[发明专利]一种光控基因转录抑制系统及抑制、构建方法在审
申请号: | 201911056029.0 | 申请日: | 2019-10-31 |
公开(公告)号: | CN110628820A | 公开(公告)日: | 2019-12-31 |
发明(设计)人: | 王汉杰;李佳桦;常津;郝亚锋;潘惠卓 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/66;C12N5/10 |
代理公司: | 12201 天津市北洋有限责任专利代理事务所 | 代理人: | 程小艳 |
地址: | 300072*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开一种光控基因转录抑制系统及抑制、构建方法。主要是利用CRISPR系统设计不同sgRNA靶向不同的目的基因。通过引入光控转录抑制系统,在不同的光照条件下,通过蓝光依赖性光响应蛋白cib1和cry2互作驱动HDAC间接作用于靶基因,使其结合至靶基因位点,使组蛋白去乙酰化,基因的转录受到抑制,从而实现光控基因转录抑制。利用“CRISPR基因靶向‑光遗传基因调控”技术,实现VEGF因子及受体基因的精准靶向;同时利用光遗传调控技术,根据个体差异,实现VEGF因子及受体分子的动态实时可控调节。 | ||
搜索关键词: | 光控 基因转录 靶基因 靶向 转录 动态实时 个体差异 光照条件 基因靶向 间接作用 目的基因 受体分子 受体基因 系统设计 遗传调控 遗传基因 抑制系统 转录抑制 光响应 乙酰化 组蛋白 构建 可控 蓝光 位点 蛋白 驱动 基因 引入 调控 | ||
【主权项】:
1.一种光控基因转录抑制系统,其特征在于:所述系统包括sgRNA,dCas9-cib1,cry2-HDAC质粒表达载体;/n其中,所述sgRNA为基因抑制系统靶向部分,设计不同的sgRNA具有特异的靶向性,能够招募dCas9酶;/n所述cib1和cry2为蓝光依赖性光响应蛋白,在488nm蓝光的调控下,发生光响应性互作;/n所述HDAC是一类蛋白酶;/n该系统在蓝光作用下,HDAC结合至靶基因位点,使组蛋白去乙酰化,与带负电荷的DNA紧密结合,染色质致密卷曲,基因的转录受到抑制。/n
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