[发明专利]一种菌核病抗性基因鉴定方法在审
| 申请号： | 201910857788.0 | 申请日： | 2019-09-09 |
| 公开（公告）号： | CN110699420A | 公开（公告）日： | 2020-01-17 |
| 发明（设计）人： | 王政;赵凤云;谭小力;丁丽娜;鲍玲莉;陈婷 | 申请（专利权）人： | 江苏大学 |
| 主分类号： | C12Q1/18 | 分类号： | C12Q1/18;C12N15/74;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 212013 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种菌核病抗性基因鉴定方法。本发明构建待测基因的重组载体pCAMBIA‑35S‑X‑Nos，重组载体转入农杆菌后将待测基因快速转化到烟草叶片中，通过待测基因在烟草中的瞬时表达进行菌核病抗性基因的判定，从而快速鉴定出待测基因是否是菌核病抗性基因；本发明所述的菌核病抗性基因鉴定方法操作简单，不需要进行作物转化，可以有效缩短抗性鉴定时间，操作简单，可以实现快速筛选菌核病抗性基因，为获得抗菌核病优质基因资源提供了经济、简便、快速的有效解决办法。 | ||
| 搜索关键词： | 菌核病抗性 待测基因 基因鉴定 重组载体 基因 基因工程技术 抗性鉴定 快速鉴定 快速筛选 瞬时表达 烟草叶片 优质基因 有效解决 资源提供 作物转化 菌核病 农杆菌 构建 判定 烟草 转入 转化 | ||
【主权项】：
1.一种菌核病抗性基因鉴定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：/n（1）构建载体pCAMBIA-35S-Nos，将待测基因X片段连接入载体pCAMBIA-35S-Nos，构建得到待测基因X的重组载体pCAMBIA-35S-X-Nos；/n（2）重组载体转化农杆菌的感受态细胞，在含有抗生素的培养基中培养得到重组菌悬液；/n（3）将空载菌悬液和步骤（2）中得到的重组菌悬液转入烟草叶片中，继续培养烟草植株；/n（4）将核盘菌菌丝体接种在步骤（3）中转入菌悬液的烟草叶片上，暗培养后统计叶片发病情况，鉴定待测基因是否为抗性基因。/n
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