[发明专利]利用CRISPR-Cas9系统同时沉默番茄miR482b和miR482c及应用在审

专利信息
申请号: 202010562713.2 申请日: 2020-06-19
公开(公告)号: CN111850032A 公开(公告)日: 2020-10-30
发明(设计)人: 栾雨时;洪雨慧;贺晓丽;张媛媛 申请(专利权)人: 大连理工大学
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82
代理公司: 大连格智知识产权代理有限公司 21238 代理人: 刘琦
地址: 116024 辽*** 国省代码: 辽宁;21
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摘要: 发明涉及番茄转基因材料的构建,旨在提供一种运用CRISPR‑Cas9系统同时沉默番茄miR482b和miR482c的基因编辑方法。包括:选择sgRNA靶位点进行克隆,将多个sgRNA表达框架构建到一个载体上,可用于真核表达;将重组质粒转化农杆菌,介导转化番茄愈伤组织获得转基因植株,发苗,获得转基因阳性株系;还提供了利用CRISPR‑Cas9系统同时沉默番茄miR482b和miR482c的应用方法,培育抗晚疫病番茄植株。本发明方法得到的转基因植株中miR482b和miR482c的表达量低于野生型植株,其抗晚疫病效果更优。本发明通过沉默miR482b和miR482c基因使番茄对晚疫病的抗性增强,对培育抗晚疫病番茄品种具有重要意义。
搜索关键词: 利用 crispr cas9 系统 同时 沉默 番茄 mir482b mir482c 应用
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