[发明专利]利用CRISPR-Cas9系统同时沉默番茄miR482b和miR482c及应用在审
申请号: | 202010562713.2 | 申请日: | 2020-06-19 |
公开(公告)号: | CN111850032A | 公开(公告)日: | 2020-10-30 |
发明(设计)人: | 栾雨时;洪雨慧;贺晓丽;张媛媛 | 申请(专利权)人: | 大连理工大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82 |
代理公司: | 大连格智知识产权代理有限公司 21238 | 代理人: | 刘琦 |
地址: | 116024 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明涉及番茄转基因材料的构建,旨在提供一种运用CRISPR‑Cas9系统同时沉默番茄miR482b和miR482c的基因编辑方法。包括:选择sgRNA靶位点进行克隆,将多个sgRNA表达框架构建到一个载体上,可用于真核表达;将重组质粒转化农杆菌,介导转化番茄愈伤组织获得转基因植株,发苗,获得转基因阳性株系;还提供了利用CRISPR‑Cas9系统同时沉默番茄miR482b和miR482c的应用方法,培育抗晚疫病番茄植株。本发明方法得到的转基因植株中miR482b和miR482c的表达量低于野生型植株,其抗晚疫病效果更优。本发明通过沉默miR482b和miR482c基因使番茄对晚疫病的抗性增强,对培育抗晚疫病番茄品种具有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 利用 crispr cas9 系统 同时 沉默 番茄 mir482b mir482c 应用 | ||
【主权项】:
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