[发明专利]一种制备异源四聚体α2有效

专利信息
申请号: 202110229179.8 申请日: 2021-03-02
公开(公告)号: CN112941093B 公开(公告)日: 2023-02-03
发明(设计)人: 贺红武;冯江涛;冯玲玲 申请(专利权)人: 华中师范大学
主分类号: C12N15/70 分类号: C12N15/70;C12N9/02;C12R1/19
代理公司: 杭州宇信联合知识产权代理有限公司 33401 代理人: 王健
地址: 430079 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要: 发明涉及基因工程和酶工程技术领域,提供了一种制备异源四聚体α2β2型蓝藻PDHc E1的方法,包括:先分别制备蓝藻丙酮酸脱氢酶PDHc E1的α亚基和β亚基所对应的DNA片段,然后将α亚基对应的DNA片段和β亚基对应的DNA片段分别克隆到pETDuet‑1载体的多克隆位点1区域和多克隆位点2区域,获得重组质粒pETDuet‑1‑α‑β;再将重组质粒pETDuet‑1‑α‑β和伴侣蛋白表达质粒pGro7共转化到同一宿主细胞中,得到pETDuet‑1‑α‑β‑pGro7重组宿主细胞;最后进行通过宿主细胞的培养,蛋白诱导表达,菌体收集,超声波破碎等蛋白表达分离纯化流程,即可获得异源四聚体α2β2型蓝藻PDHc E1。本发明提供的制备方法不受生物组织的限制,操作简单、高效、制备成本低,获得的蓝藻PDHc E1产量高、纯度高、活性高。
搜索关键词: 一种 制备 异源四聚体 base sub
【主权项】:
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