[发明专利]一种表达人转铁蛋白受体的重组杆状病毒的制备方法在审
| 申请号： | 202110075933.7 | 申请日： | 2021-01-20 |
| 公开（公告）号： | CN112680424A | 公开（公告）日： | 2021-04-20 |
| 发明（设计）人： | 桑晓宇;杨娜;马知川;费鑫宇;李响;丁莹莹;杜铭怡 | 申请（专利权）人： | 沈阳农业大学 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N15/12;C12N15/866;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京知呱呱知识产权代理有限公司 11577 | 代理人： | 孙志一 |
| 地址： | 110000 辽宁省沈阳市*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种表达人转铁蛋白受体的重组杆状病毒的制备方法。所述方法包括：将A型流感病毒神经氨酸酶的信号肽及跨膜区氨基酸序列替换人转铁蛋白受体的跨膜区，将目的基因优化合成基因序列；所述基因序列经EcoRI和NotI双酶切获得带有酶切位点的目的片段，利用EcoRI和NotI双酶切昆虫细胞表达载体pFastBac1，纯化回收酶切后的目的片段和线性化载体，并通过T4DNA连接酶进行连接反应，得连接产物；所述连接产物转化至DH10Bac感受态细胞，经抗性蓝白斑筛选、分离，得重组杆状病毒穿梭载体reBacmid‑hTfR；将reBacmid‑hTfR转染Sf9昆虫细胞，经三次细胞传代培养，得重组杆状病毒。所述重组杆状病毒复制过程中能够在细胞膜表面表达hTfR，并保持其抗原性与可溶性，可用于后续研制其抗体及生物学功能。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 表达 铁蛋白 受体 重组 杆状病毒 制备 方法 | ||
【主权项】：
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