本发明公开了伯克氏菌同源重组系统,该重组系统由一系列伯克氏菌同源重组系统表达质粒构成,分别命名为pBBR1‑Rha‑EThe_bdu8‑kan、其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;pBBR1‑Rha‑ETh_tji49本发明还公开了所述重组系统在伯克氏菌中介导短同源臂的同源重组进行基因组DNA遗传修饰中的应用和该重组系统在伯克氏菌中进行基因插入以激活沉默基因簇的应用。本发明所述的伯克氏菌同源重组系统能够极大地促进伯克氏菌的基因组修饰,使得伯克氏菌的遗传修饰变得简单快捷,也为进一步挖掘伯克氏菌中的次级代谢产物提供了重要的工具,具有广阔的应用前景。
本发明提供一种食源性唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的快速检测方法,包括:在聚合酶反应体系中进行聚合酶链式反应,所述的反应体系中含有扩增唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的特异性引物对和唐菖蒲伯克霍尔德氏菌特异性探针;所述的扩增唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的特异性引物对包括:SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物;所述的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌特异性探针是Taqman探针。本发明建立的食源性唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的快速检测方法,具有特异性强,灵敏度高,检测快速等特点,能满足日常快速检测食品的要求,同时可以免除昂贵仪器的投入,便于在基层推广使用,具有较好的应用前景。
本发明公开了一种伯克氏菌重组菌株,将伯克氏菌CCTCC NO:M2010207中序列如SEQ ID No:1所示的目的基因片段敲除或失活得到。本发明还公开了上述伯克氏菌重组菌株的构建方法,包括:将pJP5603质粒与目的基因片段进行双酶切,得到的酶切产物用DNA连接酶连接,得到重组质粒,再将重组质粒转入伯克氏菌中,得到伯克氏菌重组菌株。本发明还公开了上述伯克氏菌重组菌株在在生产抗小麦赤霉病菌活性化合物cFP和防治小麦赤霉病中的应用,其在农业、药品生产领域和生物工程领域中具有很好的推广前景。
本发明涉及微生物技术领域,具体涉及一株伯克霍尔德氏菌SYRTI‑N28、菌剂及其应用。一株伯克霍尔德氏菌(Burkholderia lata SYRTI‑N28),所述的伯克霍尔德氏菌于2023年04月18日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2023546。所述的伯克霍尔德氏菌能够溶解难溶性磷,能够产吲哚乙酸,且具有促进植物生长的作用,具有广阔的应用前景。