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[发明专利]一种毕赤酵母β-葡萄糖苷酶制剂的制备方法-CN201811440154.7在审
发明人：孙静涛;史学伟;王军;武强;李小军 -专利权人：石河子开发区天易特色果蔬加工生产力促进中心（有限责任公司）
申请日： 2018-11-29 - 公布日： 2019-02-01 - 主分类号： C12N9/42 文献下载
摘要：一种毕赤酵母β‑葡萄糖苷酶制剂的制备方法，它涉及生物食品工程领域。一种毕赤酵母β‑葡萄糖苷酶制剂的制备方法如下：A、采用紫外光结合激光复合诱变毕赤酵母菌；B、克鲁维毕赤酵母酶制剂的制备。采用上述技术方案后，本发明的有益效果为：生产成本低，在制备过程采用乙醇醇沉、离心、盐析、超滤、冷冻干燥等步骤,产品杂质含量低，符合食品添加剂标准的要求，制备出酶活较高的毕赤酵母β‑葡萄糖苷酶制剂，同时提高了
葡萄糖苷酶毕赤酵母制备食品添加剂标准毕赤酵母菌生产成本低紫外光产品杂质复合诱变工程领域生物食品乙醇醇沉制备过程酶制剂超滤酶活盐析激光

[发明专利]一种游离型非甲醇诱导毕赤酵母表达载体的构建及其应用-CN201910476834.2在审
发明人：吴敬;胡梦凯;夏伟;吴丹 -专利权人：江南大学
申请日： 2019-06-03 - 公布日： 2019-08-30 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及一种游离型非甲醇诱导毕赤酵母表达载体的构建及其在酶重组表达中的应用，属于基因工程技术领域。本发明所述非甲醇诱导毕赤酵母表达载体是将乳酸克鲁维酵母自主复制序列PARS2和毕赤酵母启动子P_GCW14序列插入载体骨架，属于带自我复制序列的游离型载体构建得到的。利用该载体构建的游离型重组毕赤酵母工程菌相对通用的整合型重组毕赤酵母工程菌，分泌生产重组酶的能力显著提升。此外，其发酵原料来源广泛，生产成本较低。
毕赤酵母表达载体非甲醇游离型构建重组毕赤酵母诱导工程菌乳酸克鲁维酵母基因工程技术序列插入载体自主复制序列游离型载体发酵原料生产重组载体构建重组表达自我复制启动子通用的整合型分泌生产成本应用

[发明专利]一种罗非鱼神经肽Y重组蛋白的表达系统-CN200910214231.1无效
发明人：李文笙;王光中 -专利权人：中山大学
申请日： 2009-12-25 - 公布日： 2010-09-08 - 主分类号： C12N15/861 文献下载
摘要：本发明是将带酶切接头的罗非鱼神经肽Y基因克隆入毕赤酵母表达载体中得到重组毕赤酵母表达载体，再将重组毕赤酵母表达载体转化入毕赤酵母感受态细胞，得到毕赤酵母重组株，该重组株表达罗非鱼神经肽Y重组蛋白。
一种罗非鱼神经肽重组蛋白表达系统

[发明专利]利用毕赤酵母制备重组人血红蛋白-CN200710185047.X无效
发明人：中城圭介;帆足洋平;甲斐俊哉;宇野公之;小田切优树 -专利权人：尼普洛株式会社
申请日： 2007-11-06 - 公布日： 2009-05-13 - 主分类号： C07K14/805 文献下载
摘要：本发明提供一种功能性的重组人血红蛋白的制备方法，它包括在培养基中培养下述毕赤酵母属酵母，从所得培养物中回收人血红蛋白，所述的毕赤酵母属酵母是用包含在毕赤酵母属酵母中能够发挥作用的启动子调控下的、编码人血红蛋白α链的DNA的表达载体，及包含在毕赤酵母属酵母中能够发挥作用的启动子调控下的、编码人血红蛋白β链的DNA的表达载体转化的毕赤酵母属酵母。本发明还提供一种表达载体，其从转录方向的上游侧开始依次包含乙醇氧化酶1启动子、编码人血红蛋白β链的DNA、在毕赤酵母属酵母中能够发挥作用的终止子、乙醇氧化酶1启动子、编码人血红蛋白α链的DNA和在毕赤酵母属酵母中能够发挥作用的终止子
利用酵母制备重组血红蛋白

