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[发明专利]Blec蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用-CN201710418299.6有效
发明人：韩凌霞;廉传江;赵丽丽;张圆圆;陈洪岩 -专利权人：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
申请日： 2017-06-06 - 公布日： 2019-08-23 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明公开了Blec蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明以原核表达的Blec蛋白为免疫原免疫鼠，将免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞融合，经过多次筛选和亚克隆，获得特异性的单克隆细胞株blec‑3D3以及由其分泌的单抗blec‑3D3。
blec 蛋白单克隆抗体及其制备方法应用

[发明专利]鸭瘟病毒缺失gE基因转移载体及其构建方法-CN201210549757.7无效
发明人：魏波;凌红丽;徐丽丽;王睿智 -专利权人：青岛康地恩药业股份有限公司;青岛宝依特生物制药有限公司
申请日： 2012-12-17 - 公布日： 2013-04-24 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明首先利用基因重组获得含有CMV启动子、多克隆酶切位点MCS、BHG pA的质粒pCMV，将LacZ基因表达盒插入载体质粒pCMV中得到载体质粒pCMV-LacZ；其次利用PCR扩增和基因重组构建含有gE基因上下游同源臂共2.1kb DNA序列的载体pdgE；最后将含有CMV启动子、多克隆酶切位点MCS、LacZ基因、BHG pA基因序列亚克隆入载体pdgE内，构建成鸭瘟病毒gE基因缺失转移载体pdgE-LacZ
瘟病缺失 ge 基因转移载体及其构建方法

[发明专利]家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP30基因-CN200810069415.9无效
发明人：周泽扬;潘国庆;蓝希钳;向仲怀 -专利权人：西南大学
申请日： 2008-03-03 - 公布日： 2008-08-27 - 主分类号： C12N15/30 文献下载
摘要：一种家蚕微孢子虫孢壁蛋白基因SWP30，依据蛋白质组学的方法和家蚕微孢子虫的6倍基因组数据，经过克隆与亚克隆得到了编码家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP30编码序列，并经一系列生物技术克隆以及免疫学手段证实。
家蚕孢子虫孢壁蛋白 swp30 基因

[发明专利]芳基－N－甲基氨基甲酸酯类农药残留免疫检测方法-CN200810122762.3无效
发明人：刘凤权;孙覃;胡白石;张奇 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2008-06-30 - 公布日： 2008-12-03 - 主分类号： C07K16/44 文献下载
摘要：以载体蛋白与芳基－N－甲基氨基甲酸酯类农药通用半抗原(HA)偶联，获得完全抗原，以该抗原免疫Balb/C小鼠，应用杂交瘤技术，经ELISA法筛选及有限稀释法亚克隆化，获得可稳定分泌抗芳基－N－甲基氨基甲酸酯类农药的杂交瘤细胞株，制备获得单克隆抗体。以单克隆抗体为基础，建立四种芳基－N－甲基氨基甲酸酯类农药残留ELISA检测方法，该方法具较强的特异性、灵敏性及稳定性，为芳基－N－甲基氨基甲酸酯类农药微量检测提供了快速、灵敏、特异的技术方法。
芳基甲基氨基甲酸酯农药残留免疫检测方法

[发明专利]日本血吸虫SDISP基因及其克隆、表达和应用-CN200510032347.5无效
发明人：汪世平;余俊龙;周松华;何卓;吕志跃;徐绍锐 -专利权人：余俊龙;汪世平
申请日： 2005-11-08 - 公布日： 2007-05-16 - 主分类号： C12N15/30 文献下载
摘要：本发明具体涉及日本血吸虫中国大陆株SDISP基因的基因序列及其克隆表达方法和应用。根据基因库中该基因对应的EST及日本血吸虫成虫cDNA文库载体λgt11多克隆位点邻近核苷酸序列设计引物，以成虫cDNA文库为模板，采用锚式PCR对SjSDISP基因不完整的3’端和5’端进行扩增、测序将该基因亚克隆入原核表达载体pGEX－4T－1中，构建成重组质粒pGEX－4T－1/SjSDISP，转化大肠杆菌BL21后用IPTG诱导表达，以纯化的重组蛋白免疫昆明系小鼠，获得22.8％的减虫率和38.4
日本血吸虫 sdisp 基因及其克隆表达应用

