[发明专利]一种牙源性干细胞的培养与外泌体分离方法在审

专利信息
申请号: 202011371809.7 申请日: 2020-11-30
公开(公告)号: CN112458045A 公开(公告)日: 2021-03-09
发明(设计)人: 于金华;闫朝婷;周洲;吴锦涛;景双林;闫明;李泽汉 申请(专利权)人: 南京医科大学附属口腔医院;江苏省盐业集团有限责任公司
主分类号: C12N5/0775 分类号: C12N5/0775
代理公司: 南京天华专利代理有限责任公司 32218 代理人: 瞿网兰
地址: 210029 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 一种牙源性干细胞的培养与外泌体分离方法,其特征是包括以下步骤:1)配置外泌体分离用的培养基并在4℃以下保存;2)取传代至3‑7代的DPSC为实验对象开始进行实验;3)经过24小时培养,收集细胞上清,为最大程度回收,用1‑2ml无菌PBS洗培养皿两遍,PBS冲洗液+细胞上清作为分离外泌体的对象;4)上一步骤收集的液体在4℃温度下差速离心去除细胞碎片及死细胞,若液体量少冻至‑80℃冰箱待液体充足后进行下一步;5)用规格为0.22µm的滤器去除较大的细胞外囊泡及其他杂质;6)用规格为100KDa超滤管,在4℃,4000*g,30min条件下进行超滤,去除较小的杂质并浓缩得到浓缩液;7)将浓缩液加入外泌体提取得到外泌体。本发明方法简单,成本低,效果好。
搜索关键词: 一种 牙源性 干细胞 培养 外泌体 分离 方法
【主权项】:
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