[发明专利]一种DNA分子及毕赤酵母重组质粒和高效表达耐辐射球菌PprI蛋白的毕赤酵母重组菌-CN201410153614.3在审
发明人：杨占山;吴伟;乔惠萍;文玲;施怡;任丽丽;于冬 -专利权人：苏州大学
申请日： 2014-04-16 - 公布日： 2014-07-23 - 主分类号： C12N15/31 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，公开了包含SEQ ID NO:1所示序列的DNA分子，以及插入所述DNA分子的毕赤酵母重组质粒和转化所述毕赤酵母重组质粒到毕赤酵母感受态细胞并高效表达耐辐射球菌PprI蛋白的毕赤酵母重组菌本发明在保持PprI蛋白质氨基酸序列不变的前提下，对耐辐射球菌pprI基因序列进行优化改造，编码合成新的Pi-pprI基因，并首次成功构建毕赤酵母Pi-pprI基因重组质粒pHBM-905A-Pi-pprI和分泌表达PprI蛋白的毕赤酵母重组工程菌GS115-Pi-pprI，获得高效表达和纯化的PprI蛋白质，在辐射损伤防治领域为我国原创性抗放蛋白质药物的研制和应用奠定了坚实的基础。
一种 dna 分子酵母重组质粒高效表达辐射球菌 ppri 蛋白

[发明专利]一株盔状毕赤酵母及其微生物菌剂和应用-CN202310082003.3在审
发明人：张炜炜;易俊洁;刘志佳;孙钰薇;李红;肖玥 -专利权人：昆明理工大学
申请日： 2023-01-20 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12N1/16 文献下载
摘要：本发明涉及一株盔状毕赤酵母及其微生物菌剂和应用，属于微生物发酵技术领域。本发明提供了一株盔状毕赤酵母，所述盔状毕赤酵母保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25675；所述盔状毕赤酵母自身可产乙醇、异丁醇、异戊醇、苯乙醇等具有花果香味的醇类风味物质，并且，所述盔状毕赤酵母可通过产多种糖苷水解酶，破坏蔬菜中的多糖成分，促进芳樟醇、萜烯类、酚类键合态香气成分的释放，产生花香味和甜香味，丰富发酵蔬菜风味，此外，所述盔状毕赤酵母与植物乳酸菌进行2段式接种发酵可避免酵母过度生长造成发酵蔬菜脆度降低
一株盔状毕赤酵母及其微生物应用

[发明专利]粉状毕赤酵母NHG及其在降解氨氮中的应用-CN201510252974.3有效
发明人：刘国华;刘志云;司彦培;石鹏君;蔡辉益;常文环;张姝;郑爱娟 -专利权人：中国农业科学院饲料研究所
申请日： 2015-05-18 - 公布日： 2018-05-01 - 主分类号： C12N1/16 文献下载
摘要：本发明公开了粉状毕赤酵母NHG及其在降解氨氮中的应用。本发明提供的粉状毕赤酵母(Pichia farinosa)NHG，保藏登记号为CGMCC NO.10561。本发明还保护粉状毕赤酵母NHG的培养物。本发明还保护粉状毕赤酵母NHG的菌悬液。本发明还保护一种产品，其活性成分为粉状毕赤酵母NHG、所述培养物或所述菌悬液；所述产品的功能为如下(a)或(b)或(c)或(d)(a)降解氨氮；(b)降解水中的氨氮；(c)降解粪便中的氨氮；(d)降低粪便的氨气散发量本发明提供的粉状毕赤酵母可应用于如下方面(1)改善氨氮污染的水质问题；(2)用于畜禽舍内，改善舍内环境卫生；(3)作为鸡的饲料添加剂使用。
粉状酵母 nhg 及其降解中的应用

