本发明适用于生物技术领域,尤其涉及一种人表皮生长因子(hEGF)突变体及其应用,所述突变体基于天然人表皮生长因子如氨基酸序列SEQ ID NO:6和DNA序列SEQ ID NO:1所示,并对hEGF羧基端最后三个氨基酸进行了改变,所述突变体为抗蛋白酶降解的hEGF突变体hEGF‑NQ,氨基酸序列为SEQ ID NO:3所示。本发明以表达天然全长hEGF的质粒pPICZαA‑hEGF为模版,设计三对特异引物,经过PCR扩增获得hEGF‑NQ,hEGF‑H,hEGF‑I三种hEGF突变体基因,将三种hEGF突变体基因连接至质粒将表达的三种突变体与胰蛋白酶孵育,发现与天然hEGF相比,突变体hEGF‑NQ具有最强的抗胰蛋白酶降解能力,因此具有广泛应用前景。
本发明的目的是提供一种植酸酶突变体及其应用,是在植酸酶HTP6M的基础上通过大量的突变筛选,最终获得耐热性得到显著提高的植酸酶突变体,其氨基酸序列为SEQ ID NO:3。本发明以植酸酶突变体HTP6M为基础,提供了包含D35Y单点突变的植酸酶突变体HTP6M1,包含D35Y和F254Y两点突变的植酸酶突变体HTP6M2和包含D35Y、F254Y、Q184E、Y289K、I405L五点突变的植酸酶突变体HTP6M5。与植酸酶HTP6M相比,突变体HTP6M1、HTP6M2和HTP6M5的最适作用温度和pH没有发生改变,但其耐热性得到显著提升。
本发明公开了猪ω7干扰素突变体及其制备方法和应用。本发明首先公开了氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示的猪ω7干扰素以及将其进行单位点突变获得的序列为SEQ ID NO.3所示的抗病毒活性提高的突变体。本发明将该突变体编码基因进行密码子优化得到抗病毒活性明显提升的优化基因。本发明还将SEQ ID NO.3所示突变体分别进行氨基酸单位点突变、双位点突变和多位点突变获得多个抗病毒活性显著提高的猪ω7干扰素突变体。本发明利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中表达所述猪ω7干扰素突变体,所表达产物的抗病毒活性大幅提高。本发明提供的猪ω7干扰素突变体能够用于制备预防或治疗猪病毒性疾病的药物或试剂。
具有抗除草剂活性的小麦蛋白质、其编码基因及应用,其为小麦乙酰羟基酸合成酶的突变体蛋白质,其氨基酸序列如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2或SEQ ID No.3所示,该蛋白质源于小麦6号染色体6A、6B或6D中乙酰羟基酸合成酶基因的表达,将小麦乙酰羟基酸合成酶通过体外突变而获得,其氨基酸序列的特点为与野生型相比,6号染色体6A、6B和6D中分别缺失Trp551位点、Trp550位点和Trp548位点氨基酸,该突变体蛋白质对咪唑啉酮类、磺酰脲类和嘧啶类等多类型除草剂具有抗性,其编码基因转化的植物具有抗咪唑啉酮类、磺酰脲类和嘧啶类等多类型除草剂的活性。