[发明专利]家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP25基因-CN200810069414.4无效
发明人：潘国庆;周泽扬;李春峰;向仲怀 -专利权人：西南大学
申请日： 2008-03-03 - 公布日： 2008-08-27 - 主分类号： C12N15/30 文献下载
摘要：一种家蚕微孢子虫孢壁蛋白基因SWP25，依据蛋白质组学的方法和家蚕微孢子虫的6倍基因组数据，经过克隆与亚克隆得到，编码序列，并经一系列生物技术克隆以及免疫学手段证实。
家蚕孢子虫孢壁蛋白 swp25 基因

[发明专利]一株分泌抗二甲戊灵单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用-CN202110905029.4有效
发明人：胥传来;刘杰;匡华;刘丽强;宋珊珊;胡拥明;徐丽广;胥欣欣;吴爱红 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-08-08 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C07K16/44 文献下载
摘要：一株分泌抗二甲戊灵单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，属于食品安全免疫检测领域。本发明提供了一株分泌抗二甲戊灵单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分类命名为单克隆细胞株，保藏日期2020年9月27日，保藏编号CGMCC No.20791。将高效价，低IC50小鼠的脾细胞，通过PEG方法与小鼠骨髓瘤细胞融合，采用选择培养基，筛选出两种细胞融合后的杂交细胞；再经过间接竞争酶联免疫法筛选细胞并三次亚克隆，最终得到一株单克隆抗体杂交瘤细胞株ACE。杂交瘤细胞株ACE分泌产生的单克隆抗体对二甲戊灵具有较好亲和力和较高灵敏度，为动物源性食品中二甲戊灵的检测提供有力的检测方法及手段。
分泌二甲单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用

[发明专利]抗百合无症病毒的单克隆抗体及其用途-CN200510049388.5无效
发明人：吴建祥;洪健;刘成科;周雪平;叶美琴 -专利权人：浙江大学
申请日： 2005-03-17 - 公布日： 2005-10-19 - 主分类号： C07K16/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种抗百合无症病毒的单克隆抗体及其用途。用提纯的百合无症病毒免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选克隆，获得4株能稳定传代并分泌抗百合无症病毒(LSV)单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞，并分别制备它们的单抗腹水。4株单克隆抗体腹水间接ELISA效价在10^－6以上，5H9和5E12的抗体类型及亚类均为IgG1，而2A2和5H2均为IgG3，4株单克隆抗体的轻链均为κ链。本发明提供的百合无症病毒的单克隆抗体为LSV的快速检测诊断、分型和分子生物学研究提供物质基础和技术支撑，为该植物病毒病的防治打下基础。
百合病毒单克隆抗体及其用途

[发明专利]一种抗猪流行性腹泻病毒S1蛋白杂交瘤细胞株的制备方法-CN201810377292.9在审
发明人：李红卫;刘军;仇珍珍;梁文翰;许明宇;武望盛;陈晃耀;万鹏飞;王升尧;颜仁和 -专利权人：南方医科大学
申请日： 2018-04-25 - 公布日： 2018-10-02 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：分别在首免后14d和35d进行两次加强免疫，采用206佐剂，剂量仍为5μg/只；(2)ELISA方法测定血清抗体滴度高于1：105的小鼠采集脾B淋巴细胞与杂交瘤细胞进行融合，挑选阳性克隆后进行亚克隆得到所述的抗猪流行性腹泻病毒本方法所制备的杂交瘤细胞株可表达猪流行性腹泻病毒S1蛋白的单克隆抗体，该单克隆抗体可用于检测猪流行性腹泻病毒。
猪流行性腹泻病毒杂交瘤细胞株制备单克隆抗体佐剂血清抗体滴度杂交瘤细胞哺乳细胞充分混合加强免疫阳性克隆亚克隆可用小鼠注射采集融合检测