[发明专利]一种优化的β-甘露聚糖酶基因MAN及其毕赤酵母表达载体-CN201410147753.5有效
发明人：聂金梅;李阳源;胡爱红;钟开新;周银华 -专利权人：广东溢多利生物科技股份有限公司
申请日： 2014-04-14 - 公布日： 2014-07-02 - 主分类号： C12N15/56 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及优化的β-甘露聚糖酶基因MAN及其毕赤酵母表达载体。构建了优化β-甘露聚糖酶基因的重组毕赤酵母表达载体并将其转化到毕赤酵母感受态细胞X33中筛选得到高效表达β-甘露聚糖酶的转β-甘露聚糖酶毕赤酵母菌株；酶学性质测定表明，优化的β-甘露聚糖酶基因能在毕赤酵母中稳定、高效的表达及遗传，所表达的β-甘露聚糖酶酶活性以及稳定性显著高于原始β-甘露聚糖酶基因毕赤酵母中所表达的β-甘露聚糖酶的酶活性及稳定性。
一种优化甘露聚糖基因 man 及其酵母表达载体

[发明专利]一种适于毕赤酵母表达的高比活植酸酶基因及其制备方法和表达-CN201110005945.9有效
发明人：赵伟;姚泉洪;彭日荷;熊爱生;薛永;朱波;付晓燕;田永生;金晓芬 -专利权人：上海市农业科学院
申请日： 2011-01-12 - 公布日： 2012-07-18 - 主分类号： C12N15/55 文献下载
摘要：本发明公开了一种适于毕赤酵母表达的高比活植酸酶基因及其制备方法和表达。所述适于毕赤酵母表达的高比活植酸酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO 1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO 2所示。本发明对来源于大肠杆菌的APP2植酸酶基因按照毕赤酵母偏爱密码子优化，采用连续延伸PCR方法合成植酸酶APPA2基因，并在原核表达载体上采用DNA重组技术建立突变文库，电击转入毕赤酵母，筛选出高比活植酸酶基因将本发明制备的高比活植酸酶基因构建到毕赤酵母表达载体并转化入毕赤酵母中表达，可用于高比活植酸酶的生产。
一种适于酵母表达活植酸酶基因及其制备方法

[发明专利]一株产乙酸乙酯的异常毕赤酵母及其应用-CN201710669627.X有效
发明人：韩北忠;庞晓娜;陈晶瑜;吕辰;侯林凤 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2017-08-08 - 公布日： 2020-12-22 - 主分类号： C12N1/16 文献下载
摘要：本发明公开了一株产乙酸乙酯的异常毕赤酵母及其应用。本发明公开的产乙酸乙酯的异常毕赤酵母为异常毕赤酵母(Pichia anomala)P6，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.14381。异常毕赤酵母(Pichia anomala)P6对乙醇和低pH具有较高的耐受性，产乙酸乙酯的能力强，添加了异常毕赤酵母P6得到的强化发酵酒醅中乙酸乙酯的含量可比对照提高32.69％，酒醅中总酯的含量可提高28.22％，蒸馏酒原酒中总酯的含量可提高53.5％，说明，异常毕赤酵母(Pichia anomala)P6可广泛应用于白酒等对酯类风味物质有需求的发酵食品工业。
一株产乙酸乙酯异常酵母及其应用

[发明专利]一种重组毕赤酵母分泌表达左聚糖蔗糖酶的方法及其应用-CN202110666077.2有效
发明人：杨辉;仝秋平;陈硕昌;丛豪;郭晓磊 -专利权人：广西大学
申请日： 2021-06-16 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组毕赤酵母，将来自枯草芽孢杆菌的左聚糖蔗糖酶(Levansucrase)基因克隆到毕赤酵母整合质粒上，得到的重组质粒线性化后转化到宿主毕赤酵母，通过同源重组将左聚糖蔗糖酶(Levansucrase)基因整合到毕赤酵母染色体中，挑选出携带高拷贝外源基因的重组毕赤酵母菌株，即得。本发明能够高效分泌表达耐热型左聚糖蔗糖酶，分泌率约100％，重组酶的最适聚合反应温度提高到45℃，具有良好的耐热性，通过简单离心去除毕赤酵母细胞所得的上清液即可作为酶制剂，用于高分子量左聚糖的生产，产物中分子量约
一种重组酵母分泌表达聚糖蔗糖方法及其应用

