细胞株及其分泌单克隆抗体

[发明专利]钯-金合金纳米笼免疫层析试纸条检测微囊藻毒素-LR的方法-CN201410262215.0有效
发明人：杨云慧;王勤;牛司朋;唐赛赛;尹寒蕊;崔光鑫;黄贵春;郑丽 -专利权人：云南师范大学
申请日： 2014-06-13 - 公布日： 2014-08-20 - 主分类号： G01N33/577 文献下载
摘要：钯-金合金纳米笼免疫层析试纸条检测微囊藻毒素-LR的方法，属免疫分析化学技术领域。以Pd纳米颗粒为晶种子制备出具有中空结构的Pd-Au双金属纳米笼，用于标记微囊藻毒素-LR单克隆抗体喷涂到结合垫，于检测线上喷涂BSA偶联微囊藻毒素-LR，以羊抗鼠IgG喷涂控制线制得用于快速检测水体中微囊藻毒素-LR的免疫层析片条，用竞争免疫层析法，通过读取检测线上滞留的金纳米笼-微囊藻毒素抗体结合物的灰度值，对试样中微囊藻毒素-LR进行定量分析。由于合金中两种金属元素的协同作用，Pd-Au合金对蛋白质分子中的巯基和氨基结合力高于单金属金纳米笼的结合力，因此在用Pd-Au合金纳米笼标记微囊藻毒素抗体时，比用金纳米笼标记时更容易，形成的Pd-Au合金纳米笼-微囊藻毒素抗体结合物更稳定。
合金纳米免疫层析试纸检测微囊藻毒素 lr 方法

[发明专利]对微囊藻毒素－LR进行化学修饰并合成完全抗原的方法-CN200410096072.7有效
发明人：何苗;盛建武;施汉昌 -专利权人：清华大学
申请日： 2004-11-29 - 公布日： 2005-04-06 - 主分类号： G01N33/531 文献下载
摘要：本发明涉及对微囊藻毒素－LR进行化学修饰并合成完全抗原的方法，属于免疫检测技术领域，包括对微囊藻毒素－LR的化学修饰和用戊二醛1步法合成完全抗原两部分；本方法选择第7位氨基酸Mdha作为连接位点，Mdha远离致毒基团Adda，因而抗体能够有效的识别出微囊藻毒素和节球藻毒素；而且远离两个可变的氨基酸，因而能够识别出微囊藻毒素的各种异构体，可提高微囊藻毒素－LR抗体的特异性。
微囊藻毒素 lr 进行化学修饰合成完全抗原方法

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