[发明专利]一种基于新冠病毒特异性逆转录引物的建库方法及运用有效
申请号: | 202010537252.3 | 申请日: | 2020-06-12 |
公开(公告)号: | CN111647644B | 公开(公告)日: | 2023-08-11 |
发明(设计)人: | 方涛 | 申请(专利权)人: | 武汉菲沙基因信息有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C40B50/06;C12Q1/6869;C12Q1/70;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 武汉天领众智专利代理事务所(普通合伙) 42300 | 代理人: | 陈三九 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖高新技术开发区高新*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于新冠病毒特异性逆转录引物的建库方法,其步骤包括:1)基于新冠病毒一致性序列设计15条特异性逆转录引物;2)基于Tn5VR转座酶对新冠病毒建库测序。本发明另外还公开了该建库方法的运用。本发明针对新冠病毒的高保守区域设计特异性逆转录引物,选择性的逆转录新冠病毒的RNA,从而实现对病毒RNA的特异性富集,提高测序数据中病毒序列的占比。同时,本发明采用特异性的转座酶建库方法,该转座酶仅可切割DNA与RNA杂合链,并在切割位置添加接头序列,实现直接从DNA‑RNA杂合链起始的建库测序方法,可以避免存在的基因组DNA污染,同时可以将建库的起始量量降低至1ng以下,实现超微量的新冠病毒测序。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 病毒 特异性 逆转录 引物 方法 运用 | ||
【主权项】:
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