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[发明专利]一种仿真型瓣膜间质细胞钙化模型的建立方法-CN202110115428.0有效
发明人：李君丽;陈茂;廖延标;黄方洋;瞿天一;邵若宸 -专利权人：四川大学华西医院
申请日： 2021-01-28 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开了一种仿真型瓣膜间质细胞钙化模型的建立方法，属于生物医学技术领域，包括以下步骤：S1分离原代钙化的VICs；S2配制条件诱导培养基；S3分离培养正常VICs；S4钙化诱导。本发明通过收集的钙化病人VICs原代细胞源性条件培养基，对人或大鼠原代VICs进行诱导，使其由VICs细胞转换为成骨样细胞。
一种仿真瓣膜间质细胞钙化模型建立方法

[发明专利]一种用于治疗烧烫伤术后修复皮下组织的人脐带间充质干细胞分泌因子注射液的制备方法-CN201910177638.5在审
发明人：赵进军;谷广其;杨桂花;赵宇飞;李张鹏 -专利权人：和携科技（北京）有限公司
申请日： 2019-03-09 - 公布日： 2019-06-14 - 主分类号： A61K35/28 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于治疗烧烫伤术后修复皮下组织的人脐带间充质干细胞分泌因子注射液的制备方法，包括以下步骤：将胆固醇和卵磷脂溶解于溶剂，再除去溶剂得脂质体薄膜，加入人脐带间充质干细胞分泌因子基置于摇床上进行水化3小时，待脂质体薄膜脱落，获得大粒径脂质体，将大粒径脂质体超声均质，制得人脐带间充质干细胞分泌因子囊泡脂质体；将人脐带间充质干细胞分泌因子囊泡脂质体和复方电解质注射液混合均匀得到人脐带间充质干细胞分泌因子注射液本发明制得的人脐带间充质干细胞分泌因子注射液刺激培养人原代真皮成纤维细胞，从而使人原代真皮成纤维细胞对Ⅰ型胶原纤维的表达增加，有助于皮肤创面伤口的修复。
人脐带间充质干细胞分泌注射液脂质体真皮成纤维细胞脂质体薄膜皮下组织术后修复大粒径烧烫伤溶剂囊泡制备脐带间充质干细胞复方电解质卵磷脂水化超声均质胶原纤维皮肤创面胆固醇摇床治疗溶解伤口修复刺激

[发明专利]基于中国人群的原代人源乳腺癌移植瘤模型的建立方法及模型-CN201410614663.2在审
发明人：王亘;张钰梓;陈小松;沈坤炜 -专利权人：上海交通大学医学院附属瑞金医院
申请日： 2014-11-04 - 公布日： 2015-04-29 - 主分类号： A61K31/565 文献下载
摘要：本发明公开的一种基于中国人群的原代人源乳腺癌移植瘤模型的建立方法，其包括如下步骤：1)人乳腺癌组织标本的获取；2)第一次接种；3)培养第一次接种小鼠；4)第二次接种；5)培养第二次接种小鼠；6)第三次接种本发明公开的一种基于中国人群的原代人源乳腺癌移植瘤模型由上述方法获得。该基于中国人群的原代人源乳腺癌移植瘤模型可作抗乳腺癌药物筛选和药效学研究中的试验动物。并且本发明较之于国外的原代人源乳腺癌相关模型的建立,实现了对原代人源乳腺癌移植瘤生长的长期稳定刺激,改进了模型的建立的方法。
基于中国人群代人乳腺癌移植模型建立方法

[发明专利]一种缩短人源肿瘤异种移植PDX模型周期的方法-CN202110386573.2在审
发明人：孙晓娇;齐慧;周丽涛;郝雅欣 -专利权人：江苏安泰康健康科技有限公司
申请日： 2021-04-12 - 公布日： 2021-07-23 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本发明揭示了一种缩短人源肿瘤异种移植PDX模型周期的方法，建立PDX模型期间使用骨髓间充质干细胞和基质胶预处理患者的肿瘤组织或肿瘤组织来源的原代肿瘤细胞，将处理后的患者的肿瘤组织或肿瘤组织来源的原代肿瘤细胞接种到免疫缺陷小鼠体内制作临床前肿瘤模型本发明提供的缩短人源肿瘤异种移植PDX模型周期的方法对实体瘤临床前期评估、治疗和预后观察具有重要的价值。
一种缩短肿瘤移植 pdx 模型周期方法

