本发明公开了增强型单体细菌荧光素酶基因luxAB,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。以及所述的增强型单体细菌荧光素酶基因luxAB作为生物发光报告基因的应用。luxA和luxB基因融合表达后形成的单体蛋白经过易错PCR突变和化学随机突变,克隆到pBluescriptII载体中,筛选得到9个荧光强度增强的突变体,然后经过shuffling技术,得到一个增强型单体细菌荧光素酶基因从实验结果我们看出该增强型单体细菌荧光素酶不仅可以在革兰氏阴性菌种表达出有活性的荧光蛋白而且还可以应用到革兰氏阳性菌中,是很有前景的生物发光报告基因。