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[发明专利]一种杂交瘤细胞培养用培养基添加剂-CN202011157822.2在审
发明人：刘少华 -专利权人：通山县金瑞生物科技研发中心
申请日： 2020-10-26 - 公布日： 2021-01-15 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明提出了一种杂交瘤细胞培养用培养基添加剂，包括以下组分，转铁蛋白、胰岛素、丙酮酸钠、纤粘连蛋白、谷氨酰胺、油酸、亚油酸、谷胱甘肽、钙盐、镁盐、锌盐、和硒盐，其中胰岛素为重组人源或鼠源胰岛素；本发明在细胞增殖处于低密度时能够有效的维持杂交瘤细胞生长活性，避免其由于密度过低死亡，从而通过提高细胞低密度时的存活率以提高细胞融合效率，获得更高杂交瘤细胞克隆成功率，同时在杂交瘤细胞正常培养生长过程中，提升其生长速度，减少杂交瘤细胞生长时间以缩短实验周期。
一种杂交瘤细胞培养培养基添加剂

[发明专利]抗脂环酸芽孢杆菌单克隆抗体的制备方法-CN201510066124.4有效
发明人：张宇霞;连晓雯;李儒;杜惠芬;李克生;武星;裴瑞萍;宋海珍 -专利权人：甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心
申请日： 2015-02-09 - 公布日： 2018-01-30 - 主分类号： C07K16/12 文献下载
摘要：本发明涉及一种抗脂环酸芽孢杆菌单克隆抗体的制备方法，该方法包括以下步骤⑴制备免疫接种的小鼠；⑵骨髓瘤细胞培养3~4天，得到培养后的小鼠骨髓瘤细胞；⑶将脂环酸芽孢杆菌向免疫接种的小鼠腹腔接种免疫，并且获得脾细胞，经分散脾细胞得到脾细胞沉淀物；⑷培养后的小鼠骨髓瘤细胞离心得到骨髓瘤细胞沉淀物；⑸用DMEM高糖培养液分别悬浮脾细胞沉淀物、骨髓瘤细胞沉淀物并混合，经离心得到沉淀物；⑹沉淀物离心、悬浮，即得融合细胞；⑺将融合细胞进行培养、测定，确定杂交瘤细胞；该杂交瘤细胞进行克隆、筛选得到杂交瘤细胞系；⑻制备单克隆抗体将杂交瘤细胞系按常规方法进行单克隆抗体生产即得。
抗脂环酸芽孢杆菌单克隆抗体制备方法

[发明专利]促进杂交瘤生长的培养基及其制备方法-CN201210548315.0无效
发明人：万晓春;张茜;金言;阮庆国 -专利权人：深圳先进技术研究院
申请日： 2012-12-17 - 公布日： 2014-06-18 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明涉及一种促进杂交瘤生长的培养基及其制备方法。该促进杂交瘤生长的培养基，包括1640完全培养基和添加在所述1640完全培养基中的TLR3激动剂Poly(I:C)，且所述TLR3激动剂Poly(I:C)在所述促进杂交瘤生长的培养基中的浓度为25μg/上述培养基在配制的RPMI 1640完全培养基的基础上，添加了TLR3激动剂Poly(I:C)，并使其在培养基中的最终浓度控制在每毫升25微克，不仅能通过促进B细胞增殖来促进杂交瘤细胞的生长，同时也可以通过促进B细胞分泌特异性抗体这一特性来促进杂交瘤细胞分泌所需单克隆抗体。
促进杂交瘤生长培养基及其制备方法

[发明专利]一种免饲养细胞的杂交瘤细胞液体培养基-CN201611218063.X有效
发明人：高林;李乐;李华春;何于雯;廖德芳;姚俊 -专利权人：云南省畜牧兽医科学院
申请日： 2016-12-26 - 公布日： 2021-12-03 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本申请提供一种免饲养细胞的杂交瘤细胞液体培养基，其中，所述杂交瘤细胞液体培养基含有：a、占总体积20％‑30％的培养过L929细胞的培养液；b、占总体积20％‑30％的培养过C6/36细胞的培养液；c、与现有技术相比，本申请省去了准备饲养细胞的繁琐过程，让合成的杂交瘤细胞更容易被观察，也能正常地生长和繁殖。
一种饲养细胞杂交瘤液体培养基

