本发明提供了一种适用于谷氨酸棒杆菌的重组表达载体,该表达载体适用于在谷氨酸棒杆菌中表达外源蛋白并具有较高的表达水平。一种适用于谷氨酸棒杆菌的重组表达载体,其特征在于:所述重组表达载体中外源蛋白基因的启动子为∆cspB启动子、信号肽为∆cspB信号肽,所述∆cspB启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示,∆cspB信号肽的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。本发明中的外源蛋白在表达过程中,在信号肽的引导下,表达的外源蛋白能分泌到胞外,不需要经过菌体破碎,分泌出的外源蛋白相对于胞内表达易于纯化;且无胞外蛋白酶,分泌出的外源蛋白在培养基中较为稳定。此外,本发明还提供了外源蛋白的外源蛋白表达系统、应用和外源蛋白的制备方法。