[发明专利]一种人脐带来源间充质干细胞的原代分离方法-CN202110953471.4在审
发明人：崔大祥;沈琦;张文桦;梁辉;彭家伟;高昂;周诚 -专利权人：上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司
申请日： 2021-08-19 - 公布日： 2021-11-05 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及一种人脐带来源间充质干细胞的原代分离的方法，用生理盐水清洗浸泡过乙醇水溶液的脐带，得到干净脐带组织；干净脐带放入生理盐水中，去除静脉和动脉，得到脐带组织；脐带组织剪碎成组织块，大小为1‑3 mm3；用完全培养基清洗处理后的组织块，将组织块进行10～15天的贴壁培养并进行传代，得到从人脐带组织块中生长爬出的人脐带来源的间充质干细胞。本发明使用组织块法分离间充质干细胞操作简便，既可保证细胞数量又可保证原代细胞不会受到损伤。
一种脐带来源间充质干细胞分离方法

[发明专利]高低密度法分离培养大胚龄人神经干细胞的方法-CN201110447605.1无效
发明人：吴卫江 -专利权人：吴卫江
申请日： 2011-12-27 - 公布日： 2012-07-11 - 主分类号： C12N5/0797 文献下载
摘要：本发明提出一种高低密度法分离培养大胚龄人神经干细胞的方法，其步骤包括：原代细胞的分离培养；神经干细胞的传代培养；单细胞定点动态观察克隆形成；诱导分化培养；以及免疫荧光法检测。本发明的高低密度法分离培养大胚龄人神经干细胞的方法，先采用高密度，后降低密度的原代细胞悬浮培养法，可以快速形成克隆球，克隆球开始形成时间比维持低密度培养明显提前，并且生长迅速。
高低密度分离培养大胚龄人神经干细胞方法

[发明专利]一种干细胞分泌因子的获取与纯化方法-CN201910177635.1在审
发明人：赵进军;谷广其;杨桂花;赵宇飞;李张鹏 -专利权人：和携科技（北京）有限公司
申请日： 2019-03-09 - 公布日： 2019-06-25 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及一种干细胞分泌因子的获取与纯化方法，其特征在于，包括脐带组织块的获取步骤、干细胞的原代培养步骤、干细胞的传代培养步骤和干细胞分泌因子的获取与纯化步骤；所述干细胞分泌因子的获取与纯化步骤包括待P本发明制得的干细胞分泌因子与人原代真皮成纤维细胞共培养，刺激培养人原代真皮成纤维细胞，从而使人原代真皮成纤维细胞对Ⅰ型胶原纤维的表达增加，有助于皮肤创面伤口的修复。
干细胞分泌因子真皮成纤维细胞干细胞脐带间充质干细胞无血清培养基过滤器脐带组织块传代培养胶原纤维皮肤创面体积分数原代培养无菌PBS 培养基人源吸除洗液过滤倾倒清洗伤口残留修复刺激

[发明专利]FBXW5及其抑制剂在制备治疗脂肪肝及相关疾病药物中的应用-CN201810037222.9有效
发明人：李红良;白兰 -专利权人：武汉大学
申请日： 2018-01-15 - 公布日： 2020-10-13 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明以L02细胞系、FBXW5过表达的L02细胞系、野生型C57BL/6小鼠原代肝细胞、全身性FBXW5基因敲除小鼠原代肝细胞为实验对象，通过棕榈酸酯体外刺激诱导的肝脏细胞脂肪变性模型来研究FBXW5研究发现在相同的PA刺激下，FBXW5过表达的L02细胞系脂肪滴的面积较人正常肝细胞L02细胞系显著增多；FBXW5‑KO小鼠原代肝细胞中脂肪滴积累程度较WT小鼠原代肝细胞显著降低。
fbxw5 及其抑制剂制备治疗脂肪肝相关疾病药物中的应用

[发明专利]一种人脂肪干细胞原代培养及无血清多向诱导分化方法-CN201811621469.1有效
发明人：鲁红云;李昀;罗国晶;刘红;詹艳利 -专利权人：中山大学附属第五医院
申请日： 2018-12-28 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明属于生物组织工程技术领域，公开了一种人脂肪干细胞原代培养及无血清多向诱导分化方法，采用胶原酶分离法获得皮下和网膜组织来源的人脂肪间充质干细胞，原代培养至80％融合，再进行传代培养，并进行脂肪间充质干细胞的鉴定人脂肪组织易于获得，经原代培养所得的脂肪间充质干细胞足够存活量和存活期，且可诱导分化为成熟的成脂细胞和成骨细胞，为糖尿病、肥胖、骨质疏松症等代谢性疾病细胞治疗提供理想的种子细胞，为组织工程生物化骨、生物化脂肪提供新途径
一种脂肪干细胞培养血清多向诱导分化方法