[发明专利]一种抗hCGβ-CTP单克隆抗体及其制备方法-CN201811324006.9在审
发明人：邓兴朝;王锐;陈欢;林金昌;王翠翠 -专利权人：深圳容金科技有限公司
申请日： 2018-11-08 - 公布日： 2019-03-26 - 主分类号： C07K16/26 文献下载
摘要：本发明实施例公开了一种抗hCGβ‑CTP单克隆抗体及其制备方法，其步骤：以CHOK1细胞系表达的偶联CTP的高糖化蛋白为免疫原；将纯化的偶联CTP的高糖化蛋白分4次注入小鼠腹腔，每次时间间隔为3周；采血，分离血清；选效价超过1：10000的小鼠，取脾细胞与骨髓瘤细胞体外融合，经过三次亚克隆筛选获得稳定分泌抗hCGβ‑CTP单抗的特异性杂交瘤细胞株；将扩大培养细胞株注入小鼠腹腔以生产腹水，提纯获得hCGβ‑CTP单克隆抗体。本发明所制备是针对hCGβ‑CTP28肽特异性单克隆抗体，具有良好的抗原特异性，进一步提高检测的敏感性和特异性，并为避孕疫苗的研制奠定基础，在早孕诊断、先兆流产的预测以及肿瘤的诊断方面上具有十分重要的意义
单克隆抗体制备糖化蛋白小鼠腹腔偶联特异性单克隆抗体抗原特异性特异性杂交细胞系表达诊断避孕疫苗次亚克隆分离血清扩大培养瘤细胞株取脾细胞先兆流产骨髓瘤免疫原细胞株腹水提纯采血单抗小鼠效价分泌肿瘤筛选融合检测预测生产

[发明专利]山羊传染性胸膜肺炎支原体单克隆抗体制备方法-CN201811586850.9在审
发明人：文正常;王璇;潘淑惠;吴玙彤 -专利权人：贵州省畜牧兽医研究所
申请日： 2018-12-25 - 公布日： 2019-07-19 - 主分类号： C07K16/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种山羊传染性胸膜肺炎支原体单克隆抗体制备方法，采用山羊传染性胸膜肺炎支原体RPS11基因重组蛋白纯化抗原，按照常规方法免疫Balb/c小鼠，取其脾细胞与SP2/0骨髓细胞进行融合，经过3次亚克隆获得了将杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔中制备腹水，收集腹水经过预处理后选用Protein G‑琼脂糖亲和层析柱纯化，经间接ELISA特异性抗体效价检测，结果显示小鼠腹水测定单克隆抗体的效价均高于10^{4克隆抗体可以与RPS11基因重组纯化蛋白抗原发生特异性反应。}
单克隆抗体山羊传染性胸膜肺炎制备支原体杂交瘤细胞腹水抗原免疫Balb/c小鼠琼脂糖亲和层析特异性抗体效价预处理重组蛋白纯化特异性反应间接ELISA 纯化蛋白次亚克隆骨髓细胞小鼠腹腔小鼠腹水亚型鉴定脾细胞柱纯化效价接种融合检测试验

