本发明公开了一种金色裂叶桦的BpGLK基因,所述BpGLK基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;该基因表达的蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。还公开了一种金色裂叶桦pGLKRNAi干扰表达载体,包含所述的BpGLK基因。还公开了一种金色裂叶桦的创制方法,包括以下步骤:根据所述的BpGLK基因的保守序列,构建pGLKRNAi干扰表达载体,采用农杆菌介导法导入裂叶桦,使得转基因裂叶桦中的BpGLK基因低量表达,叶片呈现黄色该创制方法通过基因工程育种手段干扰BpGLK基因的表达,进而降低BpGLK在转基因裂叶桦中的表达水平,获取黄色叶片的裂叶桦,是创制裂叶桦新品种的有效方法。
本发明涉及一种油菜黄单胞菌致病变种的实时荧光PCR快速检测引物及试剂盒,所述的引物包括序列为SEQ ID NO:1的上游引物和序列为SEQ ID NO:2的下游引物。本发明根据油菜黄单胞菌木薯致病变种的pthBXam and Tn3基因序列,利用分子生物学分析获得了具有特异性的保守序列,并设计其特异性扩增引物。该保守基因序列为黄单胞菌木薯致病变种不同菌系所共有,以保证从种的水平上检测不同来源的油菜黄单胞菌木薯致病变种的可靠性。
本发明属于基因工程和生物制品研究领域,具体涉及有效抑制猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制的外源性人工miRNA,所述外源性人工miRNA是下述1)或2)的双链核苷酸:1)正义链和反义链的序列分别如SEQID NO.1和SEQ ID NO.2所示;2)正义链和反义链的序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。与针对PEDV蛋白编码基因的siRNA相比,本发明筛选的针对病毒N基因保守序列的人工miRNA能抑制PEDV复制,不仅可作为抗PEDV的新型生物制剂进行开发,而且可用于抗病猪品系培育。
三黄鸡B淋巴细胞刺激因子(cycBAFF)cDNA及其克隆方法和重组应用,涉及生物基因工程领域。三黄鸡B淋巴细胞刺激因子的基因,具有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的序列。其克隆方法如下:根据B淋巴细胞刺激因子的保守序列设计引物;从三黄鸡脾脏提取总RNA;通过RT-PCR方法,一步扩增出全长cDNA序列,克隆入pMD18-T载体,挑取阳性克隆进行测序。所述三黄鸡B淋巴细胞刺激因子的cDNA可通过现有基因工程方法,生产重组cycBAFF,作为鸡类免疫增强剂。