[发明专利]分泌抗SVA抗体的杂交瘤细胞及其分泌的抗体与应用-CN202111437813.3在审
发明人：闫若潜;马震原;王淑娟;班付国;柴茂;杨海波;刘梅芬;刘影;王东方;郭育培;谢彩华;王华俊;朱前磊;赵雪丽;王翠;刘敏;宋丹 -专利权人：河南省动物疫病预防控制中心
申请日： 2021-11-29 - 公布日： 2022-03-11 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明涉及免疫检测技术领域，具体公开了分泌抗SVA抗体的杂交瘤细胞及其分泌的抗体与应用。本发明的杂交瘤细胞包括杂交瘤细胞株SVA‑VP2‑6D5和/或杂交瘤细胞株SVA‑VP3‑7A9；杂交瘤细胞株SVA‑VP2‑6D5保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C2021277，杂交瘤细胞株SVA‑VP3‑7A9保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C2021276。以杂交瘤细胞株SVA‑VP2‑6D5和SVA‑VP3‑7A9分泌的单克隆抗体共同作为竞争抗体构建的竞争CLEIA，可用于A型塞内卡病毒抗体的定量检测。
分泌 sva 抗体杂交瘤细胞及其应用

[发明专利]一种分泌抗1-氨基-乙内酰脲单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用-CN201710047214.8有效
发明人：柳爱春;刘超 -专利权人：杭州市农业科学研究院
申请日： 2017-01-22 - 公布日： 2020-01-07 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种分泌抗1‑氨基‑乙内酰脲单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，属于生物技术领域。所述杂交瘤细胞株命名为杂交瘤细胞株2G9A3‑35H11，保藏编号为CCTCC NO:C2015141。本发明以AHD‑CP与牛血清白蛋白形成的偶联物为抗原，免疫BALB/c小鼠，再将免疫后得到的脾脏细胞与复壮的SP2/0骨髓瘤细胞进行融合，并采用不添加抗菌素的培养基进行细胞培养，经多次筛选和克隆获得杂交瘤细胞株；该杂交瘤细胞株在体外培养时可大量分泌的抗AHD衍生化产物的特异性抗体，可用于呋喃妥因代谢物的快速、准确免疫检测和免疫分析。
一种分泌氨基乙内酰脲单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用

[发明专利]一种分泌抗孔雀石绿单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用-CN201710047584.1有效
发明人：柳爱春;刘超 -专利权人：杭州市农业科学研究院
申请日： 2017-01-22 - 公布日： 2020-08-18 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种分泌抗孔雀石绿单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，属于生物技术领域。所述杂交瘤细胞株命名为杂交瘤细胞株MG A7，保藏编号为CCTCC NO:C201666。本发明以羧基隐性孔雀石绿与牛血清白蛋白形成的偶联物为抗原，免疫BALB/c小鼠，再将免疫后的小鼠的脾脏细胞与复壮的SP2/0骨髓瘤细胞进行融合，并采用不添加抗菌素的培养基进行细胞培养，经多次筛选和克隆获得杂交瘤细胞株；该杂交瘤细胞株分泌IgM k链单克隆抗体灵敏度高，特异性强，可用于孔雀石绿的快速、准确免疫检测和免疫分析。
一种分泌孔雀石单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用

[发明专利]使用单个抗原特异性B淋巴细胞制备产生抗原特异性抗体的杂交瘤的方法以及单克隆抗体的制备方法-CN200480014764.0无效
发明人：村口笃;岸裕幸;民谷荣一;铃木正康;东保喜八郎;上野实;中里博吉 -专利权人：财团法人富山县新世纪产业机构;村口笃;岸裕幸;民谷荣一;铃木正康
申请日： 2004-03-26 - 公布日： 2006-06-28 - 主分类号： C12N15/08 文献下载
摘要：本发明提供使用单个抗原特异性B淋巴细胞制备产生抗原特异性抗体的杂交瘤的方法和单克隆抗体的制备方法。制备产生抗原特异性抗体的杂交瘤的方法包含：选择1个与某种抗原特异性反应的B淋巴细胞(抗原特异性B淋巴细胞)，对所选择的抗原特异性B淋巴细胞进行培养，使培养增殖的抗原特异性B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，制备杂交瘤使用由该方法制备的杂交瘤制备单克隆抗体。
使用单个抗原特异性淋巴细胞制备产生抗体杂交瘤方法以及单克隆抗体

