[发明专利]一种实时检测土壤中马铃薯粉痂病菌的方法在审
| 申请号： | 202010584789.5 | 申请日： | 2020-06-23 |
| 公开（公告）号： | CN111635956A | 公开（公告）日： | 2020-09-08 |
| 发明（设计）人： | 刘霞;杨艳丽;黄勋;钱红洁;张哲 | 申请（专利权）人： | 云南农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12Q1/06;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京睿博行远知识产权代理有限公司 11297 | 代理人： | 龚家骅 |
| 地址： | 650201 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种实时检测土壤中马铃薯粉痂病菌的方法，所述的方法包括引物设计，重组质粒构建，标准曲线制作，灵敏度检测，重复性检测以及样品检测。检测的具体步骤为：称取土样，提取土壤微生物的总DNA，用引物Sps‑1和Sps‑2对粉痂菌ITS区域进行PCR扩增，产物回收后连接到pMD18‑T载体上，转化大肠杆菌DH5，筛选阳性克隆，用碱裂解法提取质粒；根据A260值计算质粒浓度，取新实验样品，比对试验结果在直线方程中的值。本检测方法在普通PCR基础上加入了一个探针，加快了检测速度，还并提高了检测的灵敏度和准确度，解决了由于马铃薯马铃薯粉痂菌不能人工培养，难以检测的难题。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 实时 检测 土壤 马铃薯 病菌 方法 | ||
【主权项】：
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