[发明专利]靶向敲除ARID1A基因的sgRNA、构建ARID1A基因缺失细胞株的方法及应用在审
申请号: | 202110572641.4 | 申请日: | 2021-05-25 |
公开(公告)号: | CN113308470A | 公开(公告)日: | 2021-08-27 |
发明(设计)人: | 刘希;廉洁;汪园园;邓元;李晓锋;张冠军 | 申请(专利权)人: | 西安交通大学医学院第一附属医院 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/867;C12N5/10;A61K31/7105;A61P35/00 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 范巍 |
地址: | 710061 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了靶向敲除ARID1A基因的sgRNA、构建ARID1A基因缺失细胞株的方法及应用,属于生物医药技术领域。通过构建重组慢病毒质粒ARID1A sgRNA‑lentiCRISPR v2、将CRISPR/Cas9慢病毒系统通过293T细胞进行包装获得慢病毒颗粒、将慢病毒颗粒感染目的细胞株、有限稀释法传代筛选,可获得稳定的ARID1A基因敲除的细胞株。Western blot蛋白表达检测显示,基因敲除的细胞株ARID1A蛋白表达完全缺失。另外,ARID1A基因敲除的细胞株增殖能力明显增强。结果表明,利用CRISPR/Cas9慢病毒系统成功敲除ARID1A基因后,可促使胃上皮细胞的恶性转化。 | ||
搜索关键词: | 靶向 arid1a 基因 sgrna 构建 缺失 细胞株 方法 应用 | ||
【主权项】:
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