[发明专利]抗凝血因子VII多克隆抗体的杂交瘤细胞株-CN201510792378.4有效
发明人：张明徽 -专利权人：清华大学
申请日： 2015-11-17 - 公布日： 2019-02-22 - 主分类号： C12N15/06 文献下载
摘要：本发明涉及分泌抗人凝血因子VII多克隆抗体的杂交瘤细胞株及其制备方法。本发明通过用牛血清白蛋白BSA与人凝血因子VII偶联后的偶联物作为抗原免疫Balb/c小鼠，取其脾脏细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合，用HAT培养基进行选择性培养，选择出小鼠脾脏细胞与小鼠杂交瘤细胞SP2/0的融合细胞，最后通过ELISA方法鉴定出分泌抗人凝血因子VII多克隆抗体的杂交瘤细胞株。根据本发明制备的一株杂交瘤细胞株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC C2015195。
抗凝因子 vii 克隆抗体杂交瘤细胞株

[发明专利]抗α-抗胰蛋白酶多克隆抗体的杂交瘤细胞株-CN201510792392.4有效
发明人：张明徽 -专利权人：清华大学
申请日： 2015-11-17 - 公布日： 2019-12-20 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明涉及分泌抗人α‑抗胰蛋白酶多克隆抗体的杂交瘤细胞株及其制备方法。本发明通过用牛血清白蛋白BSA与人α‑抗胰蛋白酶偶联后的偶联物作为抗原免疫Balb/c小鼠，取其脾脏细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合，用HAT培养基进行选择性培养，选择出小鼠脾脏细胞与小鼠杂交瘤细胞SP2/0的融合细胞，最后通过ELISA方法鉴定出分泌抗人α‑抗胰蛋白酶多克隆抗体的杂交瘤细胞株。根据本发明制备的一株杂交瘤细胞株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC C2015194。
胰蛋白酶克隆抗体杂交瘤细胞株

[发明专利]一种杂交瘤融合筛选方法-CN202210952055.7在审
发明人：闫广为;刘立成;阎冰玉;严国权;檀华龙;黄南男;许兴兰;赵睿瑾;肖迎;刘立壮;苗讲笑;许雯婕;苑保凤;薛朦琪;李波;刘通 -专利权人：苏州博奥龙科技有限公司
申请日： 2022-08-09 - 公布日： 2022-11-22 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本发明公开了一种杂交瘤融合筛选方法，包括用适量培养基重悬初步处理后的小鼠骨髓瘤细胞并计数；获取小鼠B细胞；获取初步处理后的小鼠B细胞；用培养基重悬初步处理后的小鼠B细胞并计数；获得小鼠B细胞与小鼠骨髓瘤细胞的初步混合细胞；获得初步融合细胞；将细胞转入融合池中；电融合；将融合的细胞转入HAT培养基中；并在37℃培养，筛选后即获得杂交瘤融合细胞。本发明中，利用电融合的方式，获取小鼠B细胞与小鼠骨髓瘤细胞的杂交瘤细胞，融合的效果好，操作方便。
一种杂交瘤融合筛选方法

[发明专利]一种富集大鼠浆细胞及建立浆细胞杂交瘤的方法-CN202210003945.3在审
发明人：罗芳芳;陆青玲;王德宁;姬山泉;焦洪亮;梅芹;顾继杰 -专利权人：上海药明生物医药有限公司;上海药明生物技术有限公司
申请日： 2022-01-05 - 公布日： 2022-04-15 - 主分类号： C12N5/0781 文献下载
摘要：本发明公开了一种富集大鼠浆细胞及建立浆细胞杂交瘤的方法，包括以下步骤：S1、以大鼠CD138为靶点，利用杂交瘤技术开发特异性抗大鼠CD138单克隆抗体；S2、使用抗大鼠CD138抗体对大鼠浆细胞进行富集，抗大鼠CD138抗体中包含EZ‑Link NHS‑PEG4‑生物素；S3、对小鼠骨髓瘤细胞和大鼠浆细胞进行处理，将处理后的小鼠骨髓瘤细胞和大鼠浆细胞进行细胞电融合；S4、将融合细胞转移至HAT筛选培养基中，在CO2培养箱中培养1～2小时，再铺于96孔细胞培养板中培养，7～14天后进行杂交瘤抗体筛选。本发明提供的方法富集度高，且改良了大鼠浆细胞杂交瘤融合技术，使杂交瘤抗体阳性率提高了10‑20倍，极大地提高融合效率和大鼠浆细胞的生物利用度，且本方法铺板数量低，节约了人力和物力成本。
一种富集大鼠浆细胞建立杂交瘤方法

