[发明专利]一种新型CRISPR/Cas9基因编辑载体在棉花中的使用方法在审
| 申请号： | 202110583854.7 | 申请日： | 2021-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN113122570A | 公开（公告）日： | 2021-07-16 |
| 发明（设计）人： | 金双侠;张献龙;周家伟;扶春阳 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/66;A01H5/00;A01H6/60 |
| 代理公司： | 北京国坤专利代理事务所(普通合伙) 11491 | 代理人： | 张国栋 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及基因工程技术领域，且公开了一种新型CRISPR/Cas9基因编辑载体在棉花中的使用方法，包括以下步骤：获得含有目的序列35S启动子的载体pK2GW7.0，以pK2GW7.0载体为模板，利用Primer5软件设计引物。该新型CRISPR/Cas9基因编辑载体在棉花中的使用方法，对含有棉花内源启动子pGhU6‑7的pRGEB32‑GhU6.7‑NPTⅡ载体进行改造，以35S启动子取代原有系统中驱动Cas9蛋白表达的Ubiquitin启动子，分别选取棉花内源Gh_A06G0606和GhCLA为目标基因验证改造后的新系统在棉花中的应用，利用农杆菌介导的遗传转化将CRISPR/Cas9基因编辑系统导入棉花基因组，然后对新载体的愈伤组织进行Sanger测序和Hi‑TOM测序，检测新系统在异源四倍体棉花基因组中的突变位点及编辑效率，具有良好的探究性、创新性和研究价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 新型 crispr cas9 基因 编辑 载体 棉花 中的 使用方法 | ||
【主权项】：
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