[发明专利]一种苯丙氨酸单克隆抗体的制备方法-CN201910659912.2在审
发明人：翁炳焕;李兰娟;沈筱芸;许亚丽;盛国平;应燕玲 -专利权人：浙江大学
申请日： 2019-07-22 - 公布日： 2019-12-10 - 主分类号： C07K16/44 文献下载
摘要：本发明涉及一种苯丙氨酸单克隆抗体的制备方法，包括如下步骤：步骤S1:备置纯度≥95%的半抗原D‑Phe，并备置纯度≥95%的筛选原L‑Tyr及L‑Try；步骤S2：免疫原制备；步骤S3：动物免疫；步骤S4：细胞融合和筛选；步骤S41：初筛；步骤S42：复筛；步骤S43：竞争ELISA检测；步骤S44:阳性克隆的扩大培养和冻存；步骤S5：亚克隆；步骤S6：抗体生产。本发明用一种大分子物质与苯丙氨酸偶联，使之有抗原性，免疫小鼠，与鼠骨髓瘤细胞（sp2/0）融合，制备杂交瘤细胞，筛选和制备苯丙氨酸的单克隆抗体，可靠性好，用于试纸条的加工品质高，通过采集新生儿尿液以试纸法来筛查苯丙酮尿症
制备苯丙氨酸单克隆抗体筛选鼠骨髓瘤细胞苯丙酮尿症大分子物质新生儿尿液杂交瘤细胞竞争ELISA 动物免疫抗体生产扩大培养免疫小鼠细胞融合阳性克隆半抗原抗原性免疫原试纸法试纸条亚克隆初筛冻存复筛偶联筛查采集融合检测加工

[发明专利]一种识别与冠心病正相关HDL亚类的抗人ApoA1单克隆及其制备和应用-CN202110570070.0在审
发明人：张杰;吕良杰;张艳;邹艳芳 -专利权人：德赛诊断系统（上海）有限公司
申请日： 2021-05-25 - 公布日： 2021-08-17 - 主分类号： C07K16/28 文献下载
摘要：一种识别与冠心病正相关HDL亚类的抗人ApoA1单克隆及其制备和应用。本发明公开了一种ApoA1单克隆抗体D11‑6，所述ApoA1单克隆抗体D11‑6能够特异性识别ApoA1蛋白特定抗原表位。所述ApoA1单克隆抗体D11‑6由杂交瘤细胞株D11‑6分泌，所述杂交瘤细胞D11‑6保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏日期为2021年4月26日，保藏编号为CCTCC NO：C202187
一种识别冠心病相关 hdl apoa1 单克隆及其制备应用

[发明专利]萘乙酸单克隆抗体、杂交瘤细胞株及应用-CN202210088651.5在审
发明人：胥传来;周健;匡华;徐丽广;孙茂忠;吴晓玲;刘丽强;郝昌龙;宋珊珊;郭玲玲;胥欣欣;倪萍;毕雪威;郭鹏飞 -专利权人：无锡迪腾敏生物科技有限公司
申请日： 2022-01-25 - 公布日： 2022-04-12 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明提供萘乙酸单克隆抗体、杂交瘤细胞株及应用，属于食品安全免疫检测领域。杂交瘤细胞株的保藏编号为：CGMCC No.45024。筛选出高效价，低IC50的小鼠脾细胞，通过PEG法与小鼠骨髓瘤细胞融合，选择性培养基，筛选出两种细胞融合后的杂交瘤细胞；再经过间接竞争酶联免疫法筛选细胞并多次亚克隆，得到单克隆抗体杂交瘤细胞株。此细胞株分泌的单克隆抗体，对萘乙酸具有较好的检测灵敏度，对萘乙酸的50％抑制浓度IC50为6.77ng/mL，用于免疫检测试剂盒以及胶体金试纸条，为植物源性食品中添加萘乙酸的检测提供有力的检测手段。
乙酸单克隆抗体杂交瘤细胞株应用

[发明专利]一种分泌褪黑素单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用-CN202310544266.1在审
发明人：刘丽强;姜晓倩;胥传来;匡华;徐丽广;孙茂忠;吴晓玲;郝昌龙;宋珊珊;胡拥明;吴爱红;郭玲玲;胥欣欣 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-05-15 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明涉及一种分泌褪黑素单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，属于免疫检测技术领域。选取高效价、低IC50小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，通过间接竞争酶联免疫法进行筛选，并三次亚克隆，得到一株褪黑素单克隆抗体杂交瘤细胞株。此细胞株分泌的单克隆抗体，对褪黑素具有较好的特异性和检测灵敏度(IC50为36.83ng/mL)。
一种分泌褪黑素单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用