[发明专利]一种改良大鼠杂交瘤细胞制备的方法-CN201910309921.9在审
发明人：雍金贵;张伦;李森 -专利权人：安徽环球基因科技有限公司
申请日： 2019-04-17 - 公布日： 2019-08-06 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种改良大鼠杂交瘤细胞制备的方法，将细胞因子IL6稳定整合到大鼠骨髓瘤细胞IR983F中，制备出IR983F‑IL6细胞，IR983F‑IL6细胞自身可稳定分泌IL6，细胞活力及单个细胞生存能力远高于IR983F，当制备大鼠杂交瘤细胞后，杂交瘤细胞同样拥有IR983F‑IL6的特性，使得在没有饲养细胞的时候，可以轻松获得大鼠杂交瘤细胞；采用重组表达载体免疫动物大鼠；将大鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合；筛选获得产生目的蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株；该方法可提高杂交瘤细胞活力及存活率，易于大鼠杂交瘤大规模培养制备，在单克隆抗体等蛋白质类生物材料的应用方面，可降低成本和实现规模化生产。
杂交瘤细胞大鼠制备单克隆抗体大鼠骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞融合改良杂交瘤细胞株重组表达载体大规模培养规模化生产细胞单个细胞蛋白质类免疫动物目的蛋白生存能力生物材料饲养细胞细胞活力细胞因子存活率脾细胞杂交瘤整合分泌筛选应用

[发明专利]一种抗氯胺酮杂交瘤细胞株及其制备方法和应用-CN201210588531.8有效
发明人：陈东;邵越水;郑孝君 -专利权人：杭州傲锐生物医药科技有限公司
申请日： 2012-12-29 - 公布日： 2013-04-24 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明公开一种抗氯胺酮杂交瘤细胞株及其制备方法和应用。现有氯胺酮胶体金试纸条检测阈值为1000ng/ml。该杂交瘤细胞株命名杂交瘤细胞株3E7.1，保藏号为CCTCCNO:C2012157。杂交瘤细胞株3E7.1作为分泌抗氯胺酮单克隆抗体的应用。杂交瘤细胞株3E7.1分泌抗氯胺酮单克隆抗体的方法是制备氯胺酮人工抗原；小鼠免疫；细胞融合；筛选出杂交瘤细胞株3E7，克隆化培养得到杂交瘤细胞株3E7.1，并纯化得到抗氯胺酮单克隆抗体。本发明制得氯胺酮人工抗原利于氯胺酮抗体产生，且制备抗体周期短；杂交瘤细胞株3E7.1分泌的抗氯胺酮单克隆抗体具有高灵敏度特点，适用于100ng/ml阈值检测。
一种氯胺酮杂交瘤细胞株及其制备方法应用

[发明专利]一种高通量的单克隆抗体制备方法-CN200510026873.0无效
发明人：张庆华;宋凯;王升年;周佳菁;肖华胜;奚佳捷;彭海林;卫玲 -专利权人：上海生物芯片有限公司
申请日： 2005-06-17 - 公布日： 2006-12-20 - 主分类号： C12N5/16 文献下载
摘要：本发明涉及一种高通量制备单克隆抗体的方法，包括步骤(a)用多种免疫原对非人哺乳动物进行免疫接种；(b)将免疫接种动物的脾细胞，与骨髓瘤细胞混合，并融合形成杂交瘤细胞；(c)收集杂交瘤细胞，培养，制备成杂交瘤细胞悬液；(d)用生物芯片对杂交瘤细胞进行筛选，从而得到分别分泌针对多种所述免疫原的单克隆抗体的杂交瘤细胞系。
一种通量单克隆抗体制备方法