[发明专利]一种单粒坚硬种子的DNA提取方法在审
申请号: | 202111204893.8 | 申请日: | 2021-10-15 |
公开(公告)号: | CN113862256A | 公开(公告)日: | 2021-12-31 |
发明(设计)人: | 邵芳颖;吕洪飞;王阳;俞敏娜;陈招才;应尚蛟;孙玉强;张志芳 | 申请(专利权)人: | 浙江理工大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 杭州裕阳联合专利代理有限公司 33289 | 代理人: | 周云 |
地址: | 310016 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种单粒坚硬种子的DNA提取方法,将种子子叶形的幼胚和预热至65℃的裂解液加入到装有钢珠的研磨管,磨样至不见片状或块状种子碎片,溶液呈悬浊液;在水浴下裂解1h后离心取上清;氯仿异戊醇混合DNA提取酚试剂进行第一次抽提,离心后取上清,用氯仿异戊醇进行第二次提取,离心后取上清液,混合异丙醇低温储存;离心后弃上清,留白色块状物。75%乙醇清洗,重复乙醇清洗工作至沉淀呈白色絮状。无水乙醇清洗后晾干,加入ddH2O,4℃溶解24h。本发明更加适用于部分质地坚硬、体积大、胚乳多的种子(如柿种子),能提取到高质量的DNA,应用性较强,可处理常规研磨方法无法处理的实验材料。 | ||
搜索关键词: | 一种 坚硬 种子 dna 提取 方法 | ||
【主权项】:
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