[发明专利]可利用非甲醇碳源诱导AOX1启动子表达外源蛋白的毕赤酵母菌株-CN201010118071.3无效
发明人：周祥山;张元兴;张平;张文文;柏鹏 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2010-03-05 - 公布日： 2010-10-13 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明提供了几种可利用非甲醇碳源诱导AOX1启动子表达外源蛋白的毕赤酵母菌株，毕赤酵母菌株中PpHXT1基因发生突变，从而不能编码蛋白或编码的蛋白没有活性，进一步地，还有自噬基因PpATG30也发生突变，从而不能编码蛋白或编码的蛋白没有活性；或者毕赤酵母菌株中PpMIG1基因发生突变，从而不能编码蛋白或编码的蛋白没有活性，进一步地，毕赤酵母菌株中PpMIG2基因发生突变，从而不能编码蛋白或编码的蛋白没有活性，本发明的毕赤酵母菌株不仅具有现有毕赤酵母菌株的优势，而且可以采用非甲醇碳源诱导AOX1启动子表达外源蛋白，安全环保，操作简单，成本降低，还可用于食品或者添加剂的生产，适于大规模推广应用。
利用甲醇碳源诱导 aox1 启动子表达蛋白酵母菌株

[发明专利]利用重组库德毕赤酵母发酵连续生产木糖酸和乙醇的方法-CN202110324899.2在审
发明人：嵇豪;金立波;孙达;彭仁义;林苏娥;董夏梦 -专利权人：温州大学
申请日： 2021-03-26 - 公布日： 2021-06-01 - 主分类号： C12P7/58 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用重组库德毕赤酵母发酵连续生产木糖酸和乙醇的方法，采用库德毕赤酵母异源表达新月柄杆菌木糖脱氢酶基因获得重组库德毕赤酵母，利用重组库德毕赤酵母进行发酵，在好氧发酵阶段经过36～48小时后转入厌氧发酵阶段
利用重组库德毕赤酵母发酵连续生产木糖酸乙醇方法

[发明专利]一种重组猪α-干扰素的制备方法-CN201110148880.3有效
发明人：刘美;赵宝凯;廖峰;马立新;余晓岚 -专利权人：北京伟嘉人生物技术有限公司;北京黑金刚农业有限公司
申请日： 2011-06-03 - 公布日： 2011-11-02 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明提供了一种重组猪α-干扰素的制备方法，其是采用常规的PCR方法获得猪α-干扰素基因编码区，将其克隆至毕赤酵母分泌型表达载体pHBM905A中，电转化毕赤酵母菌，筛选高抗性转化子，实现重组蛋白在毕赤酵母中的分泌表达本发明通过优化毕赤酵母表达系统，提高了重组蛋白的抗病毒活性。
一种重组干扰素制备方法

[发明专利]一种用于毕赤酵母表达宿主的多基因敲入方法-CN201910403132.1有效
发明人：蔡孟浩;刘启;师晓娜;张元兴 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2019-05-15 - 公布日： 2022-10-11 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于毕赤酵母表达宿主的多基因敲入方法。针对毕赤酵母缺乏高效的靶向性敲入技术的问题，本发明提供了合适的gRNA靶点。应用本发明的方法进行基因组改造后的毕赤酵母，其生长代谢不受影响。所述方法能够高效地实现多个基因的快速敲入，且可以进行筛选标记的回收，为毕赤酵母异源合成天然产物提供强有力的工具。
一种用于酵母表达宿主多基因方法