[发明专利]一种快速测定DNA聚合酶活性的方法在审
申请号: | 202011002396.5 | 申请日: | 2020-09-22 |
公开(公告)号: | CN112176040A | 公开(公告)日: | 2021-01-05 |
发明(设计)人: | 卢辰;罗志丹;陈晓雨;张坤晓;许恒皓;唐雨婷;陈佳玥 | 申请(专利权)人: | 江苏省海洋资源开发研究院(连云港);江苏愚公生命科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/686 | 分类号: | C12Q1/686;C12Q1/48;G01N21/64 |
代理公司: | 北京和联顺知识产权代理有限公司 11621 | 代理人: | 赵宇 |
地址: | 222000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开一种快速测定DNA聚合酶活性的方法,包括:(1)绘制标准曲线并计算线性回归方程:将两种寡核苷酸探针H1和H2以不同比例混合,测量荧光值并绘制标准曲线,计算线性回归方程;(2)恒温条件下进行DNA聚合酶活性检测反应:以步骤(1)中仅含H1的工作溶液为底物,加入dNTP混合液和镁离子,使用该DNA聚合酶对应的反应缓冲液,配制DNA聚合酶活性检测反应体系;(3)中止反应后测定产物荧光值:恒温反应后强行中止反应,降温到室温后测定产物含量,记录30min下的荧光增加值;(4)计算酶活性:将荧光增加值代入步骤(1)中得到的标准曲线对应的线性回归方程,得出体系中产物的含量,计算原酶液活性。不依赖同位素,操作简单,准确度和重复性好。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 测定 dna 聚合 活性 方法 | ||
【主权项】:
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