[发明专利]鸡痘病毒弱毒疫苗株7.3Kb片段的基因组分析无效

专利信息
申请号: 98117361.6 申请日: 1998-08-21
公开(公告)号: CN1245832A 公开(公告)日: 2000-03-01
发明(设计)人: 金宁一;郭志儒;顾万钧;司兴奎;孙明;王宏伟;刘东海;李萍;殷震 申请(专利权)人: 中国人民解放军农牧大学
主分类号: C12N15/39 分类号: C12N15/39
代理公司: 农业部专利事务所 代理人: 陈如明
地址: 130062 *** 国省代码: 吉林;22
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摘要: 发明是利用限制性内切酶BamHⅠ消化中国鸡痘病毒282E4弱毒疫苗株基因组,获得7.3kb片段。在该片段经亚克隆后获得的A、B、C和D四个片段,在其中B和D片段的BglⅡ和EcoRV位点分别插入P11P7.5-LacZ报告基因,与FPV共转染鸡胚成纤维细胞,经X-gal显色后进行蓝斑筛选,证明此二片段为FPV非必需区。该片段中共含11个开放读码框架,其中ORF9编码蛋白为跨膜蛋白。对此片段分析,为构建FPV表达载体,插入外源基因后,可用于基因工程重组疫苗的制备。
搜索关键词: 痘病毒 疫苗 7.3 kb 片段 基因组 分析
【主权项】:
1、一种新的鸡痘病毒基因,其特征在于:该病毒基因组成如表1:表1:7.3kbBamH1片段的核苷酸序列和开放读码框架(ORF)分析1GGATCCGACGCGGCTGCCAAGACCTTTATACCCGACTCTCGTTCTACTGGACGAACGCGG61AGATTTAAAGCCATGGCTGACGTATAGTCGAGGACGCCCTCGGTAATAAATTGATTATAT121TTTCAGTTTTAAAAAATTAATTTATATGTACTCAATATCCTTATATAGAATTATTTTATC181TCTTCTGATATACGTTAGGTAGATGCCGTTCAAATAATAAAATATCTGATGACGTTTTTA241TGCGCGTGTTACGTTATTATAATAGATAATAGAAATAAACGTTAAAATAATAATTAATTA301TCTTTTCAGTTGTTAAATATATTCTAGTTTTATAAGCGTTATTCATATATAAAAAATATA361AAAACTAAATCGTATTTAGTATGATGCTACGGCGGTCATTTAACAAATTTACGCGATGGA[ORF1]ME421GTTCAGTTGTACGGGAACTAATAACCAGTTGGCCGTTCACAGATTTACAGAAACGCGTTTFSCTGTNNQLAVHRFTETRF481TACATCTTTCAAAAAAGAACTTTTAGTTAATTTAGGAATAAGTGACTTAAATGATATAAATSFKKELLVNLGISDLNDIK541AAACATATGCGAGGATTCTAAAATATTCTTTCCGGAAAAGAGAACGGAGCTCTTAAGTATNICEDSKIFFPEKRTELLSI601TAAAGATCGTAAATCTAAACAAATAGTTTTCGAAAACTCCCTAAACGATGACTTGCTTAAKDRKSKQIVFENSLNDDLLK661AAAATTACACGCCTTGATCTATGATGAATTAAGTACGGTAGTAGATTCCGTTACCGTAGAKLHALIYDELSTVVDSVTVE721GAATACCGTTACATTGATTATGTATGAAAAAGGAGATTACTTTGCCAGGCATAGAGATTTNTVTLIMYEKGDYFARHTDF781TAGTACCGTCTTTTCTAAAAACATAATATGCGTTCACCTGCTTCTATATTTGGAACAACCSTVFSKNIICVHLLLYLEQP841AGAAACGGGAGGTGAAACGGTTATATATATCGATAATAATACGTCAGTGAAATTAAAAACETGGETVIYIDNNTSVKLKT901AGATCATCTATTTGATAAAACTATAGAACATGAAAGTATTACCGTTGAAAGCGGTAGAAADHLFDKTIEHESITVESGRK961ATGCGTGGCGTTATTCGATGTCTTACTAGAAAAAAAGTTATCCGCGTCAACAAACGTAATCVALFDVLLEKKLSASTNVI1021AGGTAGCATAGAATACTTAGGTAAAAAAATAAATTTATATGACAGAGAAAATGATCTTCAGSIEYLFKKINLYDRENDLQ1081GTTGTGTTATTGTGATATGGTAATAGAAAGAATGACAGAAGATAAAGAATATAGCCTAGGLCYCDMVIERMTEDKEYSLG1141AATGATATCTGATAGATCAGGTAGATGTATAAAATCTCATCATAACGGTAGTATTGTTAGMISDRSGRCIKSHHNGSIVR1201ATACCGTAAAGAAGAATATGGATCTTTCGATGCTCTATGTATATATAACATGAATGAAGTYRKEEYGSFDALCIYNMNEV1261GGATGAAATTTGGACTGGTGATAAGAAACATATTATATGGTCTACTATTGATAAAAAAACDEIWTGDKKHIIWSTIDKKT1321AGGAACGTCTTTTATACCTATAGATCCTGCACTTTACGAAAAGTTAAAAGCTATTTCTTCGTSFIPIDPALYEKLKAISS1381TAAAGAGCATAAAGAATACAAAGATTTGAGAGGGTTTTGTAATAGCAGAACGGAGTATATKEHKEYKDLRGFCNSRTEYI1441TTGTTGTTCGGTATCTAAGTACTATTTCGACTTACCTACAAAAACAGATTTAATACACGACCSVSKYYFDLPTKTDLIHE1501GGTGATTAATTCTATCGATTATGATACTAAGTCAGTGGGTACACCCGACTGGTATACTCTVINSIDYDTKSVGTPDWYTL1561GCCTATAGAAGTTAAACAAACTATCCTAGGTAATATGTCTTACGAAGAGTTATTTAATATPIEVKQTILGNMSYEELFNI1621AGTAAGAGGTAATATAGCTCTTGAAGAAGACAATGAATATGGCTGTGATTAACATTAATGVRGNIALEEDNEYGCD*1681GTAATACTTTTCTAAAAACTAATCTCAAGTATTGTTTACAAGCGACTGAAGTAATAGTTT1741TAGCAAAATAATACCTTTACTGTTAGTTCTACAATCGAAATTATGCTGTAACATGAGGTA1801AGGATATATTTATTAATACGTTACATCTTTCGAAAGACTTTGATCGTAGTATAATATTAT1861ACATCTGCTCTACTTATTATACATAAGAAAATTTGTATTTTATTTAGTGCGCTGATAAAT1921CGTGTTTAAAGTATACAACGGACGTCTATTTCCAAAAAATCTGCGCGTGTTAACGGATTA1981AAATCTACATGAAAATATCTCTTAAACTTTATTTCTACGTATAACAAACAACAGACTGAT2041TTTATATATTACGAATAACTATTTTCTTAGGTTTTTTATATAGATGCTATACAGTGTTTT[ORF11]MLYSVF2101TACGCGTATATACAAAATACGGAAAAATAATAAAACAGAAATGATTCTGGCAATATACGATRIYKIRKNNKTEMILAIYD2161CTGCAATGCCTATATTGTTAAAAAAACAGGTATCGGAAGTATCTTGTTACGCGATAACGGCNAYIVKKTGIGSILLRDNG[ORF9]MPILLKKQVSEVSCYAIT2221TACTAGGAATACTATGCTTAATATTATTTACGATACTAGTAGTCGTAACATGCAAATGGTTRNTMLNIIYDTSSRNMQMVVLGILCLILFTILVVVTCKW2281ATTACGCGTTTCCGTACTTTAGCAAGGTATGTCCTGATGAGTGGATAGGATATAATAGTALRVSVL*YYAFPYFSKVCPDEWIGYNS2341AATGCTACTACTTTACTATCAATGAAACTAATTGGAATGATAGCAAAAAAACTATGCGATKCYYFTINETNWNDSKKTMR[ORF7]MKLIGMIAKKLCD2401GTTATGGATTCTTCATTGATAAGGTTCGATAACATAGAAACTCTAAATTTCGTGTCGCGACYGFFIDKVR*VMDSSLIRFDNIETLNFVSR2461TACGGTAAGGGTAGTTACTGGATAGACATAAATCAAAATAGAAAAATTCCGGGTATTAATYGKGSYWIDINQNRKIPGIN2521TTCTCACTATATTATGAACAAGGCGTTAATGATATTTGTCTATTATTTGACACGAGTAACFSLYYEQGVNDICLLFDTSN2581ATTATCGAAATGTCTTGTATATTTCACGAAAAAACGATATGTGTTAAAGAAGATAGATACIIEMSCIGHEKTICVKEDRY2641ACCCATTGGTATACCGAATACATGCGTTAGATTTACTACCTATTTTTTTATACAATAGTATHWYTEYMR*2701TTTTGTACGTTCTTGTAAACAGAAAATCCGTATAGTTTATATTTTTAATCAAAGTAATAA2761CGAATATCTCGATGTCACGTATAAACGCAGATTCTAGATATTAAATTCTCAACGTACGTC2821ATTTGCATTCCCTGAGATGATACTTTGCTATTTTATTATACCGTAGTCTATACAACCACT2881ACAAAGTTAAACGAAGTAAAATTATTGATTCGTTGTTATTATTTCAGCACAGTAGTACTC2941ACTATCTTCGTTTAAATCTAATAACACGCCCTTTGAAACATTTTTGTGCTAGATAATAAT3001ACGTTATTATTACACTAACCTGTATTTCTTCTAATCTTTAAGGTGTGCTAACGATATATC3061ACGGGATTAAAAGGTTATTAGTAGTCGTATAACAACAACATAATAATAGCACATCTGTAT3121ATTTATATACCTCTCGAGTACATAAAAATAATATGTTTTGATAAAACGTAAATCAATAAG3181TGTATAAGGTATTATTTCTTTTAATGAAGAAATAGGACGTAATGTCTAAATCAGATTTAT3241ATTCCCGAAAATATTTTTCTTAGATGTATATGTTAGTTAAATTACGTGATTATATTATAA3301GTTATCTGCTTACTTTAACATTATATAGTAATTATATACTAACCGATCTTAACACTTCCG3361TACAAAGAGGTATGCCCGCATCTGCGAGATATTGTGATTTTCGTATTTAGATATGTGAAT3421ATAGTTATCTACTAACGCGACTTTCCTCCAATTTACAAAGCTCTAAGGAAAAAAAATAAA3481ATAATACTACCACGTTCCTCTTTTAAGAGTTAACTATTTACTCGGAGGTATCGGTATACA3541TACAATTCTATATAATTTAGTTAATCGCTTTTTACGCGCATAAGTCTACGTATAATGTCT*GQFIGLFLPIKTQVD3601TTGTTTAAGTAACTATCCCTGGAATATTCCTAAAAATAGCGGAATTTTTGTTTGTACGTCAVLFMFPVNAKVIPIKKIGD3661GGCTACTAGGAACATGAAAGGTACGTTCGCTTTTACGATAGGAATTTTCTTTATTCCGTC[ORF10]MKGTFAFTIGIFFIPSTTCLETVSAAETGYEDVKIV3721TGTAGTGCATAATTCGGTAACACTAGCTGCTTCAGTTCCGTATTCATCTACTTTTATCACVVHNSVTLAASVPYSSTFITSKQRINGIRLTKTDSIGVLE3781AGATTTTTGCCTGATATTACCTATCCTCAAAGTTTTTGTATCGGATATACCTACTAATTCDFCLILPILKVFVSDIPTNSGSKFLDNCGMH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