本发明公开了一种工程化的不耐热粘质沙雷氏菌核酸酶突变体。在相同的缓冲体系中,于60℃保持20min后,野生型粘质沙雷氏菌核酸酶酶活性为12.5%,而本发明提供的不耐热突变体R146D/D156R/D229R/D245R(SEQ ID NO:12,不含N端21该不耐热突变体用于蛋白质纯化时,在目标蛋白质中的大量DNA已经降解一段时间后,且在不需要的降解发生之前,对该不耐热突变体进行热灭活。
本发明公开了一种沙雷氏菌及其在蛋白酶生产中的应用,属于微生物技术领域以及发酵技术领域。本发明筛选出了一种沙雷氏菌(Serratia sp.)JWG‑D15,此沙雷氏菌JWG‑D15可高产氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白酶,将此沙雷氏菌JWG‑D15在大米蛋白的诱导下摇瓶发酵2d,可使发酵上清液中的蛋白酶酶活高达400~460U/mL;将此沙雷氏菌JWG‑D15发酵获得的蛋白酶以终酶活500U/mL的添加量加入大米蛋白浓度为10g/L的大米蛋白分散液中进行反应,仅需反应2h,即可使反应上清液中的大米寡肽含量高达