[发明专利]永生化人源神经干细胞系、制备方法、重组病毒载体及应用-CN201910653817.1有效
发明人：陈陆馗;张桂龙 -专利权人：东南大学
申请日： 2019-07-18 - 公布日： 2021-05-11 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了永生化人源神经干细胞系、制备方法、重组病毒载体及应用，该方法包括如下步骤：(1)构建含L‑myc基因的重组慢病毒载体pLenti‑EF1a‑EGFP‑P2A‑Puro‑CMV‑MYCL‑3Flag；(2)慢病毒包装生产及上清液收集；(3)采用慢病毒上清液对人源神经干细胞进行转染筛选及构建永生化人源神经干细胞系。本发明永生化细胞系的制备方法是一种新的稳定且安全有效的永生化编码策略；制备的永生化人源神经干细胞系具有原代神经干细胞的所有生物学特征，同时也具有正常的三系分化特性，可以成功分化为神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞，同时该细胞系的生长速度及成神经球的能力较原代细胞强，成功传代25代以后依然可以快速增殖，并且无致瘤性。
永生化人源神经细胞系制备方法重组病毒载体应用

[发明专利]制备永久人细胞系的方法-CN200680043000.3有效
发明人：古德伦·希德纳;克里斯托弗·沃尔珀斯 -专利权人：塞维克制药有限责任公司
申请日： 2006-11-15 - 公布日： 2008-11-19 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明涉及一种制备永久人细胞系的方法，其中用允许至少一种细胞转化因子表达的序列和允许至少一种重组多肽表达的序列同时转染分离的原代人细胞。
制备永久细胞系方法

[发明专利]对奥西替尼和厄洛替尼双耐药的人原代肺癌细胞株及其应用-CN202211672432.8在审
发明人：张永昌;向思琦;张星;曾亮;杨农;李敏;许杰;宋连喜 -专利权人：湖南省肿瘤医院;中南大学
申请日： 2022-12-26 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本发明公开了一种对奥西替尼和厄洛替尼双耐药的人原代肺癌细胞株，来源于临床肺腺癌胸水样本，所述人原代肺癌细胞株命名Lu‑01‑1623，保藏编号为CCTCC NO：C2022168，保藏日期为2022年8
奥西替尼厄洛替尼双耐药人原代肺癌细胞株及其应用

[发明专利]一种人肺腺鳞癌PD1抗体获得性耐药原代细胞株及其应用-CN202310229873.9在审
发明人：李谨;冯凤兰 -专利权人：广州医科大学附属第一医院（广州呼吸中心）
申请日： 2023-03-10 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本发明涉及细胞生物学技术领域，尤其涉及一种人肺腺鳞癌PD1抗体获得性耐药原代细胞株及其应用。人肺腺鳞癌PD1抗体获得性耐药原代细胞株NSCLC 002T携带4号外显子的TP53点突变、CDKN2AIP 3号外显子缺失突变、KMT2D 39号外显子缺失突变。该细胞株可以用于人肺腺鳞癌PD1抗肿瘤耐药机制探讨及其相关信号通路的研究、筛选及评估抗肿瘤免疫治疗药物，开发肿瘤免疫治疗耐药逆转药物等。
一种人肺腺鳞癌 pd1 抗体获得性耐药细胞株及其应用

[发明专利]一种NKT细胞培养方法-CN201610532223.1有效
发明人：徐榕;王立燕 -专利权人：北京景达生物科技有限公司
申请日： 2016-07-07 - 公布日： 2019-07-19 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了一种新型的NKT细胞培养方法，该方法包括NKT原代细胞培养和NKT细胞继代培养，所述NKT原代细胞培养是采用外周血单个核细胞接种无血清培养基，所述继代培养的第一天向无血清培养基中加入启动因子人源化的CD3单抗、人源化的CD28单抗和IL‑2；随后在后续的扩增液中加入扩增因子IL‑2和IL‑7。
一种新型 nkt 细胞培养方法

[发明专利]一种提高基因敲入效率的小分子组合物-CN202010994864.5有效
发明人：程涛;张健萍;傅雅文;张孝兵;杨智学;张凤 -专利权人：中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所）
申请日： 2020-09-21 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明还提供了在人原代细胞中实现高效基因敲入的方法，所述方法包括：将基因组编辑组合物引入人原代细胞中，加入所述小分子组合物，使染色质结构松散并且抑制非同源末端连接，提高基因敲入效率。
一种提高基因效率分子组合