[发明专利]一种用于枯草芽孢杆菌基因编辑系统的构建方法及其应用在审
申请号: | 202310588520.8 | 申请日: | 2023-09-19 |
公开(公告)号: | CN116904493A | 公开(公告)日: | 2023-10-20 |
发明(设计)人: | 付媛媛;丁明;何丛颖;章礼平;刘奎;刘磊;周月越;王晓朋;宋微微;詹萍萍 | 申请(专利权)人: | 宁波海洋研究院;宁波大学 |
主分类号: | C12N15/75 | 分类号: | C12N15/75;C12N15/65;C12N15/64;C12N15/90;C12R1/125 |
代理公司: | 宁波诚源专利事务所有限公司 33102 | 代理人: | 叶桂萍 |
地址: | 315832 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
权利要求书: | 暂无信息 | 说明书: | 暂无信息 |
摘要: | 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌的基因编辑系统的构建方法及其应用,实现了无痕基因敲除及敲入,属于基因工程领域。该方法首先筛选并拼接含有正负筛选标记的基因敲除/入盒,并构建组成型红色荧光表达盒,从而构建相应基因敲除/入质粒;然后将该质粒转入枯草芽孢杆菌,通过反复传代提高基因敲除/入盒替换靶基因的概率,之后通过无抗生素培养进行质粒消除;最后,通过仅含同源臂的消除质粒介导编辑后正负筛选标记的去除及质粒的可视化消除,实现基因的无痕编辑。本发明首次在枯草芽孢杆菌中构建含正负筛选标记及荧光标记的穿梭质粒,并实现了多个基因的无痕敲除及敲入。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 枯草 芽孢 杆菌 基因 编辑 系统 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
暂无信息
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