[发明专利]一种转座因子载体及获得其无选择标记转基因后代的方法在审

专利信息
申请号: 202011464276.7 申请日: 2020-12-14
公开(公告)号: CN112481295A 公开(公告)日: 2021-03-12
发明(设计)人: 瞿绍洪;李莘;潘龙玉;毕冬玲;李利华;田旭丹;王岚岚;龙文莉;许赵蒙;刘中来;赵建华;邹小维;高晓庆;杨海河;曲海艳 申请(专利权)人: 浙江省农业科学院
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82;C12N15/65;G01N21/64
代理公司: 杭州九洲专利事务所有限公司 33101 代理人: 陈继亮
地址: 310021 *** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明涉及一种转座因子载体及获得其无选择标记转基因后代的方法,该载体通过以下步骤构建:1)将绿色荧光蛋白基因(GFP)、红色荧光蛋白基因(mCherry)潮霉素抗性选择标记基因(HPT)、来源于玉米的Ac转座酶基因(AcTPase)和Ds转座因子串联组装在一起,构建转座因子载体pBDL11,其中Ds因子不带有任何选择标记,并且预先在其内部设计一个AscI单酶切位点;2)构建一个在多克隆位点两侧均含有AscI酶切位点的中间载体pBDL11,以组装任意目的基因,然后将目的基因切下并克隆到Ds因子内部。本发明把基于GFP、mCherry双荧光标记的负选择技术与基于PCR的正选择技术相结合,在转基因后代依次淘汰含有T‑DNA的个体和选择含有目的基因的无选择标记个体,从而提高转基因后代的筛选效率。
搜索关键词: 一种 因子 载体 获得 选择 标记 转基因 后代 方法
【主权项】:
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